Enzyme activity analysisThe liver a

Enzyme activity analysis
The liver and retroperitoneal fat pads were homogenized in
0.25 M sucrose/Tris-HCl (0.01 M, pH 8) with a homogenizer
(OMNI-INC, Marietta, USA), as described previously [30]. The
homogenates were centrifuged at 40,000 × g for 10 min, and the
supernatants were used to analyze enzyme activity. The assay
medium for malic enzyme (ME) consisted of 100 mM Tris buffer
(pH 7.4), 100 μL of 100 mM sodium malate, 50 μL of 20 mM,
NADP+, and 0.75 mL of 20 mM MnCl2. The final volume of
the assay mixtures was 3 mL in all cases. Enzyme activity was
evaluated according to the increase in NADPH produced by the
reaction catalyzed by malic enzyme [30]. The protein content
of tissues was quantified by the SMART BCA Protein Assay
Kit (21071; Intronbio, Korea)
Catalase activity was analyzed spectrophotometrically as
described by Beers and Sizer [31]. The liver and kidney (0.4
g each) were homogenized with 1.6 mL of 50 mM phosphate
buffer (pH 7.0). The homogenates were centrifuged at 10,000
rpm for 30 min, and then 2 mL of the supernatant was allowed
to react with 1 mL of 30% hydrogen peroxide (H2O2). The
decrease of 30% H2O2 in the presence of tissue homogenate was
measured at 240 nm after 2 min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์
ตับและแผ่นไขมัน retroperitoneal ถูกหดหายใน
ซูโครส 0.25 เมตร / tris-HCL (0.01 ม. , ph 8) กับโฮโมจีไน
(รอบ Inc, รีเอตตา, USA) ที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [30] homogenates
ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 40,000 × g เป็นเวลา 10 นาทีและ supernatants
ถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์ ทดสอบ
สื่อกลางในการเอนไซม์มาลิก (ฉัน) ประกอบ 100 มม. tris buffer
(pH 7.4)100 ไมโครลิตรของโซเดียม 100 มม. Malate, 50 ไมโครลิตรของ 20 มม. ,
NADP และ 0.75 มล. ของ 20 มม. MnCl2 เล่มสุดท้ายของ
ผสมทดสอบเป็น 3 มล. ในทุกกรณี เอนไซม์เป็น
ประเมินตามการเพิ่มขึ้นของ NADPH ที่ผลิตโดยปฏิกิริยา
ที่เร่งปฏิกิริยาด้วยเอนไซม์ลิก [30]
ปริมาณโปรตีนของเนื้อเยื่อถูกปริมาณโดยสมาร์ททดสอบโปรตีน BCA
Kit (21,071; intronbio เกาหลี)
catalase กิจกรรมได้รับการวิเคราะห์ spectrophotometrically เป็น
อธิบายโดยเบียร์และ Sizer [31] ตับและไต (0.4
กรัม) มีหดหายกับ 1.6 ml ของ 50 มม. ฟอสเฟตบัฟเฟอร์
(pH 7.0) homogenates ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาที
เป็นเวลา 30 นาทีและจากนั้น 2 มิลลิลิตรใสที่ได้รับอนุญาตให้
ปฏิกิริยากับ 1 มล. ของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ 30% (H2O2)
ลดลงจาก 30% H2O2 ในการปรากฏตัวของเนื้อเยื่อบดเป็น
วัดที่ 240 นาโนเมตรหลังจาก 2 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์
แผ่นไขมันตับ และ retroperitoneal ถูก homogenized ใน
0.25 M ซูโครส/ตรี-HCl (0.01 M ค่า pH 8) ด้วย homogenizer การ
(ออม-INC นมารีเอต สหรัฐอเมริกา), ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [30] ใน
homogenates ถูก centrifuged ที่ 40000 × g สำหรับ 10 นาที และ
supernatants ใช้ในการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์ การทดสอบ
ปานกลางสำหรับเอนไซม์ malic (ME) ประกอบด้วยทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์
(pH 7.4), 100 มม. ΜL 100 ของมาลาโซเดียม 100 มม. μL 50 มม. 20,
NADP และมล 0.75 มม. 20 MnCl2 ปริมาตรสุดท้ายของ
น้ำยาผสมทดสอบเป็น 3 mL ในทุกกรณี เอนไซม์ถูก
ประเมินตามเพิ่มผลิตโดย NADPH
ปฏิกิริยา catalyzed โดยเอนไซม์ malic [30] โปรตีน
ของเนื้อเยื่อถูก quantified โดยวิเคราะห์โปรตีน BCA สมาร์ท
ชุด (21071 Intronbio เกาหลี)
กิจกรรม catalase ถูกวิเคราะห์ spectrophotometrically เป็น
โดยเบียร์และคัดขนาดผลชมพู่ [31] ตับและไต (0.4
g ละ) ถูก homogenized กับ 1.6 mL ของฟอสเฟต 50 mM
บัฟเฟอร์ (pH 7.0) Homogenates ถูก centrifuged 10, 000
rpm สำหรับ 30 นาที 2 mL ของ supernatant ได้รับอนุญาต
การตอบสนองกับ mL 1 ของ 30% ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H2O2) ใน
ลด 30% H2O2 ในต่อหน้าของเนื้อเยื่อ homogenate ถูก
วัดที่ 240 nm หลังจาก 2 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การทำงานของเอนไซม์การวิเคราะห์
และตับ retroperitoneal ไขมันแผ่นก็สดพร่องมันเนยเป็นใน
0.25 ม.ซูโครส/ทริสเรทติ้ง - HCL /( 0.01 ม., pH 8 )พร้อมด้วย homogenizer
(แบบ Inc , Marietta ,สหรัฐอเมริกา),เช่นที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้[ 30 ]
homogenates ได้ centrifuged ที่ G 40 , 000 ×สำหรับ 10 นาทีและ
supernatants ได้ถูกใช้เพื่อวิเคราะห์การทำงานของเอนไซม์ สอบ
ขนาดกลางสำหรับเอนไซม์ malic ( ME )ประกอบด้วย 100 มม.ผลิตไฟฟ้าราชบุรีโฮลดิ้งจำกัดบัฟเฟอร์
( PH 7.4 )100 μl ของ 100 ไปยัง Malate μl ( 50 มม. 20 มม.
nadp และ 0.75 มล. mncl 220 มม. ระดับเสียงครั้งสุดท้ายของส่วนผสมสอบ
ซึ่งจะช่วยได้ 3 มล.ในทุกกรณี การทำงานของเอนไซม์มี
ซึ่งจะช่วยประเมินผลตามการเพิ่มขึ้นใน nadph
ซึ่งจะช่วยผลิตโดยสารเร่งปฏิกิริยาโดยเอนไซม์ malic [ 30 ] เนื้อหาโปรตีนของเนื้อเยื่อที่
ซึ่งจะช่วยได้คำนวณออกมาเป็นรูปธรรมได้หรือโดย/ span >โปรตีนชุดสอบ
อัจฉริยะ( 21071 intronbio เกาหลีใต้)
กิจกรรม catalase ก็วิเคราะห์ spectrophotometrically เป็น
อธิบายโดยเบียร์และ sizer [ 31 ] ตับและไต( 0.4
กรัม)เป็นสดพร่องมันเนยเป็นด้วย 1.6 มล. 50 มม.ฟอสเฟต
Buffer ( PH 7.0 ) homogenates อยู่ที่ 10 , 000 centrifuged
รอบต่อนาทีสำหรับ 30 นาทีแล้ว 2 มล.ของ supernatant ที่ได้รับอนุญาตให้
ซึ่งจะช่วยในการตอบสนองพร้อมด้วย 1 มล. 30% ไฮโดร( H 2 O 2 ) ที่
ตามมาตรฐานลดลง 30% H 2 O 2 ในการมีอยู่ของเนื้อเยื่อ homogenate
ซึ่งจะช่วยเป็นวัดที่ 240 nm หลังจากนั้น 2 นาที