The use of cell cultures in biocompatibility testing
entails a series of advantages, such as the extreme
sensitivity of the cultured cells to toxic agents, the
possibility of investigating the specific interactions
at cell or molecular level, and the ability to perform
large series of experiments under the same conditions.
Furthermore, this is the only possibility of
testing on human cells.
Cell cultures are achieved through enzymatic
or mechanical disaggregation of a piece of tissue or
by spontaneous migration from an explant. Cells
may be propagated as an adherent monolayer or
as a cell suspension. The major advantage is
their ability to be propagated and divided into
replicates; they can be characterized and
by freezing. If they come from fetal or e
The limits of these methods are that in vivo cells
rarely act separately: what is observed in vitro is a
simplified part of the in vivo complex mechanisms.
Systems to eliminate cell waste products are lacking
in cultured cells as culture conditions are
stagnant and consequently the material toxicity
can be overestimated. Finally, it should be
remarked that the relatively short culture times,
bound to the finite life-span of the cultured cells,
limits the study to the effects of acute toxicity.
tissues they are less specialized but they contain
more stem cells.
Which type of cells should be used in the biocompatibility
studies? Before tackling this subject
it is necessary to define some terms. The term ‘in
vitro culture’ applies to the experimental system
which artificially reproduces the environmental
conditions necessary to guarantee the viability of
cells or tissues harvested from a living organism.
Cell cultures are derived either from a primary
explant or a cell line. A fresh isolate of cells
which is cultured in vitro is called a ‘primary
culture’ until cells are subcultured or passaged.
Primary cell cultures are generally heterogeneous,
with a low fraction of growing cells, but they
contain a variety of cell types which are
representative of the tissue. The subculture
allows the propagation of the culture, which is
now called a ‘cell line’: it appears to be more
uniform, but specialized cells and functions can
be lost. The greatest advantage of a cell line is
the availability of a large amount of homogeneous
material to be used for long periods
of time.
The system of in vitro culture permits the study
of three types: the organ, tissue and cell culture.
An organ culture is obtained when a whole
organ, often from embryos, is explanted and
cultured in vitro. Organ culture will preserve
both parenchymal and stromal components of the
organ, as well as their connections and functions.
Examples of cultured organs are represented by
mouse femur or embryo chick kidney. Culture
conditions are usually conceived for preventing
cell migration from the explant and to maintain
structural organization of the original tissue.
After the initial trauma of explantation and
some central necrosis, the cultured organ will
generally remain in a non-growing steady state
for a period of several days and even weeks.
Afterwards the organ encounters degeneration
phenomena.
After several passages a cell line may die (finite
cell line) or ‘transform’ to become an established
or continuous cell line. Most of the continuous
cell lines originate from neoplastic tissues, but
several continuous cell lines are derived from
normal embryonic tissue (MDCK dog kidney,
3T3 fibroblasts). The appearance of a continuous
cell line is usually accompanied by morphological
alterations, such as decreased cell size, reduced
adherence, higher nucleus : cytoplasm ratio, by an
increased growth rate (doubling time of a cell
population may decrease from 36-48 to 12-JCih),
by a reduction in serum requirements and by
changes in chromosome number.
EVALUATION OF CYTOCOIVIPATX
Tissue culture is obtained when a small fragment The document IS0 10993-5, ‘Biological Testing of
of tissue (e.g. epithelium), retaining its histo- Medical Devices-Part 5: Tests for Cytotoxicity,
logical and biochemical differentiation, is cultured in vitro method’2 reports the tests to be performed
in vitro. Embryo liver slices are largely used in by dividing them into three categories: tests on
toxicological analysis of drugs. As with organ extracts, tests by direct contact and tests by indirect
culture, they cannot be propagated and generally contact. The choice of one of these categories
incur greater experimental variation between depends on the nature, the application site and the
replicates. Cell cultures derived from embryonic use of the sample under examination. Moreover,
tissues will survive and grow more easily than those the preparation methods of the samples and cell
derived from adult tissues. cultures are described, as well as the cell exposure
ใช้ในการทดสอบ biocompatibility เซลล์วัฒนธรรมใช้ชุดของข้อได้เปรียบ เช่นมากความไวของการเพาะเลี้ยงเซลล์พิษเจ้าหน้าที่ ,ความเป็นไปได้ของการปฏิสัมพันธ์ที่เฉพาะเจาะจงในเซลล์หรือในระดับโมเลกุล และความสามารถในการแสดงชุดใหญ่ของการทดลองภายใต้เงื่อนไขเดียวกันนอกจากนี้ นี้เป็นเพียงความเป็นไปได้ของการทดสอบในเซลล์ของมนุษย์เซลล์วัฒนธรรมสำเร็จผ่านเอนไซม์หรือ disaggregation เชิงกลของชิ้นส่วนของ เนื้อเยื่อ หรือโดยการย้ายถิ่นที่เกิดขึ้นเองจากชิ้นส่วนพืช . เซลล์อาจจะขยายพันธุ์เป็นชั้นที่ติดหรือเป็นมือถือระบบ ประโยชน์หลักคือความสามารถของพวกเขาจะถูกแบ่งออกเป็นซ้ำ ; พวกเขาสามารถมีลักษณะและโดยการแช่แข็ง ถ้ามันออกมาจากครรภ์ หรือ อีข้อจำกัดของวิธีการเหล่านี้ในร่างกายเซลล์ไม่ค่อยทำตัวแยก : อะไรคือที่พบในหลอดทดลองเป็นเป็นส่วนหนึ่งของกลไกที่ซับซ้อนง่ายในร่างกายระบบกำจัดของเสีย เซลล์จะขาดในการเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นเงื่อนไขวัฒนธรรมนิ่งและจากนั้น พิษ วัสดุสามารถเป็นสิ่งที่ไม่จริง ในที่สุด , มันควรจะเป็นกล่าวว่าเวลาที่วัฒนธรรมค่อนข้างสั้นผูกพันกับชีวิตจำกัดในเซลล์เพาะเลี้ยงขอบเขตการศึกษาผลของความเป็นพิษเฉียบพลันเนื้อเยื่อของพวกเขาจะน้อยกว่าผู้เชี่ยวชาญ แต่พวกเขามีสเต็มเซลล์มากขึ้นเซลล์ชนิดใด ควรใช้กันได้ทางชีวภาพการศึกษา ? ก่อนที่จะแก้ปัญหาเรื่องนี้มันเป็นสิ่งที่จำเป็นเพื่อกำหนดบางเงื่อนไข คำว่า ' ในวัฒนธรรมของการใช้กับระบบทดลองซึ่ง reproduces สิ่งแวดล้อมเทียมเงื่อนไขที่จำเป็นเพื่อรับประกันถึงความเซลล์หรือเนื้อเยื่อเกี่ยวจากสิ่งมีชีวิตที่อาศัยอยู่เซลล์วัฒนธรรมมีที่มาทั้งจากปฐมภูมิหรือเซลล์ต่อบรรทัด สดแยกเซลล์ที่เพาะเลี้ยงในหลอดทดลอง เรียกว่า ' ปฐมภูมิวัฒนธรรม ' จนกว่าเซลล์ subcultured หรือ passaged .เซลล์ไฟฟ้าปฐมภูมิโดยทั่วไปมีวัฒนธรรมต่างกัน ,กับส่วนต่ำของการเติบโตของเซลล์ แต่พวกเขามีความหลากหลายของชนิดของเซลล์ซึ่งเป็นตัวแทนของเยื่อ วัฒนธรรมช่วยเผยแพร่วัฒนธรรมซึ่งเป็นตอนนี้เรียกว่า ' เซลล์บรรทัด ' : มันดูเหมือนจะมากขึ้นเครื่องแบบ แต่เฉพาะฟังก์ชั่นที่สามารถจะหายไป ประโยชน์ที่ยิ่งใหญ่ที่สุดของเซลล์เส้นมีจำนวนมากที่เป็นเนื้อเดียวกันวัสดุที่จะใช้สำหรับระยะเวลานานของเวลาระบบการเพาะเลี้ยงในอนุญาตให้ศึกษาสามประเภท : อวัยวะ , เนื้อเยื่อและเซลล์เพาะเลี้ยงอวัยวะที่เป็นวัฒนธรรมที่ได้รับเมื่อรวมอวัยวะจากตัวอ่อนมักจะเป็น explanted และที่เพาะเลี้ยงในหลอดทดลอง . วัฒนธรรมองค์กรจะรักษาทั้ง parenchymal stromal และองค์ประกอบของอวัยวะ รวมทั้งของความสัมพันธ์และฟังก์ชันตัวอย่างของการเพาะเลี้ยงอวัยวะจะแสดงโดยกระดูกโคนขาเมาส์ หรือตัวอ่อนของไก่ในไต วัฒนธรรมเงื่อนไขที่มักจะรู้สึกเพื่อป้องกันการย้ายถิ่นจากต่อเซลล์และรักษาโครงสร้างเนื้อเยื่อต้นฉบับหลังจากอุบัติเหตุครั้งแรกของ explantation และบางกลางพบอวัยวะเพาะเลี้ยงจะโดยทั่วไปยังคงอยู่ในสถานะคงตัวไม่เติบโตในช่วงเวลาของวันและแม้หลายสัปดาห์หลังจากนั้น อวัยวะที่พบความเสื่อมปรากฏการณ์หลังจากข้อความหลายๆ บรรทัด อาจตายได้ ( เซลล์จำกัดเซลล์แปลงบรรทัด ) หรือ ' ' กลายเป็นตั้งขึ้นมีเซลล์ที่บรรทัด ที่สุดของอย่างต่อเนื่องมาจากเนื้อเยื่อเซลล์เนื้องอก แต่ต่อเนื่องมาจากหลายเซลล์เนื้อเยื่อของตัวอ่อนปกติ ( mdck สุนัขโรคไต3T3 fibroblasts ) ลักษณะของแบบต่อเนื่องเซลล์บรรทัดโดยปกติมักจะโดยการดัดแปลง เช่น ลดขนาดเซลล์ลดลงการยึดมั่น สูงกว่าอัตราส่วนปริมาตร โดยนิวเคลียสเพิ่มอัตราการเจริญเติบโต ( doubling time ของเซลล์ประชากรอาจลดลงจาก 36-48 12 jcih )โดยการลดลงของความต้องการและโดยการเปลี่ยนแปลงจำนวนโครโมโซม .การประเมิน cytocoivipatxการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อได้เมื่อมีขนาดเล็กส่วนเอกสาร is0 10993-5 ' การทดสอบของชีวภาพเนื้อเยื่อ ( เช่นเยื่อบุผิว ) , การรักษาของ histo - อุปกรณ์ทางการแพทย์ ตอนที่ 5 : การทดสอบความเป็นพิษ ,ทางชีวเคมีและการเป็นวิธีในหลอดทดลองเพาะเลี้ยง ' รายงานการทดสอบจะต้องแสดงในหลอดทดลอง . ตัวอ่อนตับส่วนใหญ่จะใช้ในการแบ่งพวกเขาออกเป็นสามประเภท : การทดสอบบนการวิเคราะห์ทางพิษวิทยาของยา ด้วยสารสกัดจากอวัยวะที่ทดสอบโดยการสัมผัสโดยตรงและการทดสอบโดยทางอ้อมวัฒนธรรม , พวกเขาไม่สามารถขยายพันธุ์และโดยทั่วไปติดต่อ เลือกหนึ่งในประเภทเหล่านี้ต้องมากกว่าทดลองการแปรระหว่างขึ้นอยู่กับธรรมชาติ และการใช้เว็บไซต์ได้แก่ เซลล์วัฒนธรรมมาจากใช้ตัวอ่อนของกลุ่มตัวอย่างที่ใช้ในการสอบ นอกจากนี้เนื้อเยื่อจะอยู่รอดและเติบโตได้ง่ายขึ้นกว่าการเตรียมวิธีการตัวอย่างและเซลล์ได้มาจากเซลล์ผู้ใหญ่ วัฒนธรรมอธิบายเช่นเดียวกับเซลล์แสง
การแปล กรุณารอสักครู่..
