5-reductase assay was performed ac

5-reductase assay was performed according to our previous
paper (Kumar et al., 2011). Briefly, the reaction solution contained
0.2 ml of various plant extracts in 50% ethanol, 1.0 ml of 0.02 mM
phosphate buffer (pH 6.5), 0.3 ml of 500 ppm testosterone in 50%
ethanol, and 1.0 ml of rat microsomal suspension. Reactions were
then initiated by the addition of 0.5 ml of 0.77 mg/ml NADPH
in phosphate buffer, followed by incubation in a water bath at
37 ◦C for 30 min. The reactions were then stopped by adding
5.0 ml dichloromethane, and then adding 0.5 ml of 100 ppm propyl
p-hydroxybenzoate in 50% ethanol (as an internal standard for
HPLC). Four millilitres of the organic phase was decanted and
evaporated to dryness under controlled pressure. The residues
were collected and dissolved in 5.0 ml of methanol. An aliquot
of 10 l was injected into the HPLC system (Agilent 1100 series,
using a Hypersil®-ODS column, 250 mm
×
4.6 mm, 5 M). Themobile phase was a mixture of methanol and deionized water
(65:35) with a flow rate of 1.0 ml/min. A UV detector at 245 nm
was used to collect data. Finasteride was used as a standard
enzyme inhibitor. All of the results were expressed as finasteride
equivalent 5-reductase inhibitory activity (FEA) value (units of
mg finasteride equivalent per 1 g extract).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

5 - reductase ทดสอบทำตามของเราก่อนหน้านี้กระดาษ (Kumar et al., 2011) สั้น ๆ ปฏิกิริยาโซลูชั่นมีอยู่0.2 ml สารสกัดจากพืชต่าง ๆ ใน 50% เอทานอล 1.0 มล.ของ 0.02 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.5), 0.3 ml ของฮอร์โมนเพศชาย 500 ppm ใน 50%เอทานอล และ 1.0 ml ของหนู microsomal ระงับ ปฏิกิริยาได้แล้ว เริ่มต้น โดยการเพิ่ม 0.5 ml ของ NADPH 0.77 mg/mlในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ตาม ด้วยการบ่มในอ่างน้ำที่◦C 37 สำหรับ 30 นาที ปฏิกิริยาที่ถูกแล้วหยุด โดยการเพิ่ม5.0 ml dichloromethane และจากนั้น เพิ่ม 0.5 ml ของ propyl 100 ppmp hydroxybenzoate ใน 50% เอทานอล (เป็นการภายในสำหรับHPLC) Millilitres สี่ของเฟสอินทรีย์ถูก decanted และหายไปกับความแห้งกร้านภายใต้ความดันควบคุม ตกค้างรวบรวม และละลายใน 5.0 ml ของเมทานอล ส่วนลงตัวของ 10 l ถูกฉีดเข้าไปในระบบ HPLC (Agilent 1100 ชุดใช้ ODS Hypersil ®คอลัมน์ 250 มม.×4.6 มม. 5 เมตร) ระยะ Themobile มีส่วนผสมของเมทานอลและน้ำ deionized(65:35) ด้วยอัตราการไหลของ 1.0 ml/min เครื่องตรวจจับ UV ที่ 245 nmถูกใช้เพื่อเก็บรวบรวมข้อมูล Finasteride ถูกใช้เป็นมาตรฐานสารยับยั้งเอนไซม์ ผลลัพธ์ทั้งหมดถูกแสดงเป็น finasteride5 - reductase ลิปกลอสไขกิจกรรม (FEA) ค่าที่เทียบเท่า (หน่วยของfinasteride มิลลิกรัมเทียบเท่าต่อ 1 g แยก)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

5? -reductase
ทดสอบได้ดำเนินการตามที่ก่อนหน้ากระดาษ(Kumar et al., 2011) สั้น ๆ , การแก้ปัญหาการเกิดปฏิกิริยาที่มีอยู่
0.2 มล. ของสารสกัดจากพืชต่าง ๆ ในเอทานอล 50%, 1.0 มิลลิลิตร 0.02
มิลลิฟอสเฟตบัฟเฟอร์(pH 6.5) 0.3 มล. ของฮอร์โมนเพศชาย 500 ppm ใน 50%
เอทานอลและ 1.0 มิลลิลิตรหนูระงับไมโคร ปฏิกิริยาถูกเริ่มต้นแล้วโดยนอกเหนือจาก 0.5 มิลลิลิตร 0.77 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร NADPH ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ตามด้วยการบ่มในอ่างน้ำที่37 ◦Cเป็นเวลา 30 นาที ปฏิกิริยาก็หยุดแล้วโดยการเพิ่ม5.0 มล. ไดคลอโรมีเทนและจากนั้นเพิ่ม 0.5 มล. 100 ppm โพรพิลพีhydroxybenzoate ในเอทานอล 50% (เป็นมาตรฐานภายในสำหรับHPLC) สี่มิลลิลิตรของเฟสอินทรีย์ decanted และระเหยแห้งภายใต้ความกดดันควบคุม ตกค้างถูกเก็บรวบรวมและละลายใน 5.0 มล. ของเมทานอล หารของ 10 ลิตรฉีดเข้าไปในระบบ HPLC (Agilent 1,100 ชุดโดยใช้คอลัมน์Hypersil®-ODS, 250 มม× 4.6 มม 5? M) เฟส Themobile เป็นส่วนผสมของเมทานอลและน้ำปราศจากไอออน(65:35) ที่มีอัตราการไหล 1.0 มล. / นาที เครื่องตรวจจับรังสียูวีที่ 245 นาโนเมตรถูกใช้ในการเก็บรวบรวมข้อมูล Finasteride ถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐานยับยั้งเอนไซม์ ทั้งหมดของผลที่ได้รับการแสดงเป็น finasteride เทียบเท่า 5? ยับยั้ง -reductase (FEA) มูลค่า (หน่วยเทียบเท่าfinasteride มิลลิกรัมต่อ 1 กรัมสารสกัด)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

5  - เทสว่าได้ปฏิบัติตามบทความก่อนหน้า
( Kumar et al . , 2011 ) สั้น ๆ , โซลูชั่นที่มีอยู่
0.2 มิลลิลิตรปฏิกิริยาสารสกัดจากพืชต่างๆในเอทานอล 50% , 1.0 มิลลิลิตร 0.02 mm
( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.5 ) , 0.3 มล. 500 ppm ฮอร์โมนเพศชายในเอทานอล 50%
, และ 1.0 มิลลิลิตรของหนูเพิ่มระงับ ปฏิกิริยา
จากนั้นริเริ่มโดยระดับ 0.5 มิลลิลิตร จำนวน nadph
มิลลิกรัม / มิลลิลิตรในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ รองลงมา คือ บ่มในน้ำอาบที่
37 ◦ C เป็นเวลา 30 นาที แล้วหยุดปฏิกิริยาโดยการเพิ่ม
5.0 มิลลิลิตร ไดคลอโรมีเทน และจากนั้นเพิ่ม 0.5 มล. 100 ppm โพรพิล
p-hydroxybenzoate 50% เอทานอล ( เป็นมาตรฐานภายใน
2 ) 4 มิลลิลิตรของรินและ
เฟสสารอินทรีย์ระเหยแห้งภายใต้ความดันที่ควบคุม
สารพิษตกค้างการเก็บรวบรวมและ 5.0 มิลลิลิตร ละลายในเมทานอล เป็นส่วนลงตัว
10  ผมฉีดเข้าไปในระบบ HPLC ( Agilent 1100 ชุด
ใช้ขน® - คอลัมน์ ODS 250 มม. ×

4.6 มม. , 5  M ) ระยะ themobile เป็นส่วนผสมของเมทานอลและคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ
( ไฟฟ้า ) ด้วยอัตราการไหล 1.0 มล. / นาที เครื่องตรวจจับรังสียูวีที่ 245 nm
ถูกใช้เพื่อเก็บข้อมูล Finasteride ใช้ยับยั้ง เอนไซม์มาตรฐาน

ทั้งหมดของผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็น finasteride
เทียบเท่า 5  - เทสยับยั้งกิจกรรม ( FEA ) ค่า ( หน่วยมิลลิกรัมต่อ 100 กรัม finasteride
เทียบเท่าสารสกัด )