High prevalence of large trematode

High prevalence of large trematode eggs in schoolchildren in Cambodia
a b s t r a c t
Large trematode eggs(LTE)resembling Fasciola spp. eggs were reportedly found in the stools of schoolchildren in Kandal province, Cambodia. This study aimed to assess the prevalence of LTE in the stools of children attending the affected school, identify potential risk factors for infection and ascertain the trematode species. We performed a cross-sectional study involving an in-depth questionnaire admin- istered to schoolchildren at the affected school, and examined cattle droppings in the surrounding area and the livers of slaughtered cattle. Three stool samples were examined per child, using Kato–Katz and formalin–ether concentration techniques .In addition, blood serum enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and coprological polymerase chain reaction(PCR) was conducted for species clarification.Cattle droppings wereexaminedbycupsedimentationandcoprologicalELISA.LTEwereobservedinthestools of 106 schoolchildren(46.5%).Two blood serum samples from schoolchildren were positive for Fasciola hepatica in afirstELISAbutwerenegativeinaconfirmationimmunofluorescenceantibodytest.Out of 221 PCR samples, only one tested positive for Fasciola spp. and none for Fasciolopsis buski. The consumption of raw aquatic plants (oddsratio(OR)=3.3) and fermented fish sauce(OR=2.1) were significantly associ-ated with LTE in the stool. Fasciola spp. flukes were observed in 18.3% of 191 cattle livers. The prevalence of fascioliasis in cattle droppings was 88.8%.The low prevalence of schoolchildren that tested positive for Fasciola spp. with specific molecular diagnostics and who had no diagnostic evidence of F. buski strongly indicates that the majority of microscopically observed LTE are from Echinostoma spp. Fasciola spp. transmission from cattle to human is possible and public health services need to be alerted accordingly.
1. Introduction
In low-and middle-income countries, intestinal multipara-sitism is the rule rather than the exception(McKenzie, 2005; Petney and Andrews,1998;Steinmannetal.,2010). In South-
east Asia, intestinal helminth and protozoa multiparasitism is well known and has been documented(Lee etal.,2002;Parketal.,2004;Sayasoneetal.,2011,2009;Sinuonetal.,2003;Schäretal.,
2014). Several endemic species of food-borne trematodes (FBT) have been identified, such as liver flukes(Opisthorchis viverrini and Fasciola spp.) and intestinal flukes(Fasciolopsis buski and Echinos- toma spp.) (Hien etal.,2001;KeiserandUtzinger,2005;Quang etal.,2008;Sayasoneetal.,2011;Sohnetal.,2011a,b). Helminthic multiparasitism poses a serious challenge for parasitological diag-nosis, as eggs from different species may morphologically resemble one another. For example, the size, oval shape and presence of small and inconspicuous operculum of Fasciola spp. Eggs are indis-tinguishable from F. buski and some Echinostoma spp. eggs.The average egg size of all three parasite egenera is similar in terms
of length and width: Fasciola hepatica 106.5–171.5/63.9–95.4m, Fasciola gigantica 150.9–182.2/85.1–106.2m (Valero etal.,2009), Echinostoma revolutum 97–117/61–65m (Sohn etal.,2011a); Echinostoma ilocanum 89–99/52–58m (Sohn etal.,2011b) and
F. buski 130-140/80-85m (Garcia andBruckner,1988). They canbe characterized as Fasciola-like eggs or large trematode eggs(LTE). In 2009,LTE were observed in the stools of 27/150 schoolchil-
dren (18.0%) in the Damrei Chhlang village primary school, Kandal province, Cambodia, during a standard parasiteological survey using
the Kato–Katz technique(Khieu etal.,2013). Given the high preva-lence of Fasciola spp. Infection among cattle in southern Cambodia
(Tum etal.,2007), LTE could have been attributable to Fasciola spp. infections. However, other trematode species could also have been responsible. The aim of this study was to assess the prevalence of LTE in the stools of schoolchildren, identify risk factors for infection and ascertain the trematode species, all with a focus on Fasciola spp. We performed across-sectional study among the schoolchildren,examined cattle droppings in and around Damrei Chhlang village and inspected cattle livers in a local slaughterhouse.
2. Materials and methods
2.1. Ethical considerations
Ethical clearance for this study was obtained from the Ethics
Commission of Basel-Stadtand Basel-Land, Switzerland(EKBB;
reference no.159/11) and from the National Ethics Commit-tee for Health Research(NECHR), Ministry of Health(MOH)in
Phnom Penh, Cambodia(referenceno.30/NECHR). Before field work started, the provincial and district health authorities, village and school authorities and parents were informed of the study and, in turn, working permission was granted. Prior to enrolling each participant, written informed consent was obtained from the par-ents, legal guardian or the participant him/herself if they were of legal age. In cases of illiteracy, the informed consent was signed by fingerprint before the village chief, who signed as a witness.
2.2.Study design, population and area
The study was carried out in Central Kandal province, which surrounds the capital Phnom Penh. It is in habited by 1.2 mil- lion people and divided into 11 districts. Between May and June 2011, across-sectional study was carried out among schoolchil- dren at the Damrei Chhlang village primary school, S’ang district (11◦21_29.43__ N, 104◦59_18.05__ E), a district of 1831 people. Another cross-sectional study aimed to estimate the prevalence of Fasciola spp. Eggs in cattle droppings in the villages surrounding the Damrei Chhlang primary school(S’ang district). The sevil- lages included Damrei Chhlang and Preaek Khmer(11◦21_21.70__ N, 104◦58_59.33__ E), both located in S’ang Phnom commune; and Preaek Run(11◦21_16.30__ N, 104◦59_46.54__ E), located in Preaek Koy commune. Additionally, an abattoir study of a small facility that is slaughtering local cattle was conducted in Preaek Koy commune.
2.3. Procedures in the field
On day 1,enrolled study participants assembled at the commu- nity hall next to the school. A trained interviewer questioned each child about potential risk factors for infection and about experi- ences of ill-health. Subsequently, a physician assessed participants’ general health status and clinical symptoms by using a standard- ized assessment form. Additionally, a nurse drew a venous blood sample of 5 ml from each child. The blood samples were stored in a cooling box at about 5–10 ◦C until they reached the laboratory of the National Center for Parasitology, Entomology and Malaria Control (CNM), Ministry of Health in Phnom Penh.
A pre-labeled stool container was given to each child, along with instructions on how to fill it. Children were asked to collect morn- ing stools to ensure freshness of the stool samples. The following morning, the filled container was collected and a new pre-labeled container was provided. Three stool samples were collected from each child over 4 consecutive days. Each day after collection, con- tainers were directly transported to the laboratory of the CNM for analysis.
The stool containers for cattle droppings were distributed among randomly selected cattle owners, each of whom collected one fresh stool sample from every one of their cattle. Contain- ers were collected In the morning, the day after distribution, and directly transported to the laboratory of the CNM.
The butcher at the study abattoir examined the livers of slaugh- tered cattle on a continuous basis for meat quality assurance. For study purposes, he recorded in a diary the total number of slaugh- tered cattle and of Fasciola spp. Infected livers.
2.4. Laboratory procedures
For each of the three stool samples per child, one Kato–Katz thick smear (Katz etal.,1972) was prepared directly after the samples arrived in the laboratory. After a half an hour clearance time, the smears were examined under a light microscope (magnification 400×) for intestinal helminth eggs. The number of eggs per parasite species was counted and recorded.
From each of the three stool samples per child, approximately1 g was preserved in 15 ml sodium acetate–acetic acid–formalin (SAF) fixative for analysis by formalin–ether concentration tech-nique (FECT)(Marti andEscher,1990). Four weeks after collection, the fixed samples were processed and examined under a light
microscope (magnification1000×) for intestinal helminthes and protozoa.
From the first stool sample per child, approximately 0.5 g of fresh stool was preserved in 70% ethanol for later molecular analy-sis using real-time quantitative polymerase chain reaction(PCR) to diagnose Fasciola spp. (Alasaad etal.,2011) and F. buski infections (unpublished, developed by Dr. med. Stefanie Kramme, Swiss TPH).The preserved samples were sent to the Swiss TPH laboratory in
Basel, Switzerland, where molecular analysis was carried-out about 2 months later. First, from each preserved stool sample,200_g was
washed twice with phosphate buffered saline(PBS)to eliminate the ethanol. Subsequently, DNA was extracted with the QIAamp DNA Stool Mini Kit(QIAGEN,USA).The extracted DNA was frozen at−20 _C until PCR was performed,1week later. On 0.5 g of the first stool samples from each child, a commercially available F. hepatica coproantigen enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)(Bio-X, Belgium) was performed at the CNM laboratory.
Upon arrival, blood samples were stored at room tempera-ture to clot. Subsequently, the blood samples were centrifuged and the serum was frozen and stored at −20 _C at the CNM laboratory. The frozen samples were sent to the Diagnostic Center of the Swiss TPH, Switzerland, where an ELISA for F. hepatica-antibodies was performed 2 months after sample col-lection. Sera samples with a positive result were retested with an immunofluorescence antibody test(IFAT)for confirmation. All sera samples with a positive or critical(close to posit

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ส่วนสูงไข่ใหญ่ trematode ใน schoolchildren ในประเทศกัมพูชาแบบ b s t r c tรายงานพบขนาดใหญ่ trematode ไข่ (LTE) คล้าย Fasciola โอไข่ในอุจจาระของ schoolchildren จังหวัด Kandal กัมพูชา การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของเด็กที่เข้าโรงเรียนได้รับผลกระทบ ระบุปัจจัยเสี่ยงที่เป็นไปได้สำหรับเชื้อ และตรวจพันธุ์ trematode เราทำการศึกษาเหลวที่เกี่ยวข้องกับ admin-istered การสอบถามในเชิงลึกเพื่อ schoolchildren ที่ได้รับผลกระทบ และตรวจสอบมูลวัวในบริเวณและ livers ยั้วเยี้ยฆ่า ตัวอย่างเก้าอี้สามถูกตรวจสอบต่อรอง การใช้เทคนิคสมาธินายกาโต – ทซและ formalin – อีเทอร์ ในเลือดซีรั่มเอนไซม์ลิงค์ immunosorbent assay (ELISA) และพอลิเมอเรส coprological reaction(PCR) โซ่ได้ดำเนินการชี้แจงชนิด WereexaminedbycupsedimentationandcoprologicalELISA.LTEwereobservedinthestools มูลวัวของ 106 schoolchildren(46.5%) ซีรั่มเลือดตัวอย่างที่ 2 จาก schoolchildren ได้ค่าบวกสำหรับ Fasciola hepatica ใน afirstELISAbutwerenegativeinaconfirmationimmunofluorescenceantibodytest.Out อย่าง 221 PCR เดียวทดสอบบวก Fasciola โอและไม่มีสำหรับ Fasciolopsis buski ปริมาณของพืชน้ำดิบ (oddsratio(OR)=3.3) และ sauce(OR=2.1) ปลาร้าได้อย่างมีนัยสำคัญ associ เส้นกับ LTE ในอุจจาระ Fasciola โอ flukes สุภัคยัง 18.3% ของ livers วัว 191 ความชุกของ fascioliasis ในมูลวัวเป็น 88.8% ความชุกที่ต่ำของ schoolchildren ที่เกิดผลบวกโอ Fasciola กับวินิจฉัยเฉพาะโมเลกุล และใครมีหลักฐานไม่วินิจฉัยของ F. buski ขอบ่งชี้ว่า ส่วนใหญ่ของ LTE microscopically สังเกตได้จาก Echinostoma โอส่งโอ Fasciola จากวัวกับมนุษย์ได้ และบริการสาธารณสุขจำเป็นต้องมีการแจ้งเตือนตามลำดับ1. บทนำในต่ำ-คอร์รัปชั่นประเทศ multipara sitism ลำไส้เป็น กฎการแทนที่เป็นข้อยกเว้น (McKenzie, 2005 Petney และแอนดรูวส์ 1998 Steinmannetal., 2010) ในใต้เอเชียตะวันออก helminth ลำไส้และโพรโทซัว multiparasitism เป็นที่รู้จัก และมีการจัดทำเอกสาร (ลี etal., 2002 Parketal. 2004 Sayasoneetal. 2011, 2009 Sinuonetal. 2003 Schäretal.,2014) . พันธุ์ยุงหลาย trematodes แบกรับอาหาร (FBT) ได้รับการระบุ flukes ตับ (Opisthorchis viverrini และโอ Fasciola) และ flukes ลำไส้ (Fasciolopsis buski และโอ Echinos toma) (จาก etal., 2001 KeiserandUtzinger, 2005 ควง etal., 2008 Sayasoneetal. 2011 Sohnetal., 2011a, b) Helminthic multiparasitism ซึ่งทำให้เกิดความท้าทายที่รุนแรงสำหรับ diag parasitological-nosis เนื่องจากสปีชีส์อื่น morphologically อาจคล้ายกัน ตัวอย่าง ขนาด รูปไข่ และของเล็ก และไม่เด่น operculum ของ Fasciola โอไข่เป็น indis-tinguishable F. buski และไข่ไก่โอ Echinostoma จำนวนไข่เฉลี่ยทั้งหมดสามปรสิต egenera จะคล้ายในแง่ความยาวและความกว้าง: Fasciola hepatica 106.5–171.5/63.9–95.4m, Fasciola gigantica 150.9–182.2/85.1–106.2m (วาเลโร etal., 2009), Echinostoma revolutum 97-117/61 – 65m (Sohn etal., 2011a); Ilocanum Echinostoma 89-99/52 – 58m (Sohn etal., 2011b) และF. buski 130-140/80-85m (การ์เซีย andBruckner, 1988) พวกเขา canbe ลักษณะเป็นไข่เหมือน Fasciola trematode eggs(LTE) ขนาดใหญ่ ในปี 2009, LTE ถูกพบในอุจจาระของ schoolchil 27/150-dren (18.0%) ในการ Damrei Chhlang หมู่บ้านโรงเรียน กันดาล กัมพูชา ในระหว่างการสำรวจมาตรฐาน parasiteological โดยใช้เทคนิคนายกาโต – ทซ (Khieu etal., 2013) รับ preva-lence สูงของโอ Fasciola ติดเชื้อระหว่างวัวในประเทศกัมพูชา(ตูม etal., 2007), LTE มีรวม Fasciola โอติดเชื้อได้ อย่างไรก็ตาม สปีชีส์อื่น ๆ trematode สามารถยังได้รับผิดชอบ จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้เป็นการ ประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของ schoolchildren ระบุปัจจัยเสี่ยงต่อการติดเชื้อ และตรวจชนิด trematode ความ Fasciola โอทั้งหมด เราทำการศึกษาในขนาดระหว่าง schoolchildren มูลวัวที่กล่าวถึงใน และ รอบ ๆ หมู่บ้าน Damrei Chhlang และปศุสัตว์ตรวจสอบ livers ในบิดาท้องถิ่น2. วัสดุและวิธีการ2.1. จริยธรรมพิจารณาเคลียร์ด้านจริยธรรมสำหรับการศึกษานี้ได้รับจากมารยาทในนาย Stadtand เซิลที่ดินบาเซิล สวิตเซอร์แลนด์ (EKBBอ้างอิง no.159/11) และยอมรับทีชาติจริยธรรมสำหรับสุขภาพ Research(NECHR) กระทรวงของสุขภาพ (MOH) ในพนมเปญ Cambodia(referenceno.30/NECHR) ก่อนเริ่มต้นการทำงานฟิลด์ หน่วยงานด้านสุขภาพจังหวัดและอำเภอ เจ้าหน้าที่หมู่บ้านและโรงเรียน และผู้ปกครองได้ทราบศึกษา ก จะ ได้รับอนุญาตทำงาน ก่อนที่จะลงทะเบียนผู้เข้าร่วมแต่ละ แจ้งความยินยอมเป็นลายลักษณ์อักษรได้รับจาก ents พาร์ ผู้ปกครอง หรือผู้เรียนเขา/ตัวเองถ้าพวกอายุกฎหมาย ในกรณีของ illiteracy แจ้งความยินยอมถูกเซ็นชื่อ โดยลายนิ้วมือก่อนหมู่บ้านหัวหน้า ผู้ลงชื่อเป็นพยานออกแบบ 2.2.Study ประชากร และพื้นที่ การศึกษาได้ดำเนินในเซ็นทรัลกันดาล ที่ล้อมรอบเมืองหลวงพนมเปญ มันเป็น habited คน 1.2 ล้านสิงโต และแบ่งเขต 11 พฤษภาคมและ 2554 มิถุนายน ข้ามขนาดศึกษาถูกดำเนินการระหว่าง dren schoolchil ที่โรงเรียนหลักของหมู่บ้าน Damrei Chhlang เขต S'ang (11◦21_29.43__ N, 104◦59_18.05__ E) เขต 1831 คน ศึกษาอื่นเหลววัตถุประสงค์เพื่อประเมินความชุกของโอ Fasciola ไข่ในมูลวัวในหมู่บ้านโดยรอบโรงเรียนประถม Damrei Chhlang (S'ang เขต) Sevil-lages รวม Damrei Chhlang และ Preaek Khmer(11◦21_21.70__ N, 104◦58_59.33__ E) อยู่ในพนมเปญ S'ang commune และ Preaek Run(11◦21_16.30__ N, 104◦59_46.54__ E) แห่ง commune ก้อย Preaek นอกจากนี้ การศึกษาโรงฆ่าสัตว์ของสินเชื่อขนาดเล็กที่เป็น slaughtering วัวท้องถิ่นถูกดำเนินใน commune ก้อย Preaek 2.3. กระบวนงานในฟิลด์ ในวันที่ 1 ลงทะเบียนอาสาประกอบ commu - nity ศาลาติดกับโรงเรียน ทีมฝึกอบรมสอบสวนเด็กแต่ละคน เกี่ยวกับปัจจัยเสี่ยงต่อการเกิดการติดเชื้อ และ experi-ences ของสุขภาพ ในเวลาต่อมา แพทย์ประเมินสถานะสุขภาพทั่วไปของผู้เข้าร่วมและอาการทางคลินิก โดยใช้แบบประเมินมาตรฐาน ized นอกจากนี้ พยาบาลดึงตัวอย่างเลือดดำ 5 ml จากเด็กแต่ละคน ตัวอย่างเลือดเก็บไว้ในกล่องทำความเย็นที่เกี่ยวกับ 5 – 10 ◦C จนกว่าจะถึงห้องปฏิบัติการของศูนย์แห่งชาติปรสิตวิทยา กีฏวิทยา และมาลาเรียควบคุม (CNM), กระทรวงสุขภาพในพนมเปญ ให้เด็กแต่ละคน พร้อมกับคำแนะนำเกี่ยวกับวิธีการเติมคอนเทนเนอร์เก้าอี้ป้ายล่วงหน้า เด็กก็ต้องเก็บอุจจาระหมอนอิงให้ความสดชื่นอย่างเก้าอี้ การเช้า ภาชนะเติมรวบรวม และเก็บล่วงหน้าป้ายใหม่ให้ ตัวอย่างเก้าอี้สามได้รวบรวมจากเด็กแต่ละคนกว่า 4 วันติดต่อกัน แต่ละวันหลังจากคอลเลกชัน คอน tainers โดยตรงผู้อพยพเพื่อห้องปฏิบัติการของ CNM สำหรับการวิเคราะห์เก็บอุจจาระสำหรับมูลวัวได้กระจายระหว่างเจ้าของวัวแบบสุ่มเลือก แต่ละคนเก็บตัวอย่างอุจจาระสดหนึ่งจากทุกหนึ่งของบรรดา สกู๊ปประกอบด้วยถูกรวบรวมไว้ในตอนเช้า หลังกระจาย และขนส่งโดยตรงไปห้องปฏิบัติการของ CNM เขียงที่โรงฆ่าสัตว์ศึกษาตรวจสอบ livers ยั้วเยี้ย slaugh tered บนพื้นฐานอย่างต่อเนื่องสำหรับคุณภาพเนื้อ สำหรับวัตถุประสงค์ในการศึกษา เขาบันทึกในไดอารี่จำนวน ของวัว slaugh tered และ Fasciola โอ Infected livers2.4 การปฏิบัติขั้นตอนสำหรับแต่ละตัวอย่างอุจจาระสามต่อเด็ก หนาเลอะเปื้อนหนึ่งนายกาโต – ทซ (ทซ etal., 1972) ถูกเตรียมไว้ให้โดยตรงหลังจากตัวอย่างเข้ามาในห้องปฏิบัติการ หลังจากครึ่งชั่วโมงเคลียร์เวลา smears ถูกตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสง (ขยาย 400 ×) สำหรับ helminth ลำไส้ไข่ จำนวนไข่ต่อปรสิตชนิดนับ และบันทึกจากตัวอย่างอุจจาระสามต่อเด็ก approximately1 g ถูกเก็บรักษาไว้ในตรึง acetate-อะซิติกกรด – formalin (SAF) โซเดียม 15 ml สำหรับการวิเคราะห์ โดยเทคนิคสมาธิ formalin – อีเทอร์-nique (FECT) (วาน่า andEscher, 1990) 4 สัปดาห์หลังจากคอลเลกชัน ตัวอย่างถาวรมีการประมวลผล และตรวจสอบภายใต้แสงกล้องจุลทรรศน์ (magnification1000 ราย) helminthes ลำไส้และโพรโทซัว จากแรกสตูลต่อเด็ก อุจจาระสดประมาณ 0.5 g ถูกเก็บรักษาไว้ในเอทานอล 70% สำหรับต่อโมเลกุล analy-sis ด้วย reaction(PCR) โซ่พอลิเมอเรสเชิงปริมาณแบบเรียลไทม์เพื่อวินิจฉัย Fasciola โอ (Alasaad etal., 2011) และเชื้อ F. buski (ยกเลิกประกาศ พัฒนา โดยดร.ประสเตฟานีดา Kramme, TPH สวิส) ตัวอย่างรักษาถูกส่งไปปฏิบัติการ TPH สวิสบาเซิล สวิตเซอร์แลนด์ ที่วิเคราะห์โมเลกุลถูกดำเนินออกประมาณ 2 เดือน ครั้งแรก จากตัวอย่างแต่ละเก้าอี้รักษา 200_g ได้ล้าง ด้วยน้ำเกลือฟอสเฟต buffered (PBS) เพื่อกำจัดเอทานอลสอง ในเวลาต่อมา ดีเอ็นเอที่สกัด ด้วย QIAamp ดีเอ็นเอเก้าอี้มินิ Kit(QIAGEN,USA) ดีเอ็นเอที่แยกได้ _C at−20 แช่แข็งจนกว่า PCR ทำ 1 สัปดาห์ต่อมา บน 0.5 g ตัวอย่างอุจจาระครั้งแรกจากเด็กแต่ละคน การใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ F. hepatica coproantigen immunosorbent ลิงค์เอนไซม์ assay(ELISA) (ไบ-X เบลเยียม) ทำที่ CNM ห้องปฏิบัติการเมื่อมาถึง ตัวอย่างเลือดที่เก็บที่อุณหภูมิห้อง-ture การ clot ต่อมา มี centrifuged ตัวอย่างเลือด และซีรั่มถูกแช่แข็ง และเก็บที่ _C −20 ที่ปฏิบัติ CNM ตัวอย่างน้ำแข็งถูกส่งไปศูนย์วินิจฉัยของ TPH สวิส สวิสเซอร์แลนด์ ที่เป็น ELISA สำหรับ F. hepatica แอนตี้ทำ 2 เดือนหลังจากตัวอย่างคอลัมน์ lection ตัวอย่างที่จะ มีผลบวกได้ retested กับการ immunofluorescence แอนติบอดีทดสอบ (IFAT) ยืนยัน ทุกอย่างจะเป็นบวก หรือสำคัญ (ใกล้ posit

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความชุกสูงของไข่พยาธิตัวแบนขนาดใหญ่ในเด็กนักเรียนในประเทศกัมพูชา
bstract
ไข่พยาธิตัวแบนขนาดใหญ่ (LTE) คล้ายเอสพีพี Fasciola ไข่ที่ได้รับรายงานว่าพบในอุจจาระของเด็กนักเรียนในจังหวัดกันดาลกัมพูชา การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของเด็กที่เข้าร่วมการโรงเรียนได้รับผลกระทบระบุปัจจัยเสี่ยงที่มีศักยภาพสำหรับการติดเชื้อและตรวจสอบสายพันธุ์ trematode เราดำเนินการศึกษาแบบตัดขวางที่เกี่ยวข้องกับแบบสอบถามในเชิงลึก admin- istered เพื่อเด็กนักเรียนที่โรงเรียนได้รับผลกระทบและตรวจสอบมูลวัวในพื้นที่โดยรอบและตับวัวฆ่า สามอุจจาระมีการตรวจสอบต่อเด็กโดยใช้ Kato-แคทซ์และเทคนิคความเข้มข้นของฟอร์มาลินอีเทอร์นอกจากนี้การเลือดซีรั่มเอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโน (ELISA) และห่วงโซ่โพลิเมอร์ coprological ปฏิกิริยา (PCR) ได้ดำเนินการสำหรับการขยายพันธุ์มูล clarification.Cattle wereexaminedbycupsedimentationandcoprologicalELISA LTEwereobservedinthestools 106 เด็กนักเรียน (46.5%). สองตัวอย่างซีรั่มเลือดจากเด็กนักเรียนเป็นบวกสำหรับ Fasciola น้ำหมึกใน afirstELISAbutwerenegativeinaconfirmationimmunofluorescenceantibodytest.Out 221 ตัวอย่าง PCR เพียงคนเดียวที่ผ่านการทดสอบในเชิงบวกสำหรับเอสพีพี Fasciola และไม่มีใครสำหรับ Fasciolopsis buski การบริโภคพืชน้ำดิบ (oddsratio (OR) = 3.3) และน้ำปลาที่หมัก (OR = 2.1) อย่างมีนัยสำคัญ Associ-ated กับ LTE ในอุจจาระ เอสพีพี Fasciola พยาธิใบไม้พบใน 18.3% ของ 191 ตับวัว ความชุกของ fascioliasis ในมูลวัวเป็น 88.8% ได้โดยเริ่มต้นที่ต่ำชุกของเด็กนักเรียนที่ได้รับการทดสอบในเชิงบวกสำหรับเอสพีพี Fasciola กับการวินิจฉัยระดับโมเลกุลที่เฉพาะเจาะจงและที่ไม่มีหลักฐานการวินิจฉัยของเอฟ buski อย่างยิ่งแสดงให้เห็นว่าส่วนใหญ่ตั้งข้อสังเกตกล้องจุลทรรศน์ LTE มาจากเอสพีพี Echinostoma เอสพีพี Fasciola การส่งผ่านจากวัวมนุษย์เป็นไปได้และการบริการสุขภาพของประชาชนจะต้องมีการแจ้งเตือนตาม.
1 บทนำในประเทศที่ต่ำและรายได้ปานกลางในลำไส้ Multipara-sitism กฎมากกว่าเป็นข้อยกเว้นที่ (แมคเคนซี่, 2005; Petney และแอนดรู, 1998;. Steinmannetal 2010)
ในเฉียงใต้เอเชียตะวันออกเฉียงพยาธิลำไส้และโปรโตซัว multiparasitism เป็นที่รู้จักกันดีและได้รับการรับรอง (ลี etal., 2002;. Parketal 2004. Sayasoneetal, 2011,2009. Sinuonetal, 2003. Schäretal, 2014) สายพันธุ์ถิ่นหลายที่เกิดจากอาหาร trematodes (เอฟบีที) ได้รับการระบุเช่นพยาธิใบไม้ตับ (Opisthorchis viverrini และเอสพีพี Fasciola.) และพยาธิใบไม้ลำไส้ (Hien etal 2001 (Fasciolopsis buski และ Echinos- toma spp.). KeiserandUtzinger 2005 ; Quang etal 2008. Sayasoneetal 2011.. Sohnetal, 2011a b) helminthic multiparasitism ท้าทายที่ร้ายแรงสำหรับปรสิตวิทยา diag-nosis เป็นไข่จากสายพันธุ์ที่แตกต่างกันอาจมีลักษณะสัณฐานอีกคนหนึ่ง ตัวอย่างเช่นขนาดรูปร่างรูปไข่และการปรากฏตัวของเพอคิวลัขนาดเล็กและไม่เด่นของเอสพีพี Fasciola ไข่เป็น indis-tinguishable จากเอฟ buski และบาง spp Echinostoma eggs.The ขนาดไข่เฉลี่ยของทั้งสามปรสิตอีเจเนราจะคล้ายกันในแง่ของยาวและความกว้าง: Fasciola หมึก 106.5-171.5 / 63.9-95.4m, Fasciola gigantica 150.9-182.2 / 85.1-106.2m, Echinostoma (Valero etal, 2009.) Revolutum 97-117 / 61-65m (Sohn etal, 2011a.); Echinostoma ilocanum 89-99 / 52-58m (Sohn etal., 2011b) และเอฟ buski 130-140 / 80-85m (การ์เซีย andBruckner, 1988) พวกเขา canbe ลักษณะเป็นไข่ Fasciola เหมือนหรือไข่พยาธิตัวแบนขนาดใหญ่ (LTE) ในปี 2009 LTE พบในอุจจาระของ 27/150 schoolchil- ลูก (18.0%) ในหมู่บ้าน Damrei Chhlang โรงเรียนประถมศึกษาจังหวัดกันดาลกัมพูชาในระหว่างการสำรวจ parasiteological มาตรฐานโดยใช้เทคนิค Kato-แคทซ์ (Khieu etal. 2013 ) ได้รับการ preva-lence สูงของเอสพีพี Fasciola การติดเชื้อในหมู่สัตว์เลี้ยงในภาคใต้ของประเทศกัมพูชา(Tum etal., 2007), LTE จะได้รับส่วนที่เป็นเอสพีพี Fasciola การติดเชื้อ แต่สายพันธุ์ trematode อื่น ๆ ยังจะได้รับความรับผิดชอบ จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้คือการประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของเด็กนักเรียนที่ระบุปัจจัยเสี่ยงต่อการติดเชื้อและการตรวจสอบสายพันธุ์ trematode ทั้งหมดให้ความสำคัญกับเอสพีพี Fasciola เราดำเนินการศึกษาทั่วขวางในหมู่เด็กนักเรียนตรวจสอบมูลวัวในและรอบ ๆ หมู่บ้าน Damrei Chhlang และการตรวจสอบตับวัวในโรงฆ่าสัตว์ในท้องถิ่น. 2 วัสดุและวิธีการ2.1 การพิจารณาจริยธรรมการกวาดล้างจริยธรรมสำหรับการศึกษานี้ได้รับมาจากจริยธรรมของคณะกรรมการบาเซิล-Stadtand บาเซิลแลนด์วิตเซอร์แลนด์ (EKBB; no.159 อ้างอิง / 11) และจากจริยธรรมแห่งชาติกระทำทีเพื่อการวิจัยสุขภาพ (NECHR) กระทรวงสาธารณสุข (กระทรวงสาธารณสุข) ในกรุงพนมเปญประเทศกัมพูชา(referenceno.30 / NECHR) ก่อนที่จะเริ่มต้นการทำงานภาคสนามที่จังหวัดและเจ้าหน้าที่สาธารณสุขอำเภอหมู่บ้านและหน่วยงานโรงเรียนและผู้ปกครองได้รับแจ้งจากการศึกษาและในทางกลับได้รับอนุญาตการทำงานที่ได้รับ ก่อนที่จะมีการลงทะเบียนผู้เข้าร่วมแต่ละยินยอมเป็นลายลักษณ์อักษรที่ได้รับจากตราไว้หุ้นละ ents ผู้ปกครองตามกฎหมายหรือมีส่วนร่วมเขา / เธอว่าพวกเขาบรรลุนิติภาวะ ในกรณีของการไม่รู้หนังสือยินยอมลงนามจากลายนิ้วมือก่อนที่หัวหน้าหมู่บ้านที่ลงนามเป็นพยาน. ออกแบบ 2.2.Study ประชากรและพื้นที่การศึกษาได้ดำเนินการในจังหวัดกันดาลกลางซึ่งล้อมรอบเมืองหลวงกรุงพนมเปญ มันเป็นใน habited 1.2 mil- คนสิงโตและแบ่งออกเป็น 11 อำเภอ ระหว่างเดือนพฤษภาคมและเดือนมิถุนายน 2011, ข้ามขวางการศึกษาได้ดำเนินการในหมู่ลูก schoolchil- ที่หมู่บ้าน Damrei Chhlang โรงเรียนประถมศึกษาอำเภอ S'ang (11◦21_29.43__ N, 104◦59_18.05__ E), อำเภอ 1,831 คน . อีกการศึกษาภาคตัดขวางมีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินความชุกของเอสพีพี Fasciola ไข่ในมูลวัวในหมู่บ้านรอบ Damrei Chhlang โรงเรียนประถม (อำเภอ S'ang) ลาเจส sevil- รวม Damrei Chhlang และ Preaek เขมร (11◦21_21.70__ N, 104◦58_59.33__ E) ทั้งสองอยู่ในชุมชน S'ang กรุง; และ Preaek Run (11◦21_16.30__ N, 104◦59_46.54__ E) ที่ตั้งอยู่ในจังหวัด Preaek Koy นอกจากนี้การศึกษาโรงฆ่าสัตว์ของสิ่งอำนวยความสะดวกเล็ก ๆ ที่มีการฆ่าวัวในท้องถิ่นได้ดำเนินการในชุมชน Preaek Koy. 2.3 ขั้นตอนในสนามในวันที่ 1, การลงทะเบียนเข้าร่วมการศึกษาประกอบที่ห้องโถง nity แล้วแต่ที่อยู่ติดกับโรงเรียน สัมภาษณ์ผ่านการฝึกอบรมเด็กแต่ละคนถามเกี่ยวกับปัจจัยเสี่ยงที่มีศักยภาพสำหรับการติดเชื้อและเกี่ยวกับความแตกประสบการณ์ของสุขภาพไม่ดี ต่อมาแพทย์ประเมินสถานะสุขภาพของผู้เข้าร่วมทั่วไปและอาการทางคลินิกโดยใช้รูปแบบการประเมิน ized ระดับมาตรฐาน นอกจากนี้พยาบาลดึงตัวอย่างเลือดดำ 5 มล. จากเด็กแต่ละคน กลุ่มตัวอย่างเลือดที่เก็บไว้ในช่องระบายความร้อนที่ประมาณ 5-10 ◦Cจนกว่าพวกเขาจะมาถึงในห้องปฏิบัติการของศูนย์แห่งชาติสำหรับปรสิตวิทยากีฏวิทยาและมาลาเรียควบคุม (CNM) กระทรวงสาธารณสุขในกรุงพนมเปญ. ภาชนะอุจจาระก่อนที่มีข้อความเป็น มอบให้กับเด็กแต่ละคนพร้อมกับคำแนะนำในการกรอก เด็กถูกถามในการเก็บรวบรวมอุจจาระไอเอ็นจีเช้าวันเพื่อให้แน่ใจว่าความสดของตัวอย่างอุจจาระ เช้าวันต่อมาภาชนะที่เต็มไปเก็บและภาชนะก่อนที่มีข้อความใหม่ที่ถูกจัดให้ สามตัวอย่างอุจจาระที่ถูกเก็บรวบรวมจากเด็กแต่ละคนกว่า 4 วันติดต่อกัน วันรุ่งขึ้นหลังจากคอลเลกชันแต่ละ tainers ทำาถูกส่งตรงไปยังห้องปฏิบัติการของ CNM สำหรับการวิเคราะห์. ภาชนะบรรจุอุจจาระสำหรับมูลวัวกระจายในหมู่สุ่มเลือกเจ้าของวัวแต่ละคนเก็บรวบรวมตัวอย่างหนึ่งอุจจาระสดจากทุกคนของสัตว์เลี้ยงของเขา ภาชนะที่ถูกเก็บรวบรวมในตอนเช้าวันรุ่งขึ้นหลังจากการจัดจำหน่ายและส่งโดยตรงไปยังห้องปฏิบัติการของ CNM. the เขียงที่โรงฆ่าสัตว์การศึกษาตรวจสอบตับวัวอกไว้ slaugh- บนพื้นฐานอย่างต่อเนื่องสำหรับการประกันคุณภาพเนื้อ เพื่อประโยชน์ในการศึกษาเขาบันทึกไว้ในไดอารี่จำนวนวัวอกไว้ slaugh- และเอสพีพี Fasciola ตับติดเชื้อ. 2.4 ขั้นตอนการตรวจทางห้องปฏิบัติการสำหรับแต่ละสามอุจจาระต่อเด็กหนึ่ง Kato-แคทซ์ smear หนา (แคทซ์ etal., 1972) ถูกจัดทำขึ้นโดยตรงหลังจากกลุ่มตัวอย่างที่เข้ามาในห้องปฏิบัติการ หลังจากที่ครึ่งเวลากวาดล้างชั่วโมงรอยเปื้อนได้รับการตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสง (400 ×ขยาย) ไข่พยาธิในลำไส้ จำนวนไข่ต่อชนิดพยาธินับและบันทึก. จากแต่ละสามอุจจาระต่อเด็ก approximately1 กรัมได้รับการเก็บรักษาไว้ใน 15 มลโซเดียมอะซิเตท-อะซิติกกรดฟอร์มาลิน (SAF) ตรึงสำหรับการวิเคราะห์โดยความเข้มข้นของฟอร์มาลินอีเทอร์เทคโนโลยี nique (ส่) (Marti andEscher, 1990) สี่สัปดาห์หลังจากเก็บตัวอย่างคงที่ได้รับการประมวลผลและการตรวจสอบภายใต้แสงกล้องจุลทรรศน์ (magnification1000 ×) สำหรับหนอนพยาธิลำไส้และโปรโตซัว. จากตัวอย่างอุจจาระครั้งแรกต่อเด็กประมาณ 0.5 กรัมของอุจจาระสดเก็บรักษาไว้ในเอทานอล 70% สำหรับมีส่วนโมเลกุลในภายหลัง -sis ใช้เวลาจริงลูกโซ่โพลิเมอร์ปฏิกิริยาเชิงปริมาณ (PCR) ในการวินิจฉัย Fasciola เอสพีพี (Alasaad etal., 2011) และการติดเชื้อเอฟ buski (ไม่ได้เผยแพร่การพัฒนาโดยดร. med. Stefanie Kramme สวิส TPH) ตัวอย่างที่เก็บรักษาไว้ได้โดยเริ่มต้นที่ถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการ TPH สวิสในบาเซิลวิตเซอร์แลนด์ที่วิเคราะห์โมเลกุลได้ดำเนินการออกประมาณ 2 เดือนต่อมา ครั้งแรกจากตัวอย่างอุจจาระแต่ละดอง 200_g ได้รับการล้างครั้งที่สองที่มีฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ(พีบีเอส) ที่จะกำจัดเอทานอล ต่อมาดีเอ็นเอถูกสกัดด้วยดีเอ็นเอ QIAamp สตูลมินิ Kit (QIAGEN สหรัฐอเมริกา) ได้โดยเริ่มต้นที่สกัดดีเอ็นเอถูกแช่แข็งที่ 20 _C จนกว่า PCR ได้ดำเนินการ 1week ภายหลัง ใน 0.5 กรัมของอุจจาระแรกจากเด็กแต่ละคนเป็นเชิงพาณิชย์ที่มีเอฟหมึก coproantigen เอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโน (ELISA) (Bio-X เบลเยียม) ได้รับการดำเนินการที่ห้องปฏิบัติการ CNM. เมื่อมาถึงตัวอย่างเลือดถูกเก็บไว้ที่ห้องพัก อุณหภูมิ-ture ก้อน ต่อจากนั้นตัวอย่างเลือดที่ถูกปั่นและซีรั่มที่ถูกแช่แข็งและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 _C ที่ห้องปฏิบัติการ CNM กลุ่มตัวอย่างที่แช่แข็งที่ถูกส่งไปยังศูนย์การวินิจฉัยของสวิส TPH วิตเซอร์แลนด์โดยที่วิธี ELISA สำหรับเอฟแอนติบอดีหมึกได้ดำเนินการ 2 เดือนหลังจากที่ตัวอย่างเทือกเขา-Lection ตัวอย่างซีรั่มที่มีผลบวกครั้งแล้วครั้งเล่ากับการทดสอบแอนติบอดีอิมมูโน (IFAT) เพื่อยืนยัน ทั้งหมดตัวอย่างซีรั่มที่มีความสำคัญเชิงบวกหรือ (ใกล้เคียงกับวางตัว

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สูงการศึกษาความชุกของไข่พยาธิตัวแบนใหญ่ในเด็กนักเรียนในกัมพูชา
B S T R A C T
ใหญ่ไข่พยาธิตัวแบน ( LTE ) ตาก ( คล้ายไข่รายงานพบในอุจจาระของเด็กวัยเรียนในเขตกันดาล , กัมพูชา การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของเด็กเรียนจากโรงเรียนระบุปัจจัยความเสี่ยงสำหรับการติดเชื้อ และวินิจฉัยพยาธิตัวแบนชนิด เราได้ทำการศึกษาในเชิงลึกแบบที่เกี่ยวข้องกับแบบสอบถาม admin - istered ให้เด็กนักเรียนที่ได้รับผลกระทบ จากโรงเรียน และตรวจสอบพื้นที่โดยรอบและมูลวัวในตับของการฆ่าวัว 3 แป้นจำนวนตรวจสอบต่อเด็กการใช้เค– Katz และฟอร์มาลินความเข้มข้นและอีเทอร์เทคนิค นอกจากนี้ เลือด enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA ) และ coprological Polymerase chain reaction ( PCR ) คือ 1 ) เพื่อศึกษาชนิด ชี้แจง โค มูล wereexaminedbycupsedimentationandcoprologicalelisa.ltewereobservedinthestools ของ 106 เด็กนักเรียน ( 46.5 % )สองเลือดตัวอย่างจากเด็กนักเรียนที่เป็นบวกสำหรับการตากใน afirstelisabutwerenegativeinaconfirmationimmunofluorescenceantibodytest จาก 221 PCR ตัวอย่างเพียงหนึ่งทดสอบบวกสำหรับ spp . ที่ตากไม่มี fasciolopsis buski . การบริโภคพืชผักดิบ ( oddsratio ( หรือ ) = 3.3 ) และน้ำปลาร้า ( OR = 2.1 ) อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( พ่อพันธุ์ ated กับ LTE ในอุจจาระฟลุคตาก spp . พบว่าใน 1 % ของ 191 วัว ตับ ความชุกของสัตว์ที่มีมูลเป็น 88.8 เปอร์เซ็นต์ ความชุกต่ำของเด็กนักเรียนที่ผ่านการทดสอบบวกสำหรับการวินิจฉัยระดับโมเลกุลที่เฉพาะเจาะจงและตาก ( กับผู้ที่ไม่มีหลักฐานในการวินิจฉัย . buski ขอระบุว่าส่วนใหญ่ของผลสังเกต LTE เป็นตาสีตาสา spp . จากตาก .ส่งจากโคให้มนุษย์ได้ และการให้บริการสาธารณสุขต้องแจ้งตาม .
1 ในประเทศรายได้ปานกลางและต่ำเบื้องต้น
, multipara sitism ลำไส้เป็นกฎมากกว่าเป็นข้อยกเว้น ( McKenzie , 2005 ; petney และ Andrews , 1998 ; steinmannetal . , 2010 ) ในภาคใต้ -
เอเชียตะวันออกพยาธิลำไส้ และโปรโตซัว multiparasitism เป็นที่รู้จักกันดีและได้รับการบันทึกไว้ ( ลี คณะ , 2002 ; parketal . , 2004 ; sayasoneetal . 20112009 ; sinuonetal . , 2003 ; ขอราคาและ retal .
2014 ) สายพันธุ์ถิ่นหลายของอาหาร borne ใบไม้ ( FBT ) ได้ระบุไว้ เช่น พยาธิใบไม้ตับ ( Opisthorchis viverrini และ ตาก spp . ) และพยาธิใบไม้ในลำไส้ ( fasciolopsis buski และ echinos - โทมะ spp . ) ( เ ยนคณะ .2001 keiserandutzinger , 2005 ; กวางคณะ , 2551 ; sayasoneetal , 2011 ; sohnetal . 2011a , B ) พยาธิ multiparasitism poses ท้าทายสำหรับ nosis diag ปรสิตวิทยา เป็นไข่จากสายพันธุ์ที่แตกต่างกันอาจจากคล้ายกัน ตัวอย่างเช่น ขนาด รูปร่าง รูปไข่ และการแสดงของโอเพอร์คูลัมขนาดเล็กและไม่เด่นของตากและไข่ tinguishable indis จาก Fbuski ตาสีตาสา spp . และบางไข่ โดยไข่ของปรสิตทั้งหมดสามขนาด egenera จะคล้ายกันในแง่
ของความยาวและความกว้าง : ตาก การ 106.5 – 171.5 / 63.9 – 95.4m ตาก 1 , 150.9 – 182.2 / ขวาง 106.2m ( Valero และคณะ , 2552 ) , ขยะ revolutum 97 – 117 / 61 – 65m ( ซอน คณะ , 2011a ) ; ตาสีตาสา ilocanum 89 และ 99 / 52 – 58m ( ซอน คณะ . 2011b ) และ
Fดังนั้นจึง buski / 80-85m ( การ์เซีย andbruckner , 1988 ) พวกเขาสามารถมีลักษณะ เป็นเหมือนไข่หรือไข่พยาธิตัวแบนใหญ่ตาก ( LTE ) ใน 2009 , LTE ที่พบในอุจจาระของ 27 / 150 schoolchil -
มากขึ้น ( ร้อยละ 18.7 ) ใน damrei chhlang หมู่บ้านหลักโรงเรียนกันดาลจังหวัดกัมพูชา ระหว่างมาตรฐาน parasiteological สำรวจโดยใช้เทคนิคเค
Katz ( เขียวและคณะ . 2556 )ให้สูง preva ตาก lence ของการติดเชื้อ spp . ในหมู่สัตว์เลี้ยงในภาคใต้ของกัมพูชา
( ตั้ม คณะ , 2550 ) , LTE อาจได้รับเชื้อจากตาก . . อย่างไรก็ตาม ชนิดอื่น ๆสามารถมีพยาธิตัวแบนรับผิดชอบ จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้เพื่อประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของเด็กวัยเรียน ระบุปัจจัยเสี่ยงต่อการติดเชื้อ และวินิจฉัยพยาธิตัวแบนชนิดทั้งหมด ด้วยการมุ่งเน้นในการศึกษาสำหรับตาก spp . เราแสดงของเด็กนักเรียน , ตรวจสอบวัวมูลใน และ รอบ ๆหมู่บ้าน และตรวจสอบ damrei chhlang ตับวัวในโรงฆ่าสัตว์ในท้องถิ่น .
2 วัสดุและวิธีการ
2.1 . การพิจารณาจริยธรรมจริยธรรม
พิธีการในการวิจัยได้จากคณะกรรมการจริยธรรม
ของ Basel stadtand Basel สวิตเซอร์แลนด์ ekbb ;
( ที่ดิน