The ability to synthesize DNA from

The ability to synthesize DNA from an RNA template, via reverse transcription, enables researchers to study RNA with the same molecular approaches used for DNA investigations. cDNA generated by reverse transcription can be amplified using polymerase chain reaction (PCR). The combination of reverse transcription and PCR (RT-PCR) allows the detection of low abundance RNAs in a sample. In the first step of the PCR process, the cDNA is denatured by heating to 95°C, which disrupts the hydrogen bonds between complementary strands, yielding single-stranded molecules. The temperature is then lowered in order to allow primers complementary to the sequence(s) of interest to anneal. The DNA polymerase included in the reaction will then begin DNA synthesis. At this point, the temperature is raised to the optimal activity temperature of the DNA polymerase (usually 72°C) to synthesize a new strand complementary to the template. The process of denaturing, annealing, and extension can be repeated multiple times, with a two-fold increase in the amount of DNA molecules with each cycle. Because PCR can selectively amplify a template, it is an important method for detecting specific nucleic acid molecules in a particular cell or small populations of cells. PCR Products can be used in many downstream applications, such as cloning into plasmid vectors and sequencing using next generation sequencing platforms.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความสามารถในการสังเคราะห์ดีเอ็นเอจากอาร์เอ็นเอแม่แบบที่มี ผ่านการถอดรหัสย้อนกลับ ช่วยให้นักวิจัยศึกษาแนวโมเลกุลเดียวที่ใช้สำหรับการตรวจสอบดีเอ็นเออาร์เอ็นเอ cDNA ที่สร้างขึ้น โดยการถอดรหัสย้อนกลับสามารถขยายได้โดยใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) ชุดถอดรหัสย้อนกลับและ PCR (RT-PCR) ช่วยให้การตรวจสอบของ RNAs ความอุดมสมบูรณ์ต่ำในตัวอย่าง ในขั้นตอนแรกของกระบวนการ PCR, cDNA มีเอทิลแอลกอฮอล์ โดยเครื่องทำความร้อนถึง 95° C ที่ disrupts พันธะระหว่างเส้นเสริม ส่งโมเลกุลเดียวที่ควั่น อุณหภูมิจะลดลงเพื่อให้ไพรเมอร์จะ sequence(s) น่าสนใจการหลอมแล้ว พอลิเมอเรส DNA ที่รวมอยู่ในปฏิกิริยาจากนั้นจะเริ่มต้นการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ ที่จุดนี้ ยกอุณหภูมิอุณหภูมิที่เหมาะสมกิจกรรมของการดีเอ็นเอพอลิเมอเรส (ปกติ 72° C) การสังเคราะห์สาระใหม่ในแม่แบบ กระบวนการ denaturing หลอม และนามสกุลสามารถซ้ำหลายครั้ง มีการเพิ่มขึ้นสองเท่าจำนวนโมเลกุลดีเอ็นเอกับแต่ละรอบ เนื่องจาก PCR สามารถเลือกขยายแม่แบบ มันเป็นวิธีการสำคัญสำหรับการตรวจจับโมเลกุลของกรดนิวคลีอิกที่เฉพาะเจาะจงในบางเซลล์หรือประชากรขนาดเล็กของเซลล์ ผลิตภัณฑ์ PCR ใช้ปลายงาน เช่นโคลนลงในเวกเตอร์ plasmid และจัดลำดับการใช้แพลตฟอร์มลำดับรุ่นถัดไป

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความสามารถในการสังเคราะห์ดีเอ็นเอจากแม่แบบ RNA ผ่านถอดรหัสแบบย้อนกลับช่วยให้นักวิจัยสามารถศึกษา RNA ด้วยวิธีโมเลกุลเดียวกับที่ใช้สำหรับการตรวจสอบดีเอ็นเอ ยีนที่สร้างขึ้นโดยการถอดรหัสย้อนกลับสามารถขยายโดยใช้วิธี Polymerase chain reaction (PCR) การรวมกันของการถอดรหัสย้อนกลับและ PCR (RT-PCR) ช่วยให้การตรวจสอบของ RNAs ความอุดมสมบูรณ์ต่ำในตัวอย่าง ในขั้นตอนแรกของกระบวนการ PCR ที่ cDNA เป็นเอทิลแอลกอฮอล์โดยใช้ความร้อนถึง 95 องศาเซลเซียสซึ่งขัดขวางการพันธะไฮโดรเจนระหว่างเส้นเสริมยอมโมเลกุลเดี่ยวควั่น อุณหภูมิจะลดลงแล้วเพื่อให้ไพรเมอร์เสริมลำดับ (s) ที่น่าสนใจไปหลอม โพลิเมอร์ดีเอ็นเอรวมอยู่ในการเกิดปฏิกิริยาจากนั้นจะเริ่มต้นการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ ณ จุดนี้อุณหภูมิจะเพิ่มขึ้นถึงอุณหภูมิกิจกรรมที่ดีที่สุดของดีเอ็นเอโพลิเมอร์ (ปกติ 72 ° C) การสังเคราะห์เส้นใยใหม่ประกอบกับแม่แบบ กระบวนการของการ denaturing, หลอมและการขยายสามารถทำซ้ำหลาย ๆ ครั้งกับการเพิ่มขึ้นสองเท่าในจำนวนของโมเลกุลดีเอ็นเอกับแต่ละรอบ เพราะ PCR สามารถเลือกที่จะขยายแม่แบบมันเป็นวิธีการที่สำคัญสำหรับการตรวจสอบโมเลกุลของกรดนิวคลีอิกที่เฉพาะเจาะจงในเซลล์โดยเฉพาะหรือประชากรขนาดเล็กของเซลล์ ผลิตภัณฑ์ PCR สามารถนำมาใช้ในการใช้งานปลายน้ำเป็นจำนวนมากเช่นโคลนเข้าเวกเตอร์พลาสมิดลำดับและใช้แพลตฟอร์มลำดับรุ่นต่อไป

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความสามารถในการสังเคราะห์ DNA RNA จากแม่แบบที่ผ่านการถอดรหัสย้อนกลับช่วยให้นักวิจัยที่จะศึกษา DNA ที่มีโมเลกุลดีเอ็นเอ แนวทางการสืบสวน ยีนที่สร้างขึ้นโดยย้อนกลับถอดความสามารถขยายโดยใช้วิธีพีซีอาร์ ( PCR ) การรวมกันของการถอดความย้อนกลับ ( RT-PCR ) และ PCR ช่วยให้ตรวจหาต่ำความอุดมสมบูรณ์ RNAs ในตัวอย่าง ในขั้นตอนแรกของกระบวนการ PCR วิธีคือใช้โดยความร้อน 95 องศา C ซึ่งขัดขวางพันธะไฮโดรเจนระหว่างโมเลกุลเดี่ยวที่ควั่นถักประกอบยวบยาบ อุณหภูมิจะลดลงเพื่อให้รองพื้น ประกอบกับลำดับ ( s ) ของดอกเบี้ยที่จะหลอม . ดีเอ็นเอในปฏิกิริยาโดยรวมจากนั้นจะเริ่มต้นการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ ณจุดนี้ อุณหภูมิจะเพิ่มขึ้นในกิจกรรมที่เหมาะสมอุณหภูมิของดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ( ซึ่งปกติ 72 ° C ) เพื่อสร้างเส้นใหม่จากแม่แบบ กระบวนการของการหลอม และี่ขยาย , สามารถทำซ้ำหลาย ๆครั้ง กับด้านการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอของโมเลกุลในแต่ละรอบ เพราะ PCR สามารถเลือกขยายแม่แบบ มันเป็นวิธีการที่สำคัญสำหรับการตรวจสอบเฉพาะกรดนิวคลีอิกในเซลล์ หรือโมเลกุลเฉพาะประชากรขนาดเล็กของเซลล์ ผลิตภัณฑ์ PCR สามารถใช้ในงานหลายด้าน เช่น โคลนเข้าสู่พลาสมิดพาหะ และการใช้แพลตฟอร์มรุ่นถัดไปของ