Materials and methodsChemicalsTrich

Materials and methods
Chemicals
Trichloroacetic acid (TCA), Folin Ciocalteau, 1, 1-diphenyl-2-
picryl hydrazyl (DPPH), hydrochloric acid, linoleic acid, ferrozine,
butylated hydroxyanisole (BHA), quercetin, ascorbic acid, hydrogen
peroxide, gallic acid, Sodium nitroprusside and methanol were
purchased from Sigma-Aldrich Chemical Company, USA. Sodium
carbonate, potassium acetate, aluminium chloride (AlCl3), potassium
ferricyanide, sulfanilamide, N-(1-naphthyl) ethylenediamine dihydrochloride,
EDTA and ferric chloride (FeCl3) were purchased
from Merck Compagny, Germany. Other chemicals were purchased
at analytical grade or purer.
Plant material
Aerial parts of Hyssopus angustifolius M. Bieb. has been collected
from Veresk area (central Elburz Mountains Latitude: 35° 54’ N,
Longitude: 52° 59’ E, altitude: 1900 above sea level,), Iran through
spring 2010. The plant was authenticated at the Herbarium of
Department of Biology in the University of Mazandaran (voucher
specimen No 975).
Extraction procedures
Plant powder (100 g) was placed in a soxhlet extractor and extracted
with methanol (3 liter) for 8 h. The solvent was recovered by
distillation in vacuo, and the residue, stored in the desiccator, was
used for subsequent experiments.
Determination of total phenolic content
Briefl y, 0.5 mL of sample (1.6 mg mL-1) was incubated with 2.5 mL
of Folin-Ciocalteau reagent (0.2 N) for 5 min and then 2.0 mL
aqueous solution of sodium carbonate (75 mg mL-1) was added. The
absorbance of reactions mixture was measured at 760 nm after 2 h of
incubation at room temperature. Total phenol content was calculated
using gallic acid standard curve (AKILLIOGLU and KARAKAYA,
2010).
Determination of fl avonoid content
Briefl y, extract (0.5 mL of a solution at 1.6 mg mL-1) was incubated
with methanol (1.5 mL), aluminum chloride (0.1 mL, 10%),
potassium acetate (0.1 mL, 1 M) and distilled water (2.8 ml) at room
temperature for 30 min. Then, absorbance of sample was recorded at
415 nm by spectrophotometer (AKILLIOGLU and KARAKAYA, 2010).
Quercetin was used for calibration curve preparation.
1, 1-diphenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH) radical scavenging
Equal volumes of sample (25-400 μg mL-1) were added to methanol
solution of DPPH (100 μM). Absorbance of reaction mixture was
recorded at 517 nm after 15 min incubating at room temperature.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการเคมีภัณฑ์Trichloroacetic กรด (TCA), Folin Ciocalteau, 1, 1-ฟีนิลได-2 -picryl hydrazyl (DPPH), กรดไฮโดรคลอริก กรด linoleic, ferrozinebutylated hydroxyanisole (BHA), quercetin กรดแอสคอร์บิค ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ กรด gallic, nitroprusside โซเดียม และเมทานอลได้ซื้อจาก บริษัทเคมี Aldrich ซิก สหรัฐอเมริกา โซเดียมcarbonate โพแทสเซียม acetate อะลูมิเนียมคลอไรด์ (AlCl3) โพแทสเซียมferricyanide ซัลฟานิลาไมด์ N-(1-naphthyl) ethylenediamine dihydrochlorideซื้อ EDTA และคคลอไรด์ (FeCl3)จากเมอร์ค Compagny เยอรมนี ซื้อสารเคมีอื่น ๆเกรดวิเคราะห์ หรือ purerวัสดุโรงงานส่วนทางอากาศของ Hyssopus angustifolius Bieb เมตร มีการรวบรวมจากตั้ง Veresk (กลางภูเขา Elburz ละติจูด: 35° 54' Nลองจิจูด: 52 ° 59' E สูง: 1900 ที่ระดับน้ำทะเล,), อิหร่านผ่านฤดูใบไม้ผลิ 2010 โรงงานได้รับรองความถูกต้องที่หอพรรณไม้ของภาควิชาชีววิทยามหาวิทยาลัยของ Mazandaran (ใบสำคัญในตัวอย่างเลข 975)ขั้นตอนการสกัดวางในระบาย soxhlet และสกัดพืชผง (100 กรัม)ด้วยเมทานอล (3 ลิตร) สำหรับ 8 h ตัวทำละลายถูกกู้คืนโดยกลั่นใน vacuo และสารตกค้าง เก็บใน desiccator ถูกใช้สำหรับการทดลองต่อไปกำหนดเนื้อหารวมฟีนอY Briefl, 0.5 มล.ของตัวอย่าง (มก. 1.6 mL-1) ได้ incubated กับ 2.5 mLของรีเอเจนต์ Folin-Ciocalteau (0.2 N) สำหรับ 5 นาที แล้ว 2.0 mLเพิ่มการละลายของโซเดียมคาร์บอเนต (75 mg mL-1) ที่มีที่วัด absorbance ของปฏิกิริยาผสม 760 nm หลัง h 2 ของบ่มที่อุณหภูมิห้อง เนื้อหาทั้งหมดวางไม่ได้ใช้กรด gallic เส้นโค้งมาตรฐาน (AKILLIOGLU และ KARAKAYA2010)กำหนดเนื้อหา avonoid flY Briefl สารสกัด (0.5 mL ของโซลูชันที่มก. 1.6 mL-1) ได้ incubatedด้วยเมทานอล (1.5 mL), อลูมิเนียมคลอไรด์ (0.1 มล. 10%),โพแทสเซียม acetate (0.1 มล. 1 M) และกลั่นน้ำ (2.8 ml) ห้องอุณหภูมิสำหรับ 30 นาที แล้ว บันทึก absorbance ของตัวอย่างที่415 nm โดยเครื่องทดสอบกรดด่าง (AKILLIOGLU และ KARAKAYA, 2010)Quercetin ถูกใช้สำหรับการเตรียมการปรับเทียบเส้นโค้ง1, hydrazyl 1-ฟีนิลได-2-picryl (DPPH) รุนแรง scavengingมีเพิ่มวอลุ่มเท่าของตัวอย่าง (25-400 μg mL-1) กับเมทานอลโซลูชั่นของ DPPH (100 μM) Absorbance ของส่วนผสมของปฏิกิริยาได้บันทึกที่ 517 nm หลังจาก 15 นาที incubating ที่อุณหภูมิห้อง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
สารเคมี
กรดไตรคลอโร (TCA), Folin Ciocalteau, 1, 1-diphenyl-2-
picryl hydrazyl (DPPH), กรดไฮโดรคลอริก, กรดไลโนเลอิก ferrozine,
butylated hydroxyanisole (BHA), quercetin, วิตามินซี, ไฮโดรเจน
เปอร์ออกไซด์ฝรั่งเศส กรดไนโตรโซเดียมและเมทานอลถูก
ซื้อมาจาก บริษัท Sigma-Aldrich เคมิคอล จำกัด , สหรัฐอเมริกา โซเดียม
คาร์บอเนตโพแทสเซียมอะซิเตท, อลูมิเนียมคลอไรด์ (AlCl3) โพแทสเซียม
ferricyanide, sulfanilamide, N- (1 แนพ) ethylenediamine dihydrochloride,
EDTA และคลอ (FeCl3) ที่ซื้อมา
จากเมอร์ Compagny เยอรมนี สารเคมีอื่น ๆ ที่ซื้อมา
อยู่ที่ระดับการวิเคราะห์หรือบริสุทธิ์
พืชวัสดุ
ชิ้นส่วนทางอากาศของ Hyssopus angustifolius M. Bieb ได้รับการรวบรวม
จากพื้นที่ Veresk (กลางเทือกเขา Elburz ละติจูด: 35 ° 54 'N,
ลองจิจูด: 52 ° 59 'E, ความสูง: 1900 เหนือระดับน้ำทะเล), อิหร่านผ่าน
ฤดูใบไม้ผลิปี 2010 พืชที่ถูกรับรองความถูกต้องในการเข้าชมของ
กรม ชีววิทยาในมหาวิทยาลัย Mazandaran (บัตรกำนัล
ตัวอย่างไม่มี 975)
ขั้นตอนการสกัด
ผงพืช (100 กรัม) วางอยู่ในวิธีการสกัดแบบแยกและสกัด
ด้วยเมทานอล (3 ลิตร) เป็นเวลา 8 ชั่วโมง ตัวทำละลายที่ได้รับการกู้คืนโดย
การกลั่นในสุญญากาศและที่เหลือเก็บไว้ในเดซิถูก
นำมาใช้สำหรับการทดลองมา
วิเคราะห์หาปริมาณฟีนอลทั้งหมด
Briefl ปี, 0.5 มิลลิลิตรของตัวอย่าง (1.6 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1) ถูกบ่มกับ 2.5 มิลลิลิตร
ของ Folin สาร -Ciocalteau (0.2 N) เป็นเวลา 5 นาทีและจากนั้น 2.0 มิลลิลิตร
สารละลายโซเดียมคาร์บอเนต (75 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1) ถูกเพิ่มเข้ามา
การดูดกลืนแสงของปฏิกิริยาส่วนผสมวัดที่ 760 นาโนเมตรหลังจาก 2 ชั่วโมงของการ
บ่มที่อุณหภูมิห้อง เนื้อหาฟีนอลทั้งหมดที่คำนวณได้
โดยใช้กราฟมาตรฐานกรดแกลลิ (AKILLIOGLU และ Karakaya,
2010)
การกำหนดชั้นเนื้อหา avonoid
Briefl Y, สารสกัดจาก (0.5 มิลลิลิตรของการแก้ปัญหาที่ 1.6 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร-1) ถูกบ่ม
ด้วยเมทานอล (1.5 มิลลิลิตร) อลูมิเนียม คลอไรด์ (0.1 มิลลิลิตร 10%),
โพแทสเซียมอะซิเตท (0.1 มิลลิลิตร 1 M) และน้ำกลั่น (2.8 ml) ที่ห้อง
อุณหภูมิ 30 นาที จากนั้นการดูดกลืนแสงของกลุ่มตัวอย่างได้รับการบันทึกไว้ใน
415 นาโนเมตรโดย spectrophotometer (AKILLIOGLU และ Karakaya 2010)
Quercetin ถูกนำมาใช้ในการจัดทำกราฟมาตรฐาน
1, 1-diphenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH) ไล่อนุมูลอิสระ
ในปริมาณที่เท่าเทียมกันของกลุ่มตัวอย่าง (25 400 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร-1) ถูกเพิ่มเข้าไปในเมทานอล
แก้ปัญหาของ DPPH (100 ไมครอน) การดูดกลืนแสงของผสมปฏิกิริยาถูก
บันทึกไว้ที่ 517 นาโนเมตรหลังจาก 15 นาทีบ่มที่อุณหภูมิห้อง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ

สารเคมีกรดไตรคลอโรอะซิติก ( TCA ) , folin ciocalteau , 1 , 1-diphenyl-2 -
picryl hydrazyl ( dpph ) , กรดเกลือ , กรดไลโนเลอิก ferrozine
อาการเกร็งหลังแอ่น ( bha ) , quercetin , วิตามินซี , ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เพิ่มขึ้น
, , โซเดียม nitroprusside และเมทานอลเป็น
ซื้อจากบริษัทเคมีซิกม่า อัลดริช สหรัฐอเมริกา โซเดียมโพแทสเซียมอะซี
คาร์บอเนตอลูมิเนียมคลอไรด์ ( alcl3 ) โพแทสเซียมเฟอร์ริกไซนาไนด์ sulfanilamide
, N - ( 1-naphthyl )
: ลลีนไดแอม , EDTA และเฟอร์ริคคลอไรด์ ( FeCl3 ) ซื้อ
จากเมอร์ค compagny , เยอรมนี สารเคมีอื่น ๆที่ซื้อ

เกรดวิเคราะห์ หรือบริสุทธิ์ โรงงานชิ้นส่วนวัสดุ
ทางอากาศของ hyssopus angustifolius ม. Bieb . ถูกเก็บจากพื้นที่ veresk
( ละติจูดภูเขา elburz กลาง :35 ° 54 ' N ,
ลองจิจูด : 52 / 59 ' E : 1900 , ความสูงจากระดับน้ำทะเล ) อิหร่านผ่าน
ฤดูใบไม้ผลิ 2010 โรงงานรับรองที่หอพรรณไม้ของ
ภาควิชาชีววิทยาในมหาวิทยาลัยของ Markazi ( คูปอง
ตัวอย่างไม่มี 975 )

ขั้นตอนการสกัดผงพืช ( 100 กรัม ) ถูกวางไว้ใน Soxhlet Extractor สารสกัดด้วยเมทานอลและ
( 3 ลิตร ) เป็นเวลา 8 ชั่วโมงก็หายด้วย
.การกลั่นใน vacuo และกาก , เก็บไว้ในเดซิกเคเตอร์ถูกใช้สำหรับการทดลอง

ตามมา วิเคราะห์ปริมาณฟีนอลิกย่อเนื้อหา
y , 0.5 มล. ของตัวอย่าง ( 1.6 มก. แน่นอน ) คือแยก 2.5 มล.
ของ folin ciocalteau Reagent ( 0.2 N ) เป็นเวลา 5 นาที แล้ว 2.0 มิลลิลิตร
สารละลายของ โซเดียม คาร์บอเนต ( 75 มก. แน่นอน ) คือเพิ่ม
การดูดกลืนแสงของปฏิกิริยาผสมถูกวัดที่ 760 nm หลังจาก 2 ชั่วโมงของ
บ่มที่อุณหภูมิห้อง ปริมาณฟีนอลทั้งหมดถูกคำนวณโดยใช้กรดแกลลิคโค้งมาตรฐาน (

akillioglu karakaya และ , 2010 ) .
กำหนด FL avonoid ย่อเนื้อหา
y , สารสกัด ( 0.5 มิลลิลิตรของสารละลายที่ 1.6 มก. แน่นอน ) คือบ่ม
กับเมทานอล ( 1.5 ml ) , อลูมิเนียมคลอไรด์ ( 10 % 0.1 ml ) ,
โพแทสเซียม เทต ( 0.1 มิลลิลิตร1 M ) และน้ำกลั่น ( 2.8 ml ) ที่อุณหภูมิห้อง
เป็นเวลา 30 นาที จากนั้น การดูดกลืนแสงของตัวอย่างที่ถูกบันทึกไว้ nm
415 โดย Spectrophotometer ( akillioglu และ karakaya , 2010 ) .
เคอร์ถูกใช้เพื่อการเตรียมเส้นโค้งสอบเทียบ
1 , 1-diphenyl-2-picryl hydrazyl ( dpph ) เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาเท่ากับปริมาตรของตัวอย่าง ( 25-400
μกรัมแน่นอน ) เป็นสารละลายเมทานอล
dpph ( 100 μ M )ค่าผสมปฏิกิริยา
บันทึกที่ 517 nm หลังจาก 15 นาที เพาะที่อุณหภูมิห้อง