MseI and EcoRIprimers with two addi

MseI and EcoRI
primers with two additional selective nucleotide bases were used in this step of amplification. Selective amplification was
done using 5 mL of the diluted pre-selective amplification as DNA template in reactions with 10  PCR buffer, 2 mM dNTPs,
25 mMMg2þ, 20mMprimer and 1 U Taq DNA polymerase in a total volume of 20 mL. The selective amplificationwas using 36
cycles including a touch-down programme: a reduction of the annealing temperature from 65 C (scaledown of 0.7 C per
cycle). The final selective amplification products were loaded onto a 6% polyacrylamide gel containing urea and electrophoresed
at 100Wrunning for 2.5 h in 1 TBE buffer, and then visualized using the silver-nitrate staining protocol according
to

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

EcoRI และ MseIไพรเมอร์ ด้วยนิวคลีโอไทด์ใช้เพิ่มเติมฐานสองที่ใช้ในขั้นตอนนี้การขยาย ขยายงานได้ทำได้โดยใช้ 5 mL ของขยาย pre-selective แตกออกเป็นแม่แบบดีเอ็นเอในปฏิกิริยากับบัฟเฟอร์ 10 PCR, dNTPs 2 มม.25 mMMg2þ, 20mMprimer และพอลิเมอเรส U Taq DNA 1 ปริมาณรวมของ 20 mL Amplificationwas เลือกใช้ 36วงจรรวมถึงโปรแกรมลงสัมผัส: การลดลงของอุณหภูมิหลอมจาก 65 C (scaledown ของ 0.7 C ต่อวงจร) ผลิตภัณฑ์ขยายสุดท้ายเลือกถูกโหลดลงเป็น 6% polyacrylamide เจลที่มียูเรีย และ electrophoresedที่ 100Wrunning ใน 2.5 h ใน 1 TBE บัฟเฟอร์ และ visualized ใช้ซิลเวอร์ไนเตรต staining โพรโทคอลตามแล้วถึง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

MseI และ EcoRI
ไพรเมอร์ที่มีฐานสองเบื่อหน่ายเลือกเพิ่มเติมถูกนำมาใช้ในขั้นตอนของการขยายนี้ ขยาย Selective ถูก
ทำโดยใช้ 5 มิลลิลิตรปรับลดการขยายก่อนเลือกเป็นแม่แบบในดีเอ็นเอปฏิกิริยากับ 10? บัฟเฟอร์ PCR, 2 มิลลิ dNTPs,
25 mMMg2þ, 20mMprimer และ 1 U Taq ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ในปริมาณรวมของปริมาณ 20 มล amplificationwas เลือกใช้ 36
รอบรวมทั้งโปรแกรมสัมผัสลง? (? scaledown 0.7 ซีต่อการลดลงของอุณหภูมิการหลอมจาก 65 C
รอบ) ผลิตภัณฑ์เครื่องขยายเสียงที่เลือกสุดท้ายถูกโหลดลง 6% polyacrylamide เจลที่มีส่วนผสมของยูเรียและ electrophoresed
ที่ 100Wrunning 2.5 ชั่วโมงใน 1? บัฟเฟอร์ TBE แล้วมองเห็นโดยใช้โปรโตคอลการย้อมสีเงินไนเตรตตาม
ไป

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

msei และ primers EcoRI
สองเพิ่มเติมฐานเบสเลือกใช้ในขั้นตอนของการขยาย . เลือกถูก
( ใช้ 5 มล. เจือจางก่อนใช้เป็นแม่แบบในการเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอปฏิกิริยากับ 10  PCR buffer 2 มม. dntps
25 , mmmg2 þ 20mmprimer 1 U , และแท็ก DNA polymerase ในปริมาณ 20 ml amplificationwas 36
เลือกใช้วงจรรวมถึงสัมผัสลงโปรแกรม : การลดลงของอุณหภูมิการอบอ่อนจาก 65  C ( scaledown 0.7  C /
วัฏจักร ) สุดท้ายเลือกแบบผลิตภัณฑ์ที่ถูกโหลดลง 6% polyacrylamide gel ที่มียูเรียและ electrophoresed
ที่ 100wrunning 2.5 ชม. ใน 1  ทีบีบัฟเฟอร์แล้วมองเห็นโดยใช้เงินไนเตรทโปรโตคอลตาม
เพื่อ .