The commercialization of molecular

The commercialization of molecular pharming began with efforts to show that plants can be used
to manufacture products that are identical to those produced in mammalian cells. This approach
was straightforward for proteins (such as insulin) that are composed entirely of polypeptides but
more difficult for glycoproteins owing to the differences between the glycan structures of plants
and animals.The mechanism ofN-glycosylation in plants and mammals is similar until the nascent
N-glycan reaches the Golgi apparatus, whereupon it undergoes species-dependent modifications
such as the addition of β(1,2)-linked xylose and core α(1,3)-linked fucose residues in plants and
the addition of β(1,4)-linked galactose and sialic acid residues in mammals (33).
Glycosylation affects the quality of recombinant proteins because different glycan structures
can potentially influence glycoprotein stability, subcellular targeting, immunogenicity,
pharmacokinetic behavior, and biological activity. Therefore, the precise control of glycan modification to manufacture homogeneous drugs with highly specific, bespoke glycoforms that
confer superior efficacy has become an important topic for the optimization of all production
platforms, including mammalian cells (22, 95, 136). In plants, two major strategies have been
developed to control the glycosylation of recombinant proteins: subcellular targeting to prevent
the addition of undesirable sugar residues (40, 48, 106) and glycoengineering to prevent the
addition of plant glycans and even replace them with human-like counterparts (5).
Targeting is arguably the most straightforward approach because it can be controlled at the
level of the transgene construct by adding particular protein tags (see sidebar Protein Targeting
in Molecular Pharming along with Figure 1). Targeting recombinant proteins to the endoplasmic
reticulum using the tetrapeptide tag KDEL and similar derivatives prevents the addition of
complex-type glycan structures by avoiding the Golgi apparatus, thus ensuring that all proteins are
expressed with high-mannose glycans common to all eukaryotes. Another key example of glycan
control through targeting is directing proteins to the vacuole, a strategy that Protalix Biotherapeutics
uses for the production of taliglucerase alfa. The protein is manufactured in carrot cells and is
targeted to the vacuole because the resultingmannose-tipped paucimannosidicN-glycans promote
interactions with macrophages. When the enzyme is produced in mammalian cells, the glycans
have terminal sialic acid residues that prevent uptake by macrophages, so they need to be trimmed
enzymatically in vitro, which adds to the processing costs. The β(1,2)-linked xylose and core
α(1,3)-linked fucose residues also present on taliglucerase alfa do not appear to cause any safety problems in patients even after repeated administration (34). The formation of glycan structures
with terminal mannose residues allows recombinant proteins to target mannose-specific surface
receptors on macrophages (6) and in products where an increased clearance rate from the blood
is desirable (49). The lack of sialylation is also an advantage for the production of plant-derived
asialoerythropoietin (78).
Glycoengineering has been achieved through a variety of approaches, including conventional
mutagenesis or homologous recombination to knock out genes encoding unwanted glycosyltransferases,
RNA interference to suppress the same enzymes, and transgene expression to introduce
heterologous glycosyltransferases that form human-like glycans (5). Engineering the
N-glycosylation pathway in different plant species has thus achieved the abolition of β(1,2)-linked
xylose and core α(1,3)-linked fucose residues (18, 52, 100, 109) and the complete reconstruction of
mammalian glycosylation pathways in plants (1, 9–12, 66, 76, 85, 110). The versatility of this approach
has allowed the development of product-specific designer glycoforms in plants (Figure 2).
For example, it is well established that antibody effector functions such as binding to the Fc γRIIIa
receptor are inhibited by core fucose residues [both the core α(1,3)-linked fucose residues found
in plants and the core α(1,6)-linked fucose residues found in mammals] and that the absence of
these residues promotes antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (99, 110). Consequently,
glycoengineered plants can be used to produce glyco-optimized versions of proteins that would
not be produced naturally, such as the CD20-specific antibody with improved pharmacokinetic
properties produced by Synthon using the LEX technology recently acquired from Biolex Therapeutics.
This antibody is indicated for the treatment of non-Hodgkin’s lymphoma and has a
10-fold greater affinity for its receptor and a 20-fold greater antibody-dependent, cell-mediated
cytotoxicity compared with its mammalian counterpart (30).
Plant glycan structures do not always affect the function of a recombinant protein; for example,
the HIV-neutralizing antibody 2G12 produced in plants was just as potent as counterparts
produced in mammalian cells (82, 83), and plant-derived glycoproteins do not appear to induce
adverse or allergenic responses in humans even when administered on multiple occasions (34).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Commercialization ของ pharming โมเลกุลเริ่ม มีความพยายามที่จะแสดงว่า พืชสามารถใช้การผลิตผลิตภัณฑ์ที่เหมือนกับผู้ผลิตใน mammalian เซลล์ วิธีการนี้ไม่ตรงไปตรงมาสำหรับโปรตีน (เช่นอินซูลิน) ที่ประกอบด้วยทั้งหมดของเปปไทด์ แต่ยากสำหรับ glycoproteins เนื่องจากความแตกต่างระหว่างโครงสร้างของพืช glycanและสัตว์OfN-glycosylation กลไกในพืชและการเลี้ยงลูกด้วยนมจะคล้ายกันจนถึงการก่อN glycan ถึงลจิ whereupon ผ่านการปรับเปลี่ยนขึ้นอยู่กับพันธุ์เช่นการเพิ่มของβ (1, 2) -เชื่อมโยง xylose และแกนα (1,3) - เชื่อมโยง fucose ตกค้างในพืช และการเพิ่มของβ (1,4) -เชื่อมโยงกาแล็กโทสและกรด sialic ตกในการเลี้ยงลูกด้วยนม (33)Glycosylation มีผลต่อคุณภาพของ recombinant โปรตีนเนื่องจากโครงสร้างอื่น glycanสามารถมีผลกระทบต่อความมั่นคงของไกลโคโปรตีน การกำหนดเป้าหมาย subcellular, immunogenicity อาจพฤติกรรม pharmacokinetic และกิจกรรมทางชีวภาพ ดังนั้น การควบคุมแม่นยำของแก้ไข glycan ในการผลิตยาเสพติดเป็นเนื้อเดียวกันกับ glycoforms การ จิบที่ประสาทประสิทธิภาพที่เหนือกว่าได้กลายเป็น หัวข้อสำคัญสำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพของการผลิตทั้งหมดแพลตฟอร์ม รวมไปถึงเซลล์ mammalian (22, 95, 136) ในพืช กลยุทธ์สองหลักได้พัฒนาการควบคุม glycosylation ของ recombinant โปรตีน: subcellular กำหนดเป้าหมายให้แห่งตกระวังน้ำตาล (40, 48, 106) และ glycoengineering เพื่อป้องกันการนอกจากนี้พืช glycans และแม้แทนพวกเขาคู่เหมือนมนุษย์ (5)กำหนดเป้าหมายเป็นวิธีตรงไปตรงมามากที่สุดเนื่องจากสามารถควบคุมในการระดับของโครงสร้าง transgene โดยเพิ่มแท็กเฉพาะโปรตีน (ดูแถบด้านข้างโปรตีนเป้าหมายในโมเลกุล Pharming กับรูปที่ 1) กำหนดเป้าหมาย recombinant วิลเลียมที่ endoplasmicกลุ่มดาวตาข่ายโดยใช้แท็ก tetrapeptide KDEL และอนุพันธ์คล้ายป้องกันการเพิ่มของโครงสร้างชนิดซับซ้อน glycan โดยหลีกเลี่ยงลจิ จึง มั่นใจว่า มีโปรตีนทั้งหมดแสดง ด้วยไปทั้งหมด eukaryotes glycans mannose สูง อีกตัวอย่างสำคัญของ glycanควบคุม โดยกำหนดเป้าหมายเป็นผู้กำกับวิลเลียมแวคิวโอล กลยุทธ์ที่ Protalix Biotherapeuticsใช้สำหรับการผลิตของอัลฟ่า taliglucerase โปรตีนที่ผลิตในเซลล์แครอท และมีเป้าหมายเนื่องจากการส่งเสริมที่ก้น resultingmannose paucimannosidicN-glycans แวคิวโอลโต้ตอบกับบังเอิญ เมื่อผลิตเอนไซม์นี้ใน mammalian เซลล์ glycansมีการตกค้างของกรด sialic เทอร์มินัลที่ป้องกันการดูดซับ โดยบังเอิญ ดังนั้นพวกเขาต้องถูกตัดenzymatically ในหลอด ที่ที่เพิ่มต้นทุนการประมวลผล Β (1, 2) -เชื่อมโยง xylose และหลักΑ (1,3) -เชื่อมโยง fucose ตกยังอยู่ในอัลฟา taliglucerase ไม่ ทำให้เกิดปัญหาความปลอดภัยใด ๆ ในผู้ป่วยที่แม้หลังจากจัดการซ้ำ (34) การก่อตัวของโครงสร้าง glycanกับเทอร์มินัล mannose ตก recombinant โปรตีนเป้าหมาย mannose เฉพาะพื้นผิวที่ช่วยให้receptors บนบังเอิญ (6) และ ในผลิตภัณฑ์ที่เคลียร์การเพิ่มอัตราจากเลือดถูกต้อง (49) การขาดของ sialylation เป็นการผลิตของโรงงานมาasialoerythropoietin (78)Glycoengineering ได้รับความผ่านหลากหลายวิธี รวมถึงแบบดั้งเดิมmutagenesis หรือ homologous recombination น็อกยีน glycosyltransferases ที่ไม่พึงประสงค์ การเข้ารหัสแทรกแซงอาร์เอ็นเอจะระงับเอนไซม์เดียว และ transgene นิพจน์จะแนะนำglycosyltransferases heterologous ที่ glycans เหมือนมนุษย์ (5) วิศวกรรมการทางเดิน N glycosylation ในพืชต่างชนิดจึงได้รับเลิกβ (1, 2) -เชื่อมโยงα xylose และหลัก (1,3) -เชื่อมโยง fucose ตก (18, 52, 100, 109) และฟื้นฟูเสร็จสมบูรณ์ของมนต์ mammalian glycosylation ในพืช (1, 9 – 12, 66, 76, 85, 110) ความคล่องตัวของวิธีการนี้ได้รับอนุญาตของ glycoforms ออกแบบผลิตภัณฑ์เฉพาะในพืช (รูปที่ 2)ตัวอย่าง มันดีสำเร็จ effector ที่แอนติบอดีหน้าที่เช่นผูกกับ Fc γRIIIaตัวรับจะห้าม โดยหลัก fucose ตก [ทั้งแกนα (1,3) -เชื่อมโยง fucose ตกพบในพืชและαหลัก (1,6) -เชื่อมโยง fucose ตกค้างที่พบในการเลี้ยงลูกด้วยนม] และการขาดงานของตกค้างเหล่านี้ส่งเสริมขึ้นอยู่กับแอนติบอดี mediated เซลล์ cytotoxicity (99, 110) ดังนั้นglycoengineered พืชที่สามารถใช้ในการผลิตปรับ glyco รุ่นโปรตีนที่จะไม่ได้ผลิตตามธรรมชาติ เช่นแอนติบอดี CD20 เฉพาะด้วย pharmacokinetic ปรับปรุงคุณสมบัติที่ผลิต โดยใช้เทคโนโลยีเล็กซ์ทัวร์ที่เพิ่ง มาจาก Biolex Therapeutics Synthonแอนติบอดีนี้บ่งชี้สำหรับการรักษาไม่ใช่ฮอดจ์กิน และมีการความสัมพันธ์มากกว่า 10-fold ของตัวรับและตัว 20-fold มากกว่าแอนติบอดีขึ้นอยู่กับ mediated เซลล์cytotoxicity เปรียบเทียบกับสำเนาของ mammalian (30)โครงสร้างพืช glycan เสมอมีผลต่อการทำงานของโปรตีน recombinant ตัวอย่างที่เอชไอวี neutralizing แอนติบอดี 2G 12 ผลิตในพืชไม่เพียงมีศักยภาพเป็นคู่ผลิตใน mammalian เซลล์ (82, 83), และ glycoproteins มาโรงงานไม่ ก่อให้เกิดร้าย หรือแพ้ผลการตอบรับในมนุษย์แม้ว่าจัดการในหลายโอกาส (34)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การค้าของฟาร์มมิ่งโมเลกุลเริ่มต้นด้วยความพยายามที่จะแสดงให้เห็นว่าพืชสามารถนำมาใช้
ในการผลิตสินค้าที่เหมือนกันกับผู้ผลิตในเซลล์สัตว์ วิธีการนี้จะ
ตรงไปตรงมาสำหรับโปรตีน (เช่นอินซูลิน) ซึ่งประกอบด้วยทั้งหมดของ polypeptides แต่
ยากมากขึ้นสำหรับไกลโคโปรตีนเนื่องจากความแตกต่างระหว่างโครงสร้างไกลแคนของพืช
และกลไก animals.The ofn-glycosylation ในพืชและเลี้ยงลูกด้วยนมจะคล้ายจนตั้งไข่
ไม่มี -glycan ถึงกอลไจอุปกรณ์ครั้นแล้วมันผ่านการปรับเปลี่ยนขึ้นอยู่กับสายพันธุ์
เช่นการเพิ่มของβ (1,2) -linked ไซโลสและแกนα (1,3) -linked fucose ตกค้างในพืชและ
การเพิ่มขึ้นของβ (1, 4) -linked กาแลคและกรด sialic ในเลี้ยงลูกด้วยนม (33).
glycosylation ผลต่อคุณภาพของโปรตีนเพราะโครงสร้างไกลแคนที่แตกต่างกัน
อาจจะมีผลต่อความมั่นคงทางไกลโคโปรตีน, การกำหนดเป้าหมาย subcellular, ภูมิคุ้มกัน,
พฤติกรรมทางเภสัชจลนศาสตร์และฤทธิ์ทางชีวภาพ ดังนั้นการควบคุมที่แม่นยำของการดัดแปลงไกลแคนในการผลิตยาเสพติดเป็นเนื้อเดียวกันกับที่เฉพาะเจาะจงสูง glycoforms bespoke ที่
มอบประสิทธิภาพที่เหนือกว่าได้กลายเป็นหัวข้อสำคัญในการเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตของทุก
แพลตฟอร์มรวมทั้งเซลล์เลี้ยงลูกด้วยนม (22, 95, 136) ในพืชสองกลยุทธ์ที่สำคัญที่ได้รับการ
พัฒนาขึ้นเพื่อควบคุม glycosylation ของโปรตีน: การกำหนดเป้าหมาย subcellular เพื่อป้องกัน
การเพิ่มของสารตกค้างที่ไม่พึงประสงค์น้ำตาล (40, 48, 106) และ glycoengineering เพื่อป้องกัน
การเพิ่มของ glycans พืชและแม้กระทั่งการแทนที่ด้วย human- เหมือนคู่ (5).
การกำหนดเป้าหมายเป็น arguably วิธีการตรงไปตรงมามากที่สุดเพราะสามารถควบคุม
ระดับของยีนสร้างโดยการเพิ่มแท็กโปรตีนโดยเฉพาะอย่างยิ่ง (ดูโปรตีนแถบด้านข้างการกำหนดเป้าหมาย
ในระดับโมเลกุล Pharming พร้อมกับรูปที่ 1) การกำหนดเป้าหมายโปรตีนเพื่อ endoplasmic
reticulum โดยใช้แท็ก tetrapeptide KDEL และสัญญาซื้อขายล่วงหน้าที่คล้ายกันป้องกันการเพิ่มขึ้นของ
ความซับซ้อนประเภทโครงสร้างไกลแคนโดยหลีกเลี่ยงกอลไจอุปกรณ์จึงมั่นใจได้ว่าโปรตีนทั้งหมดจะถูก
แสดงด้วย glycans สูงสรุปร่วมกันเพื่อยูคาริโอทั้งหมด อีกตัวอย่างที่สำคัญของไกลแคน
ควบคุมผ่านการกำหนดเป้าหมายเป็นผู้กำกับโปรตีน vacuole กลยุทธ์ที่ PROTALIX Biotherapeutics
ใช้สำหรับการผลิต taliglucerase อัลฟ่า โปรตีนเป็นผลิตภัณฑ์ที่ผลิตในเซลล์แครอทและมีการ
กำหนดเป้าหมายไปยัง vacuole เพราะ resultingmannose ปลาย paucimannosidicN-glycans ส่งเสริม
การมีปฏิสัมพันธ์กับแมคโครฟาจ เมื่อเอนไซม์ที่ผลิตในเซลล์สัตว์, glycans
มีขั้วกรด sialic ที่ป้องกันไม่ให้ดูดซึมโดยขนาดใหญ่เพื่อให้พวกเขาจะต้องมีการตัดแต่ง
เอนไซม์ในหลอดทดลองซึ่งจะเพิ่มค่าใช้จ่ายในการประมวลผล β (1,2) -linked ไซโลสและแกน
α (1,3) -linked ตกค้าง fucose ยังอยู่บน taliglucerase อัลฟ่าจะไม่ปรากฏที่จะทำให้เกิดปัญหาความปลอดภัยใด ๆ ในผู้ป่วยแม้หลังจากการบริหารซ้ำ (34) การก่อตัวของโครงสร้างไกลแคน
ที่มีสารตกค้างแมนโนสเทอร์ช่วยให้โปรตีนที่จะกำหนดเป้าหมายพื้นผิวสรุปเฉพาะ
ผู้รับในแมคโครฟาจ (6) และในผลิตภัณฑ์ที่มีอัตราการกวาดล้างเพิ่มขึ้นจากเลือด
เป็นที่พึงปรารถนา (49) ขาด sialylation ยังเป็นประโยชน์สำหรับการผลิตที่ได้จากพืช
asialoerythropoietin (78).
Glycoengineering ได้รับความสำเร็จผ่านความหลากหลายของวิธีการรวมทั้งการชุมนุม
กลายพันธุ์หรือรวมตัวกันอีกคล้ายคลึงกันที่จะเคาะออกยีนที่ควบคุมการ glycosyltransferases ที่ไม่ต้องการ
การแทรกแซงอาร์เอ็นเอที่จะปราบปรามเดียวกัน เอนไซม์และการแสดงออกของยีนที่จะแนะนำ
glycosyltransferases heterologous ที่ฟอร์ม glycans เหมือนมนุษย์ (5) วิศวกรรม
ทางเดิน N-glycosylation ในพันธุ์พืชที่แตกต่างกันได้ประสบความสำเร็จดังนั้นการยกเลิกของβ (1,2) -linked
ไซโลและαหลัก (1,3) -linked ตกค้าง fucose (18, 52, 100, 109) และฟื้นฟูสมบูรณ์ ของ
ทางเดิน glycosylation เลี้ยงลูกด้วยนมในพืช (1, 9-12, 66, 76, 85, 110) ความเก่งกาจของวิธีการนี้
ได้รับอนุญาตให้การพัฒนาของ glycoforms ออกแบบเฉพาะผลิตภัณฑ์ในพืช (รูปที่ 2).
ตัวอย่างเช่นมันเป็นที่ยอมรับกันดีว่าฟังก์ชั่น Effector แอนติบอดีเช่นผูกพันกับγRIIIa Fc
รับจะถูกยับยั้งโดยตกค้าง fucose หลัก [ทั้งสอง แกนα (1,3) -linked ตกค้าง fucose พบ
ในพืชและแกนα (1,6) -linked ตกค้าง fucose พบได้ในสัตว์เลี้ยงลูกด้วย] และกรณีที่ไม่มี
สารตกค้างเหล่านี้ส่งเสริมแอนติบอดีขึ้นอยู่กับความเป็นพิษ cell-mediated (99, 110 ) ดังนั้น
glycoengineered พืชสามารถนำมาใช้ในการผลิตรุ่น Glyco ที่ดีที่สุดของโปรตีนที่จะ
ไม่ได้รับการผลิตตามธรรมชาติเช่นแอนติบอดี CD20 เฉพาะกับเภสัชจลนศาสตร์การปรับปรุง
คุณสมบัติผลิตโดย Synthon ใช้เทคโนโลยี LEX เมื่อเร็ว ๆ นี้ได้มาจากการ Biolex Therapeutics.
แอนติบอดีนี้จะแสดง สำหรับการรักษาโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลืองไม่ Hodgkin และมี
10 เท่าสัมพันธ์ที่ใกล้ชิดมากขึ้นสำหรับการรับและ 20 เท่าแอนติบอดีขึ้นอยู่มากขึ้น cell-mediated
พิษเมื่อเทียบกับคู่เลี้ยงลูกด้วยนมของมัน (30).
พืชโครงสร้างไกลแคนไม่เคยส่งผลกระทบต่อ การทำงานของโปรตีน; ตัวอย่างเช่น
เอชไอวีแอนติบอดี neutralizing 2G12 ผลิตในโรงงานเป็นเพียงที่มีศักยภาพเป็นคู่
ที่ผลิตในเซลล์สัตว์ (82, 83) และไกลโคโปรตีนจากพืชที่ได้มาไม่ปรากฏที่จะทำให้เกิด
การตอบสนองที่ไม่พึงประสงค์หรือภูมิแพ้ในมนุษย์แม้ในขณะที่การบริหารงานหลายครั้ง (34)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การค้าของโมเลกุลเริ่มการดำเนินการกับความพยายามที่จะแสดงให้เห็นว่า พืชสามารถใช้
การผลิตสินค้าที่เหมือนของที่ผลิตใน mammalian เซลล์ วิธีการนี้
ตรงไปตรงมาสำหรับโปรตีน เช่น อินซูลิน ) ที่ประกอบด้วยทั้งหมดของโปรตีนแต่
ยากสำหรับโปรตีนเนื่องจากความแตกต่างระหว่างไกลแคนโครงสร้างของพืช
และสัตว์กลไก ofn glycosylation ในพืชและสัตว์ที่คล้ายกันจน n-glycan ตั้งไข่
ถึงมะระขี้นก ซึ่งมันผ่านชนิด ขึ้นอยู่กับการปรับเปลี่ยน
เช่นนอกจากนี้ของบีตา - ไซโล ( 1 , 2 ) และเชื่อมโยงหลักα ( 1 , 3 ) - เชื่อมโยงฟิวโคสตกค้างในพืชและ
นอกจากนี้ของบีตา ( 1 , 4 ) - กาแล็กโทสเชื่อมโยงและ กรดเซียริกตกค้างในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ( 33 ) .
glycosylation โปรตีนรีคอมบิแนนท์ เพราะมีผลต่อคุณภาพของโครงสร้างต่างกันไกลแคน
อาจมีผลต่อโปรตีนเสถียรภาพตําแหน่งภายในเซลล์เป้าหมาย สามารถทางพฤติกรรม , และฤทธิ์ทางชีวภาพ ดังนั้น การควบคุมที่แม่นยำของการปรับเปลี่ยนไกลแคนผลิตเป็นเนื้อเดียวกันยาสูงเฉพาะ bespoke ที่
glycoformsให้ประสิทธิภาพที่เหนือกว่า ได้กลายเป็นหัวข้อที่สำคัญสำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพของแพลตฟอร์มการผลิต
ทั้งหมดรวมทั้ง mammalian เซลล์ ( 22 , 95 , 136 ) ในพืช สองกลยุทธ์ที่สำคัญได้
พัฒนาควบคุม glycosylation โปรตีนรีคอมบิแนนท์ : ตําแหน่งภายในเซลล์เป้าหมาย เพื่อป้องกันจากกากน้ําตาล
ไม่พึงประสงค์ ( 40 , 48 , 106 ) และ glycoengineering ป้องกัน
นอกจากนี้ glycans พืชและแทนที่พวกเขากับมนุษย์เช่น counterparts ( 5 ) .
เป้าหมายเป็น arguably วิธีที่ตรงไปตรงมาที่สุด เพราะสามารถควบคุมได้ในระดับของยีนสร้าง
โดยการเพิ่มแท็กโปรตีนโดยเฉพาะ ( ดูแถบด้านข้างในระดับโมเลกุลโปรตีนเป้าหมาย
การดำเนินการพร้อมกับรูปที่ 1 ) เป้าหมายที่โปรตีนรีคอมบิแนนท์ถึงความเยือกเย็น
ชนิด โดยใช้เตตระเพปไทด์แท็ก kdel และอนุพันธ์คล้ายกันป้องกันนอกเหนือจาก
ไกลแคนโครงสร้างชนิดซับซ้อน โดยหลีกเลี่ยงมะระขี้นกจึงมั่นใจว่าโปรตีน
แสดงสูงแมน glycans ทั่วไปทั้งหมดยูแคริโอต . คีย์อื่นตัวอย่างไกลแคน
ควบคุมผ่านเป้าหมายเป็นผู้กำกับโปรตีนให้กับแวคิวโอลเป็นยุทธศาสตร์ที่ PROTALIX BIOTHERAPEUTICS
ที่ใช้สำหรับการผลิตของ taliglucerase อัลฟ่า . โปรตีนที่ผลิตในเซลล์แครอทและ
เป้าหมายไปยังเซลล์เพราะ resultingmannose ก้น paucimannosidicn
glycans ส่งเสริมปฏิสัมพันธ์กับแมคโครฟาจ . เมื่อเอนไซม์ที่ผลิตในเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม , glycans
มีเทอร์มินัลกรดตกค้าง ที่ป้องกันการแมโครเฟจ ดังนั้นพวกเขาต้องตัด
enzymatically ในหลอดทดลอง ซึ่งจะเพิ่มค่าใช้จ่ายในการประมวลผล และบีตา - ไซโล ( 1 , 2 ) และเชื่อมโยงหลัก
α ( 1 , 3 ) - เชื่อมโยงฟิวโคสตกค้างยังมีอยู่ใน taliglucerase Alfa ไม่ปรากฏปัญหาความปลอดภัยในผู้ป่วยหลังจากย้ำการบริหาร ( 34 ) การก่อตัวของไกลแคนโครงสร้าง
กับเทอร์มินัล mannose ตกค้างช่วยให้โปรตีนรีคอมบิแนนท์เป้าหมาย mannose
ผิวที่เฉพาะเจาะจงตัวรับในแมโครเฟจ ( 6 ) และในผลิตภัณฑ์ที่เพิ่มขึ้นอัตราการกวาดล้างจากเลือด
ที่พึงประสงค์ ( 49 ) ขาด sialylation ยังเป็นประโยชน์สำหรับการผลิตของพืชซึ่ง asialoerythropoietin ( 78 )
.
glycoengineering ได้ประสบผ่านความหลากหลายของวิธีการรวมทั้งปกติ
การเปรียบเทียบหรือการเคาะออกจากยีนเข้ารหัส glycosyltransferases ไม่พึงประสงค์
RNA รบกวนยับยั้งเอนไซม์เดียวกันและการแสดงออกยีนชนิดที่แนะนำ
glycosyltransferases มนุษย์เหมือน glycans ( 5 ) วิศวกรรมศาสตร์
n-glycosylation ทางเดินในพืชชนิดต่างๆจึงได้รับการยกเลิกของบีตา - ไซโล ( 1 , 2 ) เชื่อมโยง
และหลักα ( 13 ) เชื่อมโยงฟิวโคสตกค้าง ( 18 , 52 , 100 , 109 ) และสมบูรณ์ฟื้นฟูวิถีเฉพาะ glycosylation
ในพืช ( 1 , 9 – 12 , 66 , 75 , 85 , 110 ) หลากหลายของวิธีการนี้
อนุญาตให้มีการ พัฒนาผลิตภัณฑ์ ออกแบบ glycoforms เฉพาะในพืช ( รูปที่ 2 ) .
ตัวอย่าง มันก็ขึ้นว่า แอนติบอดี ( ฟังก์ชันเช่นผูกกับ เอฟซี γ riiia
ตัวรับจะถูกยับยั้งโดยตกค้างฟูโคสหลัก [ ทั้งหลักα ( 1 , 3 ) - เชื่อมโยงฟิวโคสที่พบตกค้างในพืชและหลักα
( 1,6 ) - เชื่อมโยงฟิวโคสที่พบตกค้างในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ] และไม่มีสารตกค้างเหล่านี้ส่งเสริมภูมิคุ้มกันชนิดอาศัยเซลล์
ขึ้นอยู่กับเซลล์ ( 99 , 110 ) โดย
glycoengineered พืชสามารถนำมาผลิตเป็นไกลโคโปรตีนที่
เหมาะรุ่นไม่สามารถผลิตได้เองตามธรรมชาติ เช่น cd20 เฉพาะแอนติบอดีด้วยการปรับปรุงคุณสมบัติทางเภสัชจลนศาสตร์
ผลิตโดยใช้เทคโนโลยี synthon เล็กซ์ เพิ่งได้มาจาก biolex ) .
แอนติบอดีนี้จะแสดงสำหรับการรักษาที่ไม่ใช่มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดฮอดจ์กิน และมีความสามารถมากขึ้น
10 เท่าของตัวรับและ 20 มากกว่าแบบพับภูมิคุ้มกันชนิดอาศัยเซลล์
ความเป็นพิษต่อเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเปรียบเทียบกับคู่ ( 30 ) .
โครงสร้างไกลแคนต้นไม่เสมอส่งผลกระทบต่อการทำงานของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ ; ตัวอย่างเช่น
neutralizing แอนติบอดีเอชไอวี 2 ผลิตในพืชก็มีศักยภาพเป็น counterparts
ผลิต ในการควบคุมเซลล์ ( 82 , 83 ) และโปรตีนพืชซึ่งไม่ปรากฎจูง
ที่ไม่พึงประสงค์หรือข้อมูลการตอบสนองในมนุษย์ แม้เมื่อใช้ในโอกาสต่างๆ ( 34 )