The brown planthopper, Nilaparvata lugens (N. lugens, Hemiptera: Delphacidae), and the green rice
leafhopper, Nephotettix cincticeps (N. cincticeps, Hemiptera: Cicadellidae), two sap-sucking feeders, have
caused many destructive agricultural disasters in East Asia, as they can bring diseases like ‘hopper burn’
and transmit plant viruses. Recently, continuously-cultured cell lines from both insects have been reported.
However, exogenous protein expression systems have not yet been established. Here, we identified
thirteen tubulin genes and three actin genes from N. lugens, and one tubulin gene and two actin
genes from N. cincticeps. Furthermore, putative promoter regions of these genes were analyzed by bioinformatic
approaches and 50-RACE assay, and the promoter strength was evaluated by driving the
enhanced green fluorescent protein expression in three insect cell lines, S2, Sf9, and BmN. Finally, we
identified three effective promoters (Nl_aTub1 promoter, Nl_act3 promoter, and Nc_act1 promoter)
among all candidates we screened. The Nc_act1 promoter showed the strongest activity, while the
Nl_aTub1 promoter only worked in S2 cells. In conclusion, we identified and functionally characterized
three native promoters from N. lugens and N.cincticeps, which would facilitate the establishment of
exogenous protein expression systems suitable for these two insect pests.
เพลี้ยกระโดดสีน้ำตาล , Nilaparvata lugens , lugens อันดับ Hemiptera : , เดลฟาซิดี้ ) และ ข้าวเขียวเพลี้ยจั๊กจั่น nephotettix , cincticeps ( น. cincticeps อันดับ Hemiptera , : ซิคาเดลลิดี้ ) สองซับดูด ดูดได้ทำให้เกิดภัยพิบัติทางการเกษตรเสียหายมากในภูมิภาคเช่นที่พวกเขาสามารถนำโรคต่างๆ เช่น ถังเผา " "และส่งไวรัสพืช เมื่อเร็ว ๆนี้ , เซลล์เพาะเลี้ยงอย่างต่อเนื่องทั้งจากแมลงที่ได้รับรายงานมาอย่างไรก็ตาม ระบบการแสดงออกของโปรตีนจากภายนอกยังไม่ได้ถูกตั้งขึ้น ที่นี่ เราระบุสิบสามทูบูลินและยีน 3 ยีนจาก actin . lugens และยีนทูบูลินหนึ่งและสองแอกทินยีนจากเอ็น cincticeps . นอกจากนี้ โปรโมเตอร์ของยีนเหล่านี้ นอกจากนี้ ภูมิภาค โดยใช้ไบโอ นฟ ์เมติกแนวทางและ 50-race การทดสอบและการประเมินโดยแรงขับเพิ่มโปรตีนเรืองแสงสีเขียว การแสดงออกในเซลล์แมลงสามบรรทัด S2 ต่างๆและจาก . ในที่สุดระบุสามประสิทธิภาพ โปรโมเตอร์ ( nl_atub1 promoter , nl_act3 โปรโมเตอร์และ nc_act1 Promoter )ในบรรดาผู้ที่เราคัดกรอง . การ nc_act1 promoter พบกิจกรรมที่แข็งแกร่ง ในขณะที่nl_atub1 โปรโมเตอร์เท่านั้นทำงานใน S2 เซลล์ สรุป เราระบุและการทำงานลักษณะสามโปรโมเตอร์พื้นเมืองจากเอ็นและ lugens n.cincticeps ซึ่งจะอำนวยความสะดวกในการจัดตั้งโปรตีนที่แสดงออกภายนอกระบบเหมาะสำหรับสองคนนี้ แมลงศัตรูพืช
การแปล กรุณารอสักครู่..