Isolation of heterothallic haploid

Isolation of heterothallic haploid
In order to get heterothallic haploid fom homothallic strains, spores of homothallic strains were mated with heterothallic haploid cells. Tetrads derived from homothallic diploid strains weresplit and arrayedonto 2% YPD plates. Then, a singlecdl of heterothallic NAM51-11D (MATu dse2 : : k{inMKsedl : : S17 bteura3ÅO) was attached to each spore and incubated at 30 ° C. Growing colonies were transferred to a 2% YPDA plate, incubated overnight at 30 ° C, and inoculated onto a SD+G418 plate. After a 24 h incubation at 30 ° C, colony: orming strains (uracil prototroph and G418-resistant) were considered diploids from the mating of NAM51-11D with the germinaced a-mating type spores, and these srraîns were then subjected to tetrad analysis to obtain acid-tolerant heterothalïic haploids.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยกพริก heterothallic เพื่อรับ fom heterothallic พริกสายพันธุ์ homothallic สปอร์ homothallic สายพันธุ์ถูกผสมกับเซลล์พริก heterothallic Tetrads มาจาก homothallic ฮอโมไซกัสสายพันธุ์ weresplit และ arrayedonto 2% YPD แผ่น แล้ว singlecdl ของ heterothallic NAM51 11D (MATu dse2:: k { inMKsedl:: S17 bteura3ÅO) แนบกับแต่ละสปอร์ และรับการกกที่ 30 ° C. โตอาณานิคมโอน 2% YPDA จาน รับการกกค้างคืนที่ 30 ° C และ inoculated ใส่ SD + G418 จาน หลังจากที่บ่ม 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 ° C อาณานิคม: สายพันธุ์ orming (uracil prototroph และทน G418) พิจารณาว่า diploids จากของ NAM51 - 11D พันธุ์ด้วยสปอร์ชนิดมีการผสมพันธุ์ของ germinaced และ srraîns เหล่านี้แล้วถูกแยกวิเคราะห์ tetrad รับทนกรด heterothalïic haploids

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แยกเดี่ยว heterothallic
เพื่อให้ได้รับ heterothallic เดี่ยวสายพันธุ์ FOM homothallic สปอร์ของสายพันธุ์ที่ได้รับการ homothallic แต่งงานกับเซลล์เดี่ยว heterothallic tetrads มาจากสายพันธุ์ซ้ำ homothallic weresplit และ arrayedonto 2% แผ่น YPD จากนั้น singlecdl ของ NAM51-11D heterothallic (Matu dse2: K {inMKsedl: S17 bteura3ÅO) ถูกแนบมากับแต่ละสปอร์และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเติบโตอาณานิคมถูกโอนไปยังแผ่น YPDA 2% บ่มค้างคืนที่ 30 ° C, และเชื้อลงบน SD + G418 แผ่น หลังจากบ่ม 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสอาณานิคม: orming สายพันธุ์ (prototroph uracil และ G418 ทน) ได้รับการพิจารณา diploids จากการผสมพันธุ์ของ NAM51-11D กับ germinaced A-ผสมพันธุ์สปอร์ชนิดและsrraînsเหล่านี้ถูกยัดเยียดแล้วการวิเคราะห์ tetrad ที่จะได้รับกรดใจกว้างข้าวโพดที่ regenerate heterothalïic

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแยก heterothallic เดี่ยวเพื่อที่จะได้รับ heterothallic แฮพลอยด์จากโฮโมแทลลิกสายพันธุ์สปอร์ของสายพันธุ์โฮโมแทลลิกเคยได้เสียกับ heterothallic แฮพลอยด์เซลล์ ชุดสี่มาจากโฮโมแทลลิกซ้ำและสายพันธุ์ weresplit arrayedonto 2% ypd จาน จากนั้น singlecdl ของ heterothallic nam51-11d ( มาตุ dse2 : : K : : { inmksedl s17 bteura3 • O ) อยู่ติดกับแต่ละสปอร์และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา เติบโตอาณานิคมถูกโอนไปยังจาน ypda 2% บ่มค้างคืนที่ 30 ° C และเชื้อลงบน SD + g418 จาน หลังจาก 24 ชั่วโมง บ่มที่ 30 ° C , อาณานิคม : รูปสายพันธุ์ ( prototroph และยูราซิล g418 ทน ) ถือว่า Diploids จากการผสมพันธุ์ของ nam51-11d กับ germinaced a-mating สปอร์ชนิดและเหล่านี้ srra î NS แล้วภายใต้การวิเคราะห์ของเตแตรดเพื่อให้ได้กรดใจกว้าง heterothal ไต IC haploids .