2. Materials and methods2.1. Materi

2. Materials and methods

2.1. Materials

Cartons or bottles of commercial fruit beverages (juices and drinks) were purchased from local markets. Vitamin C pharmaceutical preparations were bought in local pharmacy. Bottles of fruit juices (three for each type of juice originating from two different batches; n = 6) were stored after opening for 24 and 48 h in the cold (4–6 °C) to assess the effect of time on the concentration of DHAA. Meta-phosphoric acid and AA (min 99.7%) were purchased from Merck (Darmstadt, Germany), dl-dithiothreitol (DTT; min 99%) was from Sigma–Aldrich (Steinheim, Germany). Deionized-doubly distilled water was filtered through a 0.45 μm filter for HPLC (Millipore, Bedford, MA, USA). Methanol (Chempur, Piekary Śląskie, Polska) was HPLC grade. All other chemicals were reagent grade.



2.2. Sample preparation

The vitamin C extraction method was adapted from Ross (1994). Beverage sample (0.5 mL) and 10% meta-phosphoric acid (0.5 mL) were mixed using a vortex (5 min) (final concentration of meta-phosphoric acid was 5%), centrifuged at 8500g for 10 min, and injected onto the HPLC or UPLC column to determine AA content ( Gliszczyńska-Świgło & Tyrakowska, 2003). Before injection onto UPLC column, the samples of fruit juices or drinks were diluted 1:50 or 1:10, respectively, using 10% meta-phosphoric acid.

The sum of AA and DHAA (vitamin C content; TAA) was determined after reduction of DHAA to AA using DTT. The juice sample (0.2 mL) and 5% DTT (0.2 mL) were mixed and diluted to 2 mL with 10% meta-phosphoric acid and injected onto HPLC or UPLC column to determine vitamin C (Gliszczyńska-Świgło et al., 2006).

Vitamin C tablets were dissolved in 25 mL 10% meta-phosphoric acid and treated as fruit beverages samples. Before injection onto HPLC or UPLC column, the samples of tablets were diluted 1:50 or 1:150, respectively, using 10% meta-phosphoric acid. Three independent extractions were carried out for all samples. The only difference between sample preparation for HPLC and UPLC was the magnitude of sample dilution before injection.

2.3. Chromatographic determination of AA

The vitamin C was determined using Waters 600 high-performance liquid chromatograph (Waters Corp., Milford, MA, USA) equipped with LiChrospher C18 (250 × 4.0 mm, 5 μm, Merck KGaA, Germany) fitted with the same guard column. A gradient of mobile phase composed of methanol (solvent A) and 5 mmol/L KH2PO4, pH 2.65 (solvent B) was used according to the following program: linear increment starting with 5–22%A in 6 min and the return to the initial conditions within the next 9 min with the flow rate of 0.8 mL/min. The eluate was detected using a Waters 996 photodiode array detector set at 245 nm (Gliszczyńska-Świgło et al., 2006). The injection volume was 20 μL.

UPLC determination of vitamin C was done using Acquity™ ultra high performance liquid chromatograph equipped with ACQUITY UPLC BEH C18 (100 × 2.1 mm; 1.7 μm; Waters, Milford, MA, USA) fitted with guard column. A gradient of mobile phase composed of methanol (solvent A) and 5 mmol/L KH2PO4, pH 2.65 (solvent B) was used according to the following program: linear increment starting with 5–15%A in 1 min, from 15% to 35% for the next 1 min and the return to the initial conditions within the next 4 min with the flow rate of 0.2 mL/min. The eluate was detected using a Waters Acquity™ photodiode array detector set at 245 nm. The injection volume was 5 μL.

AA was identified by comparing its retention time and ultraviolet spectrum with that of the AA standard. UV-spectrum was also used to confirm the purity of AA separated from other possible compounds present in extract. Quantification of AA or vitamin C (as the sum of AA and DHAA) was done using the external standard method with AA as a standard. For each extract, at least two injections were made.

The content of DHAA was determined indirectly by subtraction of AA from TAA.

2.4. Method validation

Validation of HPLC and UPLC methods included linearity, instrument precision and sensitivity. Quantification of AA was performed using an external standard method. The eight-point (25–300 μg/mL for HPLC and 5–50 μg/mL for UPLC) calibration curves (n = 4; generated during a 6-month period) were prepared with the standard solutions of AA in 10% meta-phosphoric acid at concentrations spanning those present in samples.

Instrument precision was checked from six consecutive injections of fruit juice and vitamin C tablet extracts prepared as described in Section 2.2.

The LOD and LOQ were calculated from the calibration curve at concentrations from 0.1 to 3 μg/mL (HPLC) or 0.05–3 μg/mL (UPLC). The following equation was used:


LOD=3.3×σbLOQ=10×σb,
where σ is the standard deviation of y-intercepts and b is the slope of the calibration curve.

The efficiency of the extraction method was determined by spiking samples at two concentration levels of AA (50% and 100% of the AA level in the product). Spiked and unspiked samples were treated in the same way throughout the whole procedure. Three independent extractions were carried out for each product and AA level. Each sample was injected onto the HPLC or UPLC columns twice.

2.5. Statistical analysis

Statistical analyses were performed using the Statistica 9.0 (StatSoft, Inc., 2000) program. Results on the effect of storage time on the AA and TAA concentrations in juice samples were assessed using ANOVA. Differences between fresh and stored samples were evaluated by the Dunnett’s test. The differences between HPLC and UPLC results as well as between AA and TAA concentrations in stored fruit beverages were evaluated by the Student’s t test. The differences at 5% level were considered as significant.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 วัสดุกล่องหรือขวดเครื่องดื่มผลไม้ในเชิงพาณิชย์ (น้ำผลไม้และเครื่องดื่ม) ที่ถูกซื้อมาจากตลาดในประเทศ วิตามินซีเตรียมยาถูกซื้อในร้านขายยาท้องถิ่น ขวดน้ำผลไม้ (สามสำหรับแต่ละชนิดของน้ำผลไม้ที่มีต้นกำเนิดจากสองสำหรับกระบวนการที่แตกต่างกัน n = 6) ได้รับการจัดเก็บไว้หลังจากที่เปิดตลอด 24 ชั่วโมงและ 48 ในเย็น (4-6 ° C) เพื่อประเมินผลกระทบของเวลาในความเข้มข้นของ DHAA กรดฟอสฟ Meta-และ AA (นาที 99.7%) ที่ซื้อมาจากเมอร์ (Darmstadt, Germany), DL-dithiothreitol (DTT; นาที 99%) มาจาก Sigma-Aldrich (Steinheim, เยอรมนี) กลั่นปราศจากไอออน-ทวีคูณน้ำกรองผ่านตัวกรองไมครอน 0.45 สำหรับ HPLC (คฟอร์ด, MA, USA) เมทานอล (Chempur, Piekary Śląskie, Polska) เป็นเกรด HPLC สารเคมีอื่น ๆ ทั้งหมดเป็นเกรดน้ำยา. 2.2 ตัวอย่างการจัดทำวิธีการสกัดวิตามินซีได้รับการดัดแปลงมาจากรอสส์ (1994) ตัวอย่างดื่ม (0.5 มิลลิลิตร) และกรดฟอสฟเมตา 10% (0.5 มิลลิลิตร) ถูกผสมโดยใช้น้ำวน (5 นาที) (ความเข้มข้นสุดท้ายของกรดฟอสฟเมตาได้รับ 5%), หมุนเหวี่ยงที่ 8500g เป็นเวลา 10 นาทีและฉีดลงบน หรือคอลัมน์ HPLC UPLC เพื่อตรวจสอบเนื้อหา AA (Gliszczyńska-Świgłoและ Tyrakowska 2003) ก่อนที่จะฉีดลงบนคอลัมน์ UPLC ตัวอย่างของน้ำผลไม้หรือเครื่องดื่มที่ถูกปรับลด 01:50 หรือ 01:10 ตามลำดับโดยใช้ 10% กรดฟอสฟเมตา. ผลรวมของ AA และ DHAA (วิตามิน C เนื้อหา; TAA) ถูกกำหนดหลังจากที่ลดลง ของ DHAA จะ AA ใช้ DTT ตัวอย่างน้ำผลไม้ (0.2 มิลลิลิตร) และ 5% DTT (0.2 มิลลิลิตร) ถูกผสมและลดลงเหลือ 2 มิลลิลิตรกับกรดฟอสฟเมตา 10% และฉีดลงบน HPLC หรือคอลัมน์ UPLC เพื่อตรวจสอบวิตามินซี (Gliszczyńska-Świgło et al., 2006) . วิตามินซีแท็บเล็ตถูกกลืนหายไปใน 25 มิลลิลิตร 10% กรดฟอสฟเมตาและถือว่าเป็นตัวอย่างเครื่องดื่มผลไม้ ก่อนที่จะฉีดลงบน HPLC หรือคอลัมน์ UPLC ตัวอย่างของแท็บเล็ตที่ถูกเจือจาง 1:50 หรือ 1: 150 ตามลำดับโดยใช้ 10% กรดฟอสฟเมตา สามสกัดอิสระได้ดำเนินการสำหรับกลุ่มตัวอย่างทั้งหมด ข้อแตกต่างระหว่างการเตรียมตัวสำหรับ HPLC และ UPLC เป็นความสำคัญของการเจือจางตัวอย่างก่อนที่จะฉีด. 2.3 ความมุ่งมั่นของโครเอเอวิตามินซีได้รับการพิจารณาโดยใช้น้ำ 600 มีประสิทธิภาพสูง chromatograph เหลว (วอเตอร์คอร์ป, ฟอร์ด, MA, USA) พร้อมกับ LiChrospher C18 (250 × 4.0 มม 5 ไมครอนเมอร์คเคจีเอเอ, เยอรมนี) ติดตั้งเดียวกัน คอลัมน์ยาม การไล่ระดับสีของเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยเมทานอล (ตัวทำละลาย) และ 5 มิลลิโมล / ลิตร KH2PO4 ค่า pH 2.65 (ตัวทำละลาย B) ถูกนำมาใช้ตามโปรแกรมต่อไปนี้: เพิ่มเชิงเส้นที่เริ่มต้นด้วย 5-22% ใน 6 นาทีและกลับไปที่ เงื่อนไขเริ่มต้นในอีก 9 นาทีมีอัตราการไหล 0.8 มิลลิลิตร / นาที eluate ถูกตรวจพบโดยใช้น้ำ 996 เครื่องตรวจจับอาร์เรย์โฟโตไดโอดตั้งไว้ที่ 245 นาโนเมตร (Gliszczyńska-Świgło et al., 2006) ปริมาณการฉีด 20 ไมโครลิตร. UPLC ความมุ่งมั่นของวิตามินซีที่ได้กระทำโดยใช้ Acquity ™พิเศษ chromatograph ของเหลวสมรรถนะสูงพร้อมกับ Acquity UPLC BEH C18 (100 × 2.1 มม 1.7 ไมครอน; Waters, ฟอร์ด, MA, USA) พอดีกับคอลัมน์ยาม การไล่ระดับสีของเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยเมทานอล (ตัวทำละลาย) และ 5 มิลลิโมล / ลิตร KH2PO4 ค่า pH 2.65 (ตัวทำละลาย B) ถูกนำมาใช้ตามโปรแกรมต่อไปนี้: เพิ่มเชิงเส้นที่เริ่มต้นด้วย 5-15% ใน 1 นาทีจาก 15% ถึง 35% ต่อไปอีก 1 นาทีและกลับไปสู่เงื่อนไขเริ่มต้นในอีก 4 นาทีมีอัตราการไหล 0.2 มิลลิลิตร / นาที eluate ถูกตรวจพบโดยใช้โฟโตไดโอดน้ำ Acquity ™เครื่องตรวจจับอาร์เรย์ชุดที่ 245 นาโนเมตร ปริมาณการฉีด 5 ไมโครลิตร. AA ถูกระบุโดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาและสเปกตรัมรังสีอัลตราไวโอเลตที่มีมาตรฐานของเอเอ รังสียูวีสเปกตรัมยังถูกใช้ในการยืนยันความบริสุทธิ์ของ AA แยกออกจากสารที่เป็นไปได้อื่น ๆ ที่อยู่ในสารสกัดจาก ปริมาณของเอเอหรือวิตามินซี (เป็นผลรวมของ AA และ DHAA) ที่ได้กระทำโดยใช้วิธีการมาตรฐานภายนอกที่มี AA เป็นมาตรฐาน สำหรับสารสกัดแต่ละอย่างน้อยสองฉีดได้ทำ. เนื้อหาของ DHAA ถูกกำหนดโดยอ้อมโดยการลบของ AA จาก TAA. 2.4 วิธีการตรวจสอบการตรวจสอบของ HPLC และวิธีการ UPLC รวมเชิงเส้นที่มีความแม่นยำและความไวเครื่องมือ ปริมาณของเอเอได้รับการดำเนินการโดยใช้วิธีการมาตรฐานภายนอก แปดจุด (25-300 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรสำหรับ HPLC และ 5-50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรสำหรับ UPLC) เส้นโค้งการสอบเทียบ (n = 4; สร้างขึ้นในระหว่างงวด 6 เดือน) ได้รับการจัดทำขึ้นด้วยการแก้ปัญหามาตรฐานของเอเอใน 10% เมตา กรด -phosphoric ที่ความเข้มข้นซึ่งประกอบไปด้วยผู้ที่อยู่ในกลุ่มตัวอย่าง. ตราสารที่มีความแม่นยำถูกตรวจสอบจากหกติดต่อกันฉีดน้ำผลไม้และสารสกัดจากวิตามินซีแท็บเล็ตที่เตรียมไว้ตามที่อธิบายไว้ในมาตรา 2.2. LOD และ LOQ จะถูกคำนวณจากกราฟมาตรฐานที่ระดับความเข้มข้น 0.1-3 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร (HPLC) หรือ 0.05-3 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร (UPLC) สมการต่อไปที่ใช้: LOD = 3.3 ×σbLOQ = 10 ×σb, ที่σคือเบี่ยงเบนมาตรฐานของดัก-Y และ B คือความชันของเส้นโค้งการสอบเทียบ. ประสิทธิภาพของวิธีการสกัดถูกกำหนดโดยตัวอย่างองศาที่สองความเข้มข้น ระดับ AA (50% และ 100% ของระดับ AA ในผลิตภัณฑ์) ถูกแทงและตัวอย่าง unspiked ได้รับการปฏิบัติในทางเดียวกันตลอดขั้นตอนทั้งหมด สามสกัดอิสระได้ดำเนินการสำหรับแต่ละผลิตภัณฑ์และระดับ AA แต่ละตัวอย่างถูกฉีดลงบน HPLC หรือคอลัมน์ UPLC ครั้งที่สอง. 2.5 การวิเคราะห์ทางสถิติการวิเคราะห์ทางสถิติได้ดำเนินการโดยใช้ Statistica 9.0 (StatSoft, Inc, 2000) โปรแกรม ผลเกี่ยวกับผลกระทบของการเก็บรักษาใน AA และความเข้มข้นของ TAA ในตัวอย่างน้ำผลไม้ได้รับการประเมินโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวน ความแตกต่างระหว่างกลุ่มตัวอย่างสดและเก็บไว้ได้รับการประเมินโดยการทดสอบของ Dunnett ความแตกต่างระหว่าง HPLC และ UPLC ผลเช่นเดียวกับระหว่าง AA และความเข้มข้นของ TAA เก็บไว้ในเครื่องดื่มผลไม้ที่ได้รับการประเมินโดยการทดสอบทีนักศึกษา ความแตกต่างในระดับ 5% ได้รับการพิจารณาเป็นอย่างมีนัยสำคัญ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ

2.1 . วัสดุ

กล่องหรือขวดของการค้าผลไม้เครื่องดื่ม ( น้ำและเครื่องดื่ม ) ซื้อจากตลาดท้องถิ่น วิตามิน ซี เตรียมยาถูกซื้อในร้านขายยาท้องถิ่น ขวดน้ำผลไม้ ( สามสำหรับแต่ละชนิดของน้ำผลไม้ที่มาจากทั้งสองกลุ่มแตกต่างกันN = 6 ) ถูกเก็บไว้หลังจากเปิด 24 และ 48 ชั่วโมงในที่เย็น ( 4 – 6 ° C ) เพื่อศึกษาผลของเวลาที่ความเข้มข้นของ dhaa . เมตา กรดฟอสฟอริค และ AA ( มิน 99.7% ) ซื้อจากเมอร์ค ( ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) , DL บัตรแข็ง ( DTT ; มิน 99% ) คือจาก Sigma –ดิช ( steinheim , เยอรมัน ) คล้ายเนื้อเยื่อประสานทวีคูณกลั่นน้ำกรองผ่านตัวกรองสูง 0.45 μ M ( มิลลิ เบดฟอร์ดMA , USA ) เมทานอล ( chempur piekary Śผมą skie , แน่นแฟ้น , ) เป็นปีที่ 2 . สารเคมีอื่น ๆทั้งหมดเป็นเกรด 3 .



. . ตัวอย่างการเตรียม

วิตามิน C วิธีสกัดถูกดัดแปลงจาก Ross ( 1994 ) ตัวอย่างเครื่องดื่ม ( 0.5 มิลลิลิตร ) และ 10% meta กรดฟอสฟอริก ( 0.5 มิลลิลิตรผสมโดยใช้น้ำวน ( 5 นาที ) ( ความเข้มข้นสุดท้ายของเมตา กรดฟอสฟอริค ร้อยละ 5 ) , ระดับที่ 8500g เป็นเวลา 10 นาทีและก็ฉีดลงบนคอลัมน์ HPLC หรือ uplc ว่า AA เนื้อหา ( gliszczy ńสกา - Śวิกł O & tyrakowska , 2003 ) ก่อนฉีดลงในคอลัมน์ uplc ตัวอย่างของผลไม้หรือเครื่องดื่มลด 10 50 ตามลำดับ โดยใช้ 10% meta กรดฟอสฟอริก

ผลรวมของ AA และ dhaa ( วิตามินซี ; โคมไฟ ) คือการพิจารณาหลังจากการลด dhaa AA ใช้ 20 . น้ำตัวอย่าง ( 02 มล. ) และ 5 % 20 ( 0.2 มิลลิลิตรผสมและเจือจาง 2 ml กับ 10% เมตา กรดฟอสฟอริค และก็ฉีดลงบน uplc คอลัมน์ HPLC หรือหาวิตามิน C ( gliszczy ńสกา - Śวิกł o et al . , 2006 ) .

วิตามินซีเม็ดละลายใน 25 มล. 10 % เมตา กรดฟอสฟอริค และถือว่าเป็น ผลไม้ เครื่องดื่ม ตัวอย่าง ก่อนฉีดลงบนคอลัมน์ HPLC หรือ uplc ตัวอย่างของยาเม็ดลดหรือ 1:150 50 ,ตามลำดับ การใช้ 10% meta กรดฟอสฟอริก สามทีมอิสระ พบว่าตัวอย่างทั้งหมด ข้อแตกต่างระหว่างการเตรียมตัวอย่างสำหรับ HPLC คือขนาดของตัวอย่าง และ uplc เจือจางก่อนฉีด

2.3 ความมุ่งมั่นและ AA

วิตามิน C ถูกกำหนดโดยใช้โครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( น้ำน้ำ 600 มิลฟอร์ด , MA , คอร์ปสหรัฐอเมริกา ) พร้อมกับ lichrospher c18 ( 250 × 4.0 มม. , 5 μ M กระตุ้นการท เยอรมนี ) ติดตั้งกับคอลัมน์ที่ยามเดียวกัน การไล่ระดับของเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยเมทานอล ( ตัวทำละลาย ) และ 5 มิลลิโมล / ลิตร kh2po4 pH 2.65 ( ตัวทำละลาย B ) ถูกใช้ตามโปรแกรมต่อไปนี้ : เชิงเส้นการเริ่มต้นด้วย 5 – 22 % ใน 6 นาที และกลับสู่สภาวะเริ่มแรกภายใน 9 นาที อัตราการไหลของ 08 มล. / นาที ในสารละลาย ( eluate ) ถูกตรวจพบการใช้น้ำภายในเครื่องตรวจจับไว้ที่เรย์วิ่ง 245 nm ( gliszczy ńสกา - Śวิกł o et al . , 2006 ) ปริมาณการฉีด จำนวน 20 uplc μ L .

หาวิตามินซี โดยใช้ acquity ™ประสิทธิภาพสูง Ultra ของเหลวโครมาโตกราฟพร้อมกับ acquity uplc beh c18 ( 100 × 2.1 มม. ; μ 1.7 เมตร น้ำที่ Milford , MA , USA ) ติดตั้งกับคอลัมน์ ยามการไล่ระดับของเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยเมทานอล ( ตัวทำละลาย ) และ 5 มิลลิโมล / ลิตร kh2po4 pH 2.65 ( ตัวทำละลาย B ) ถูกใช้ตามโปรแกรมดังต่อไปนี้ : เพิ่มเส้นเริ่มต้นด้วย 5 – 15 % ใน 1 นาที จาก 15% เป็น 35% ในอีก 1 นาที และกลับสู่สภาพเริ่มต้น ภายใน 4 นาทีด้วยอัตราการไหล 2 มล. / นาทีในสารละลาย ( eluate ) ถูกตรวจพบการใช้น้ำ acquity ™โฟโตไดโอดเรย์ตรวจจับไว้ที่ 245 nm . ปริมาณการฉีด 5 μ L .

ถูกระบุโดยการเปรียบเทียบเวลาของการเก็บรักษาและสเปกตรัมรังสีอัลตราไวโอเลตที่มีมาตรฐาน AA สเปกตรัมรังสียูวีก็ยังใช้เพื่อยืนยันความบริสุทธิ์ของ AA แยกจากสารประกอบที่เป็นไปได้อื่น ๆปัจจุบัน สารสกัดปริมาณของ AA หรือวิตามิน C ( เช่นผลรวมของ AA และ dhaa ) โดยใช้วิธีมาตรฐานภายนอกกับ AA เป็นมาตรฐาน ในแต่ละแยก อย่างน้อยสองฉีดได้

เนื้อหาของ dhaa ถูกกำหนดโดยอ้อมโดยการลบ AA จากทา

2.4 . วิธีการตรวจสอบความถูกต้องของวิธี HPLC uplc

และวิธีรวมเป็นเส้นตรง , เครื่องมือความแม่นยำและความไวปริมาณของ AA ได้ใช้วิธีมาตรฐานภายนอก แปดจุด ( 25 – 300 μ g / ml สำหรับ HPLC และ 5 – 50 μ g / ml uplc ) เส้นโค้งสอบเทียบ ( n = 4 ; สร้างขึ้นในระหว่าง 6 เดือน ) ถูกเตรียมโซลูชั่นมาตรฐาน AA ในกรดฟอสฟอริค ที่ความเข้มข้น 10% meta ซึ่งปัจจุบัน

ในตัวอย่างเครื่องมือตรวจสอบความเที่ยงตรงจากหกฉีดติดต่อกันของผลไม้และวิตามินซี ชนิดเม็ด สารสกัดที่เตรียมไว้ในมาตรา 2.2 .

LOD loq คำนวณจากการสอบเทียบและเส้นโค้งที่ความเข้มข้นจาก 0.1 ถึง 3 μ g / ml ( HPLC ) หรือ 0.05 ( 3 μ g / ml ( uplc ) สมการต่อไปนี้ที่ถูกใช้ :


LOD เท่ากับ 3.3 ×σ bloq = 10 ×σ
Bที่σเป็นส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของ y-intercepts และ b คือความชันของรูปโค้ง .

ประสิทธิภาพของวิธีการสกัดถูกกำหนดโดยสองขึ้นตัวอย่างที่ระดับความเข้มข้นของ AA ( 50% และ 100% ของระดับ AA ในสินค้า ) ถูกแทงและ unspiked ตัวอย่าง ถูกกระทำในลักษณะเดียวกันตลอดทั้งกระบวนการทั้งหมดสามทีมอิสระได้ดำเนินการสำหรับแต่ละผลิตภัณฑ์และระดับ AA แต่ละตัวอย่างถูกฉีดลงบนคอลัมน์ HPLC หรือ uplc สองครั้ง

2.5 สถิติวิเคราะห์

การวิเคราะห์สถิติการใช้ statistica 9.0 StatSoft , Inc . , 2000 ) โปรแกรม ผลผลของระยะเวลาในการเก็บ AA และความเข้มข้น ทาในตัวอย่างน้ำมีการประเมินโดยใช้การวิเคราะห์ ความแปรปรวนทางเดียวความแตกต่างระหว่างตัวอย่างสด และจัดเก็บ ได้แก่ การทดสอบของ Dunnett . ความแตกต่างระหว่างผลและ HPLC uplc รวมทั้งระหว่าง AA และทาในความเข้มข้นที่เก็บผลไม้เครื่องดื่ม ได้แก่ การทดสอบ t ของนักเรียน ความแตกต่างที่ระดับ 5% ถือว่าเป็นสำคัญ