Chromosomal DNA extraction was carr

Chromosomal DNA extraction was carried out using an isolation
kit (Fermentas, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). Primers
Hdc3F (50AGATGGTATTGTTTCTTATGA30) and Hdc4R (50CAAACACCA
GCATCTTC30) were designed for amplification of a 435 bp length
part of hdc gene (Coton & Coton, 2005). Oligonucleotides were obtained
fromIontek (Istanbul, Turkey). PCR was done in 40 lL ofmixture
by using Fermentas DNA polymerase, 5 U/lL, and 10 PCR
buffer (Amersham, Little Chalfont, UK). Twenty picomoles of each
primer were used, and deoxynucleoside triphosphates (dNTPs) (Fermentas)
were used at a concentration of 250 lM each. The genomic
DNA of S. thermophilus isolates was used as a template. PCR amplifications
were performed in a DNA thermal cycler with the following
thermal cycling program: initial cycle, 2 min at 95 C; next 30
cycles, 1 min at 94 C; 1 min at 65 C, and 2 min at 72 C. Amplified
PCR products were run on 1.5% electrophoresis gel (Bio-Rad, Hercules,
CA) and analysed under UV light.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สกัดดีเอ็นเอของโครโมโซมถูกดำเนินการโดยใช้การแยกชุด (Fermentas เทอร์โม Fisher วิทยาศาสตร์ Waltham, MA) ไพรเมอร์Hdc3F (50AGATGGTATTGTTTCTTATGA30) และ Hdc4R (50CAAACACCAGCATCTTC30) ถูกออกแบบสำหรับขยายความยาว bp 435ส่วนของยีน hdc (Coton & Coton, 2005) Oligonucleotides ได้รับfromIontek (อิสตันบูล ตุรกี) ทำ PCR ใน ofmixture จะ 40โดยใช้ Fermentas ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส 5 U lL และ 10 PCRบัฟเฟอร์ (Amersham ชาร์ฟอร์นเซน สหราชอาณาจักรเล็กน้อย) Picomoles 20 ของแต่ละใช้รองพื้น และ deoxynucleoside triphosphates (dNTPs) (Fermentas)ใช้ที่ความเข้มข้น 250 lM ละกัน การ genomicดีเอ็นเอของ S. thermophilus แยกถูกใช้เป็นแม่แบบ PCR amplificationsดำเนินใน cycler ร้อนเป็นดีเอ็นเอมีดังนี้โปรแกรมขี่จักรยานความร้อน: รอบแรก 2 นาทีที่ 95 C 30 ถัดไปรอบ 1 นาทีที่ 94 C 1 นาที ที่ 65 C และ 2 นาทีที่ 72 C. ขยายผลิตภัณฑ์ PCR ถูกเรียกใช้บนเจ electrophoresis 1.5% (ไบโอ-Rad เฮอร์คิวลิสCA) และ analysed ภายใต้แสง UV

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสกัดดีเอ็นเอโครโมโซมถูกนำออกมาใช้แยกชุด (Fermentas, เทอร์โมฟิชเชอร์วิทยาศาสตร์มบริดจ์)
ไพรเมอร์
Hdc3F (50AGATGGTATTGTTTCTTATGA30) และ Hdc4R (50CAAACACCA
GCATCTTC30) ได้รับการออกแบบมาสำหรับการใช้เครื่องขยายเสียงที่มีความยาว 435 bp
ส่วนหนึ่งของยีน HDC (สมอและ Coton 2005) oligonucleotides ได้รับ
fromIontek (อิสตันบูล, ตุรกี) PCR ได้ดำเนินการใน 40 จะ ofmixture
โดยใช้โพลีเมอ Fermentas ดีเอ็นเอ 5 U / LL และ 10? PCR
บัฟเฟอร์ (Amersham เล็ก ๆ น้อย ๆ Chalfont สหราชอาณาจักร) ยี่สิบ picomoles
ของแต่ละไพรเมอร์ถูกนำมาใช้และtriphosphates deoxynucleoside (dNTPs) (Fermentas)
ถูกนำมาใช้ที่ความเข้มข้น 250 LM แต่ละ จีโนมดีเอ็นเอของเชื้อ S. thermophilus ถูกนำมาใช้เป็นแม่แบบ
เครื่องขยายเสียง PCR
ได้ดำเนินการในการระบายความร้อน Cycler
ดีเอ็นเอมีดังต่อไปโปรแกรมความร้อน: วงจรครั้งแรก 2 นาทีที่ 95 C; ต่อไป 30
รอบ 1 นาทีที่ 94 องศาเซลเซียส; 1 นาทีที่ 65 องศาเซลเซียสและ 2 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียส ขยายผลิตภัณฑ์ PCR วิ่งบน 1.5% เจลอิเล็ก (Bio-Rad ดาว, CA) และวิเคราะห์ภายใต้แสงยูวี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดดีเอ็นเอของโครโมโซมที่ถูกนำออกมาใช้แยก
Kit ( fermentas , เทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ ทัม มา ) ไพรเมอร์
hdc3f ( 50agatggtattgtttcttatga30 ) และ hdc4r ( 50caaacacca
gcatcttc30 ) ถูกออกแบบมาสำหรับการนำมาใช้เป็น 435 ความยาว
BP ส่วนหนึ่งของยีน HDC ( T T & , 2005 ) โอลิโกนิวคลีโอไทด์ได้
fromiontek ( อิสตันบูล , ตุรกี ) PCR ได้ 40 จะ ofmixture
โดยใช้ fermentas DNA polymerase 5 U / ll และ 10
 ( บัฟเฟอร์ ) ที่น้อย , ริดสีดวงทวาร , UK ) ยี่สิบ picomoles แต่ละ
รองพื้นที่ใช้ และ deoxynucleoside ไตรฟ เฟต ( dntps ) ( fermentas )
) ใช้ที่ความเข้มข้น 250 โดยแต่ละ ดีเอ็นเอจีโนมของเชื้อ S .
สีที่ได้จากธรรมชาติมาใช้เป็นแม่แบบ PCR amplifications
มีการปฏิบัติในดีเอ็นเอวงจรความร้อนกับต่อไปนี้
โปรแกรมการขี่จักรยานการระบายความร้อน : รอบแรก 2 นาทีที่ 95  C ; ถัดไป 30
รอบ 1 นาทีที่ 94  c ; 1 นาทีที่ 65  C และ 2 นาทีที่ 72  C .
) ของผลิตภัณฑ์ใช้ 1.5% electrophoresis เจล ( ไบโอ ราด , Hercules ,
CA ) และวิเคราะห์ภายใต้แสง ยูวี