Freshly harvested tachyzoites were

Freshly harvested tachyzoites were washed by centrifugation twice with invasion medium and resuspended in invasion medium at 4´107 parasitesmlÿ1. Parasites were pretreated for 10min at room temperature with 0±5mM staurosporine before they were assayed for invasion by immuno¯uorescence staining of infected HFF cells. To determine whether the effect of staurosporine was on the parasiteoronthehostcell,HFFcellsinsix-wellplateswere®xed with 2.5% (w/v) formaldehyde for 20min at 08C. Fixed HFF monolayers were washed three times with PBS, then stored overnight at 48C in PBS. HFF monolayers were washed three more times with PBS before being challenged with staurosporine-treated (1mM) 2F tachyzoites (8´106 per well) for 20min at 378C. Parasite invasion was quanti®ed by b-gal assay.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เก็บเกี่ยวสด tachyzoites ถูกล้าง โดย centrifugation สองกับบุกรุกสื่อ และ resuspended ในการบุกรุกที่ 4´107 parasitesmlÿ1 ปรสิตที่ pretreated สำหรับ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องมี 0±5mM staurosporine ก่อนจะถูก assayed สำหรับการบุกรุก โดย immuno¯uorescence ย้อมสีเซลล์ HFF ติดไวรัส เพื่อพิจารณาว่า เป็นผลของ staurosporine ใน parasiteoronthehostcell, xed HFFcellsinsix wellplateswere ® มี 2.5% (w/v) ฟอร์มาลดีไฮด์ใน 20 นาทีที่ c. 08 Monolayers HFF คงถูกล้างสามครั้ง ด้วย PBS นั้นเก็บไว้ค้างคืนที่ 48C ใน PBS HFF monolayers ถูกล้าง 3 ครั้งกับ PBS ก่อนถูกท้าทายด้วยถือว่า staurosporine (1mM) 2F tachyzoites (8´106 ต่อดี) สำหรับที่ 378 ราว 20 นาที บุกรุกปรสิต quanti ® ed โดยทดสอบบีกัล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

tachyzoites เก็บเกี่ยวสดใหม่ถูกล้างโดยการหมุนเหวี่ยงเป็นครั้งที่สองที่มีขนาดกลางและบุก resuspended ในสื่อการบุกรุกที่ 4'107 parasitesmlÿ1 ปรสิตที่ถูกปรับสภาพสำหรับ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องด้วย 0 ± 5mm staurosporine ก่อนที่พวกเขา assayed สำหรับการบุกรุกโดยการย้อมสีimmuno¯uorescenceของเซลล์ที่ติดเชื้อ HFF เพื่อตรวจสอบว่าผลของการ staurosporine อยู่บน parasiteoronthehostcell ที่ HFFcellsinsix-wellplateswere®xedกับ 2.5% (w / v) ฟอร์มาล​​ดีไฮด์สำหรับ 20min ที่ 08C คง monolayers HFF ถูกล้างสามครั้งกับพีบีเอสแล้วเก็บไว้ค้างคืนที่ 48C ในพีบีเอส monolayers HFF ถูกล้างอีกสามครั้งด้วยพีบีเอสก่อนที่จะถูกท้าทายด้วย staurosporine รับการรักษา (1 mM) 2F tachyzoites (8'106 ต่อกัน) สำหรับ 20min ที่ 378C บุกพยาธิได้รับการทดสอบโดยquanti®edขแกลลอน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เก็บเกี่ยวสดใหม่ tachyzoites ถูกล้างโดยการเหวี่ยงแยกสองครั้งกับการบุกรุกปานกลาง และ resuspended ในการบุกรุกปานกลาง 4 ใหม่ 107 parasitesml ÿ 1 ปรสิตยังได้รับสำหรับวันที่อุณหภูมิห้องกับ 0 ± 5mm staurosporine ก่อนที่พวกเขามีปริมาณการรุกรานโดยมมูโน¯ uorescence staining ติดเชื้อ hff เซลล์เพื่อตรวจสอบว่าผลของ staurosporine บน parasiteoronthehostcell hffcellsinsix wellplateswere , ® xed 2.5 % ( w / v ) ที่ใช้สำหรับ 20 นาทีที่ 08c คง hff monolayers ได้ซักสามครั้งกับ PBS แล้วเก็บไว้ค้างคืนที่ 48c ใน PBShff monolayers ได้ซักสามครั้งกับ PBS ก่อนที่จะถูกท้าทายด้วย staurosporine ปฏิบัติ ( 1mm ) ห้อง 2F tachyzoites ( 8 ใหม่ 106 ต่อ ) สำหรับ 20 นาทีที่ 378c . การบุกรุกปรสิตคือการไฟฟ้า® ed โดย b-gal
( . . .