Two-hybrid bacterial.The bacterioMa

Two-hybrid bacterial.
The bacterioMatch II two-hybrid system (stratagene) was used to detect protein-protein interactions. The plasmid pairs were used to cotransform the XL1-Blue MRF' reporter strain on M9 salt agar without 3-amino-1,2,4(3-AT).Colonies were then restreaked on M9 salt agar containing 5 mM 3-AT at 37'C for 24 hour for the first detection of interactions.
For confirmation, the colonies were cultured on dual-selective medium containing 5 mM 3AT and streptomycin as described in the manual.
purification of chaplin and rodlin proteins .
For purion of chaplin and rodlin proteins, the wild-type strain M145 was grown on cellophane discs on the surface of MS agar medium. After 4 days of growth, the hyphae were harvested and extracted using trifluoroacetic acid as previously(8,13)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สองไฮบริดแบคทีเรีย.
bacteriomatch ii สองระบบไฮบริด (Stratagene) ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบปฏิกริยาระหว่างโปรตีน คู่พลาสมิดที่ถูกนำมาใช้เพื่อ cotransform ความเครียดนักข่าว MRF 'XL1 ฟ้าบนวุ้นเกลือโดยไม่ต้อง m9 3 อะมิโน-1, 2,4 (3 ที่). อาณานิคมแล้ว restreaked บนอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีเกลือ m9 5 มม. 3 ที่ที่ 37'c 24 ชั่วโมงเพื่อตรวจสอบครั้งแรกของการมีปฏิสัมพันธ์.
ยืนยันอาณานิคมเพาะเลี้ยงในสื่อคู่เลือกที่มี 5 มม. 3AT และ streptomycin ตามที่อธิบายไว้ในคู่มือ.
การทำให้บริสุทธิ์ของแชปลินและโปรตีน rodlin.
เพื่อ purion ของแชปลินและ rodlin โปรตีนป่าชนิดสายพันธุ์ M145 ได้รับการปลูกบนแผ่นกระดาษแก้วที่ พื้นผิวของกลางมิลลิวุ้น หลังจาก 4 วันของการเจริญเติบโตhyphae ถูกเก็บเกี่ยวและสกัดโดยใช้กรด Trifluoroacetic เป็นก่อนหน้านี้ (8,13)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แบคทีเรียผสม 2.
ระบบไฮบริด 2 II bacterioMatch (stratagene) ถูกใช้เพื่อตรวจหาโปรตีนโปรตีนโต้ตอบ คู่ plasmid ใช้ cotransform MRF XL1 บลู ' ต้องใช้โปรแกรมรายงาน M9 agar เกลือโดย 3-amino-1,2,4(3-AT)อาณานิคมได้แล้ว restreaked ใน M9 agar เกลือประกอบด้วย 5 มม. 3-AT ที่ 37'C ใน 24 ชั่วโมงตรวจแรกของโต้
ยืนยัน อาณานิคมมี cultured เลือกคู่ขนาดกลางมี 5 มม. 3AT และ streptomycin ในคู่มือ
ทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนแชปลินและ rodlin.
สำหรับ purion ของแชปลินและ rodlin โปรตีน M145 ป่าชนิดพันธุ์ที่ปลูกในดิสก์ cellophane บนผิวของ agar MS ตัวกลาง หลังจาก 4 วันของการเจริญเติบโต hyphae ถูกเก็บเกี่ยว และสกัดโดยใช้กรด trifluoroacetic เป็น previously(8,13)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สองระบบไฮบริดเกิดจากเชื้อแบคทีเรีย.ระบบ bacteriomatch II สองระบบไฮบริด
( stratagene )ถูกใช้ในการตรวจหาการโต้ตอบโปรตีนโปรตีน ที่ plasmid คู่จะถูกใช้เพื่อ cotransform ที่ขนาด XL 1 - สีฟ้า mrf 'นักข่าวความเมื่อยล้าในม. 9 เกลือสาหร่ายทะเลโดยไม่ต้อง 3 - กรดอะมิ โน -1,2,4 ( 3 - ที่)..อาณานิคมเป็นแล้ว restreaked บน M 9 เกลือสาหร่ายที่มี 5 มม. 3 ใน 37 ' C สำหรับ 24 ชั่วโมงสำหรับการตรวจจับที่เป็นครั้งแรกในการ.
สำหรับการยืนยัน,ดินแดนอาณานิคมเป็นวัฒนธรรมในแบบ Dual - สรรหาขนาดกลางที่มี 5 มม. 3 ที่และยาซทเรพโทะไม - ซินเช่นที่อธิบายไว้ในคู่มือนี้ไว้.
ทำน้ำบริสุทธิ์ของความชื่นชอบจาก Charie Chapin และ rodlin โปรตีน.
สำหรับ purion ของความชื่นชอบจาก Charie Chapin และ rodlin โปรตีน,ป่า - พิมพ์ความเมื่อยล้าม. 145 ตัวบนวุ้นเส้นดิสก์บนผิวหน้าของ MS สาหร่ายทะเลขนาดกลาง. หลังจากนั้น 4 วันของการขยายตัวhyphae ได้เก็บเกี่ยวและถูกแยกออกมาโดยใช้กรด trifluoroacetic เช่นเดิม( 8,13 )