Peste Des Petits Ruminants VirusA s

Peste Des Petits Ruminants Virus

A stock of PPRV Malig (Yemen) was originally obtained from The Pirbright Institute (Pirbright, U.K.).

The viral stock was passaged four times in Vero cells (ATCC) in Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) (Multicell Media-Gibco-BRL-USA) and 1% Penicillin/Streptomycin solution (Multicell) in a 37°C incubator with 5% CO2.

After the third passage, transmission electron microscopy (TEM) was performed to confirm that the virus was still displaying the structural integrity typical of members of the family Paramyxoviridae.

After the fourth passage, 80%–90% of cells exhibited cytopathic effect (CPE) after 17 days. Infected cells and supernatant were harvested and frozen at −70°C for subsequent challenge experiments.

The virus stock was titrated using Vero cells and the TCID50 values were determined based on the method of Reed and Muench [27].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

des peste เอาใจสัตว์เคี้ยวเอื้องไวรัส

หุ้นของ pprv malig (เยเมน) ที่ได้รับมาจากสถาบัน Pirbright (Pirbright, สหราชอาณาจักร)

หุ้นไวรัสที่ถูก passaged สี่ครั้งในเซลล์ vero (ATCC) ในสื่อนกอินทรีแก้ไข Dulbecco ของของ (dmem) เสริมด้วย 10% วัวของทารกในครรภ์ในซีรั่ม (FBS) (multicell สื่อ Gibco-BRL-usa) และ 1% การแก้ปัญหายาปฏิชีวนะ / streptomycin (multicell ) ในคอบ 37 ° 5% CO2

หลังจากทางที่สามกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (Tem) ได้ดำเนินการเพื่อยืนยันว่าไวรัสยังคงแสดงความสมบูรณ์ของโครงสร้างโดยทั่วไปของสมาชิกของครอบครัว paramyxoviridae

หลังจากทางที่สี่ 80% -90% ของเซลล์ที่แสดงผล cytopathic (cpe) หลังจาก 17 วันที่ เซลล์ที่ติดเชื้อและใสถูกเก็บเกี่ยวและแช่แข็งที่ -70 องศาเซลเซียสสำหรับการทดลองความท้าทายต่อไป

หุ้นไวรัสถูกไตเตรทโดยใช้เซลล์ vero และค่า tcid50 ได้รับการพิจารณาขึ้นอยู่กับวิธีการและ muench กก [27]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไวรัส Peste Des Petits Ruminants

เดิมกล่าวคลัง PPRV Malig (เยเมน) จาก สถาบัน Pirbright (Pirbright สหราชอาณาจักร)

หุ้นไวรัสถูก passaged สี่ครั้งในเซลล์ Vero (ATCC) ในดุลเบกโกของแก้ไขอีเกิลของกลาง (DMEM) เสริม ด้วย 10% ครรภ์วัวซีรั่ม (FBS) (Multicell Media Gibco-BRL-สหรัฐอเมริกา) และ 1% ยา เพนนิซิลลิน/Streptomycin โซลูชัน (Multicell) ใน incubator ที่ 37° C กับ 5% CO2

หลังจากเส้นทางที่ 3 ส่งอิเล็กตรอน microscopy (ยการ) ที่ดำเนินการเพื่อยืนยันว่า ไวรัสยังคงแสดงความสมบูรณ์โครงสร้างของสมาชิกในครอบครัว Paramyxoviridae

หลังจากพระธรรมตอนสี่ 80% –90% ของเซลล์จัดแสดง cytopathic ผล (CPE) หลังจากวันที่ 17 เซลล์ที่ติดเชื้อและ supernatant ถูกเก็บเกี่ยว และแช่แข็งที่ −70 ° C สำหรับความท้าทายภายหลังการทดลอง

หุ้นไวรัสถูก titrated ใช้เซลล์ Vero และค่า TCID50 ถูกกำหนดตามวิธีการของลิ้นและ Muench [27]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

peste des petits fours ruminants ที่หุ้น ไวรัส

ของ pprv malig (เยเมน)ได้มาจากสถาบัน pirbright ( pirbright สหราชอาณาจักร)ที่เดิม

ที่ตลาดหลักทรัพย์ฯเป็นไวรัสเป็น passaged สี่ครั้งใน Vero Beach - Oceanside เซลล์( atcc )ใน dulbecco แก้ไขของนกอินทรีของขนาดกลาง( dmem )และเสริมด้วย 10% เฝ้าระวังและติดตามสัญญาณชีพทารกวัวอีกเจลมาสก์มอยเจอร์ไรเซอร์( FBS สำหรับผู้ป่วยเบาหวาน)( multicell media-gibco - BRL )บราซิล,เรียล - สหรัฐอเมริกา)และ 1% อย่างไรสืบเนื่อง/ยาซทเรพโทะไม - ซินโซลูชัน( multicell )ในที่ 37 ° C เครื่องฟักไข่ด้วย 5% ก๊าซ CO 2 ระบบไฮโดรเพาเวอร์ไฮโดรเพาเวอร์.

หลังจากที่สามการส่งข้อมูลการตรวจวิเคราะห์สารเคมีอิเลคตรอน(เปิดระบบ)ได้ดำเนินการเพื่อยืนยันว่าไวรัสที่เป็นการแสดงความเหมาะสมของโครงสร้างตามแบบฉบับของสมาชิกในครอบครัวที่ยังคง paramyxoviridae

หลังจากการผ่านที่สี่ 80% -90% ของเซลล์ร่วมแสดงนิทรรศการผล cytopathic ( CPE )หลังจาก 17 วัน supernatant และเซลล์ที่ติดเชื้อก็เก็บเกี่ยวและแช่แข็งที่ 70 ° C สำหรับการทดลองความท้าทายใน ภายหลัง

หุ้นไวรัสที่เป็น titrated โดยใช้เซลล์ Vero Beach - Oceanside และ 50 ค่า tcid ที่ถูกกำหนดขึ้นอยู่กับวิธีการของรีดและ muench [ 27 ]