4.3. PrecisionPrecision was determi

4.3. Precision
Precision was determined by means of repeatability and reproducibility
measures.
Repeatability was evaluated through five consecutive repetitions
of the analysis of the same honey sample, and expressed in
terms of experimental variation (CV%exp,r). Average repeatability
ranged from 2.6% (vitamin B2) to 7.6% (vitamin B5).
Reproducibility was verified through five repetitions of the analysis
of the same honey sample, performed over different analytical
sessions, within 1 month. It was expressed by the experimental
variation, CV%exp,R. Reproducibility values ranged from 3.3% (vitamin
C) to 18% (vitamin B3). Precision data are reported in Table 4.
In order to eliminate any uncertainty regarding the acceptability
of the level of precision of the data, a fitness-for-purpose evaluation
based on Horwitz’s theory [19] was used. According to this theory,
it is possible to calculate a theoretical CV% (CV% H) value on the
basis of the concentration level expected and to compare it with the
experimental CV% (CV%exp). If the ratio between experimental and
theoretical CV% (HorRat ratio) is less than 1.5 the precision level of
the experimental data can be considered acceptable. Table 4 shows
that HorRat ratio values for repeatability and reproducibility are
always lower than 1.5 for all WSVs. Therefore, the reproducibility
parameters can be considered acceptable.
4.4. Bias
Due to the lack of certified reference materials and independent
analytical methods, recovery tests were performed to check
the absence of bias in the proposed method. After homogenization,
40 g of a honey sample were divided into four 10 g aliquots.
Aliquots 2, 3, and 4 were treated with a suitable and increasing volume
of a freshly prepared bulk solution containing 100 mg L−1 of
water-soluble vitamins, while no addition was made to aliquot 1.
Each aliquot underwent all the analytical procedures previously
described and was analyzed in triplicate. The procedure always
produced quantitative average recoveries (criteria: two-tail t-test,
p = 0.95), as reported in Table 4.
On the basis of validation results discussed, the proposed
method can be considered accurate.
5. Conclusions
For the first time, a quick and simple RP-HPLC method to simultaneously
determine five water-soluble vitamins (B2, B3, B5, B9
and C) in honey has been developed and validated in terms of
sensitivity, linearity, precision, bias and accuracy. Low detection
and quantification limits, very good linearity in large concentration
intervals, acceptable precision, and absence of any bias are
the key criteria of the validation protocol. The proposed method
was successfully applied to 25 Sardinian honey samples of 10 different
botanical origins, in addition to three monofloral honeys
(acacia and linden) from northern Italy. The amount of WSV found
in honey is quite low: the overall concentration of the five analytes
never exceeded 40 mg kg−1 and often appeared to be significantly
dependent on the botanical origin of the matrix. Vitamin C and
vitamin B3 were present in almost all the honey samples. Interestingly,
the concentration of vitamin C was generally low (the highest
concentration detected was slightly over 5 mg kg−1) and invariant
with respect the origin of the honey (probably due to the aforementioned
interactions between ascorbic acid, glucose oxidase and
catalase in honey). In contrast, the concentration of vitamin B3 was
observed to be as high as ca. 28 mg kg−1 and it seemed to be strongly
dependent on the botanical origin of the samples. The quantifi-
cation of vitamins B5, B2 and B9 was successful only in ca. 50%
of the samples analyzed: while vitamin B5 can reach concentrations
of some tens of mg kg−1 in honeys of selected botanical origin
(i.e. asphodel honey), the concentrations of vitamins B2 and B9 are
always below 10 mg kg−1. We can presume an influence of the origin
of the samples on the concentration of these analytes as well,
but the low number of samples analyzed keeps us from drawing
such a conclusion at this time. In conclusion, although the concentration
of WSV in honey may be too low to generate interest
in the field of nutrition, its potential correlation to the botanical
origin of the samples may prove useful to determine the origin of
honeys.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

4.3 แม่นยำแม่นยำถูกกำหนดโดยวิธีการของการทำซ้ำและการทำสำเนามาตรการ. ทำซ้ำถูกประเมินผ่านห้าซ้ำติดต่อกันของการวิเคราะห์ของกลุ่มตัวอย่างน้ำผึ้งเดียวกันและแสดงออกในแง่ของรูปแบบการทดลอง(CV% EXP, R) การทำซ้ำเฉลี่ยตั้งแต่ 2.6% (วิตามินบี 2) 7.6% (วิตามินบี 5). แม่นยำถูกตรวจสอบซ้ำผ่านห้าของการวิเคราะห์ของกลุ่มตัวอย่างน้ำผึ้งเดียวกันดำเนินการมากกว่าการวิเคราะห์ที่แตกต่างกันการประชุมภายใน1 เดือน มันถูกแสดงโดยการทดลองเปลี่ยนแปลง CV% EXP, R ค่าการทำซ้ำตั้งแต่ 3.3% (วิตามินC) ถึง 18% (วิตามินบี 3) ข้อมูลที่แม่นยำมีการรายงานในตารางที่ 4 เพื่อที่จะขจัดความไม่แน่นอนเกี่ยวกับการยอมรับของระดับของความแม่นยำของข้อมูลที่มีการประเมินผลการออกกำลังกายสำหรับวัตถุประสงค์ตามทฤษฎีของHorwitz [19] ถูกนำมาใช้ ตามทฤษฎีนี้ก็เป็นไปได้ในการคำนวณทางทฤษฎี% CV (CV% H) ค่าบนพื้นฐานของระดับความเข้มข้นที่คาดว่าจะเปรียบเทียบกับ% CV ทดลอง (CV ประสบการณ์%) ถ้าอัตราส่วนระหว่างทดลองและ% CV ทฤษฎี (อัตราส่วน HorRat) น้อยกว่า 1.5 ระดับความแม่นยำของข้อมูลการทดลองได้รับการพิจารณาเป็นที่ยอมรับ ตารางที่ 4 แสดงให้เห็นว่าค่าอัตราส่วนHorRat สำหรับการทำซ้ำและการทำสำเนาเป็นมักจะต่ำกว่า1.5 สำหรับ WSVs ทั้งหมด ดังนั้นการทำสำเนาพารามิเตอร์ถือได้ว่าเป็นที่ยอมรับ. 4.4 อคติเนื่องจากการขาดของวัสดุอ้างอิงรับรองและอิสระวิธีการวิเคราะห์การทดสอบการกู้คืนได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบกรณีที่ไม่มีอคติในวิธีการที่นำเสนอ หลังจากที่เป็นเนื้อเดียวกัน, 40 กรัมของตัวอย่างน้ำผึ้งถูกแบ่งออกเป็นสี่ 10 aliquots กรัม. aliquots 2, 3, และ 4 ได้รับการรักษาที่มีปริมาณที่เหมาะสมและการเพิ่มขึ้นของการแก้ปัญหาจำนวนมากที่เตรียมสดใหม่ที่มี100 มิลลิกรัม L-1 ของวิตามินที่ละลายน้ำได้ขณะที่นอกจากไม่ได้ทำกับ aliquot 1. หารแต่ละขนานทั้งหมดการวิเคราะห์ก่อนหน้านี้อธิบายและการวิเคราะห์ในเพิ่มขึ้นสามเท่า ขั้นตอนเสมอผลิตกลับคืนเฉลี่ยปริมาณ (เกณฑ์ที่สองหาง t-test, p = 0.95) ตามที่รายงานในตารางที่ 4 บนพื้นฐานของผลการตรวจสอบที่กล่าวถึงที่นำเสนอวิธีการที่ได้รับการพิจารณาอย่างถูกต้อง. 5 สรุปผลการวิจัยครั้งแรก, วิธี RP-HPLC ที่รวดเร็วและง่ายไปพร้อม ๆ กันกำหนดห้าวิตามินที่ละลายน้ำ(B2, B3, B5, B9 และ C) ในน้ำผึ้งได้รับการพัฒนาและตรวจสอบในแง่ของความไวเชิงเส้นที่มีความแม่นยำอคติและความถูกต้อง การตรวจสอบต่ำและข้อ จำกัด ปริมาณเชิงเส้นที่ดีมากในความเข้มข้นมากช่วงเวลาที่มีความแม่นยำที่ยอมรับได้และกรณีที่ไม่มีอคติใดๆเกณฑ์ที่สำคัญของโปรโตคอลการตรวจสอบ วิธีการที่นำเสนอถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จถึง 25 ตัวอย่างน้ำผึ้งซาร์ดิเนีย 10 ที่แตกต่างกันต้นกำเนิดพฤกษศาสตร์นอกเหนือไปจากสามhoneys monofloral (กระถินและดอกเหลือง) จากภาคเหนือของอิตาลี ปริมาณของ WSV พบในน้ำผึ้งอยู่ในระดับต่ำมาก: ความเข้มข้นโดยรวมของห้าวิเคราะห์ไม่เกิน 40 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม-1 และมักจะปรากฏตัวขึ้นอย่างมีนัยสำคัญขึ้นอยู่กับแหล่งกำเนิดพฤกษศาสตร์ของเมทริกซ์ วิตามินซีและวิตามินบี 3 มีอยู่ในเกือบทุกตัวอย่างน้ำผึ้ง ที่น่าสนใจมีความเข้มข้นของวิตามินซีอยู่ในระดับต่ำโดยทั่วไป(สูงสุดเข้มข้นที่ตรวจพบเป็นน้อยกว่า5 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม-1) และคงด้วยความเคารพที่มาของน้ำผึ้ง(อาจเนื่องจากการดังกล่าวข้างต้นมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างวิตามินซี oxidase กลูโคสและ catalase ในน้ำผึ้ง ) ในทางตรงกันข้ามความเข้มข้นของวิตามินบี 3 ที่ถูกตั้งข้อสังเกตว่าจะสูงที่สุดเท่าที่แคลิฟอร์เนีย 28 มก. 1 กิโลกรัมและมันดูเหมือนจะเป็นอย่างมากขึ้นอยู่กับแหล่งกำเนิดทางพฤกษศาสตร์ของกลุ่มตัวอย่าง quantifi- ไอออนบวกของวิตามินบี 5, บี 2 และ B9 ประสบความสำเร็จเฉพาะในรัฐแคลิฟอร์เนีย 50% ของกลุ่มตัวอย่างวิเคราะห์ในขณะที่วิตามินบี 5 สามารถเข้าถึงความเข้มข้นของบางส่วนนับมิลลิกรัมต่อกิโลกรัมใน1 honeys แหล่งกำเนิดพฤกษศาสตร์เลือก(เช่นน้ำผึ้งอัสโฟเดล) ความเข้มข้นของวิตามินบี 2 และ B9 อยู่เสมอต่ำกว่า10 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม 1 เราสามารถเข้าใจอิทธิพลของแหล่งกำเนิดที่ของกลุ่มตัวอย่างอยู่กับความเข้มข้นของสารเหล่านี้เช่นกันแต่จำนวนที่ต่ำของการวิเคราะห์ตัวอย่างที่ทำให้เราจากการวาดข้อสรุปดังกล่าวในเวลานี้ โดยสรุปแม้ว่าความเข้มข้นของ WSV ในน้ำผึ้งอาจจะต่ำเกินไปที่จะสร้างความสนใจในด้านการโภชนาการ, ความสัมพันธ์ที่อาจเกิดขึ้นกับพฤกษศาสตร์ที่มาของตัวอย่างที่อาจเป็นประโยชน์ในการตรวจสอบที่มาของน้ำผึ้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

4.3 . ยํายํา ตั้งใจ
โดยวิธีการและมาตรการตรวจสอบ
.
การประเมินผ่านห้าติดต่อกัน repetitions
ของการวิเคราะห์ตัวอย่างที่รักเหมือนกัน และแสดงออกในแง่ของการทดลองพันธุ์
% exp , R )
การเฉลี่ยอยู่ระหว่างร้อยละ 2.6 ( วิตามินบี2 ) 7.6 %
( Vitamin B5 )ตรวจสอบยืนยันผ่าน 5 repetitions ของการวิเคราะห์
ของตัวอย่างที่รักเหมือนกัน ทำการวิเคราะห์
แตกต่างกว่าครั้ง ภายใน 1 เดือน มันถูกแสดง โดยการทดลอง
, CV % exp , R . ตรวจสอบค่าอยู่ระหว่างร้อยละ 3.3 ( วิตามิน
c ) ร้อยละ 18 ( วิตามิน B3 ) ข้อมูลยําจะมีการรายงานในตาราง 4 .
เพื่อขจัดความไม่แน่นอนใด ๆเกี่ยวกับการยอมรับ
ของระดับความแม่นยำของข้อมูล ออกกําลังกายสําหรับการประเมินวัตถุประสงค์ตาม
Horwitz ทฤษฎี [ 19 ] ใช้ ตามทฤษฎีนี้ ,
มันเป็นไปได้ที่จะคำนวณ % CV ( CV ) % h ) บนพื้นฐานของค่า
ความเข้มข้นระดับความคาดหวังและเปรียบเทียบมันกับ
% CV ทดลอง ( CV % exp ) ถ้าอัตราส่วนระหว่างการทดลองและทฤษฎี CV %
( อัตราส่วน horrat ) น้อยกว่า 15 ความแม่นยำระดับ
ข้อมูลสามารถยอมรับ ตารางที่ 4 แสดงที่ค่าอัตราส่วนการ horrat

เสมอตรวจสอบให้และอยู่ต่ำกว่า 1.5 ทั้งหมด wsvs . ดังนั้น การตรวจสอบพารามิเตอร์สามารถยอมรับ
.
4.4 . อคติ
เนื่องจากขาดของวัสดุอ้างอิงที่ได้รับการรับรอง และวิธีการวิเคราะห์อิสระ
,การทดสอบการกู้คืนการตรวจสอบ
ไม่มีอคติในวิธีการที่ได้นำเสนอ หลังจากการ
40 กรัมของน้ำผึ้งตัวอย่างถูกแบ่งออกเป็นสี่ 10 กรัมเฉยๆ .
เฉยๆ 2 , 3 และ 4 ของการเก็บรักษาที่เหมาะสม และเพิ่มปริมาณ
ของเตรียมสดโซลูชั่นที่มีขนาดใหญ่ 100 mg L − 1
ละลายวิตามิน ในขณะที่ไม่มีส่วนได้ส่วนที่หารลงตัว 1 .
แต่ละส่วนลงตัวได้รับทั้งหมดวิเคราะห์ขั้นตอนก่อนหน้านี้
อธิบายและวิเคราะห์ข้อมูลทั้งสามใบ กระบวนการผลิตเชิงปริมาณเสมอ
ต่ำสุดเฉลี่ย ( เกณฑ์ : สองหาง (
, P = 0.95 ) ตามรายงานตารางที่ 4 .
บนพื้นฐานของการตรวจสอบผลลัพธ์ที่ได้เสนอ วิธี สามารถ พิจารณา ถูกต้อง
.
5 สรุป
เป็นครั้งแรกรวดเร็วและวิธีที่ง่ายๆพร้อมกัน
กำหนดห้าละลายวิตามิน ( B2 , B3 , B5 , B9
C ) ในน้ำผึ้งได้ถูกพัฒนาและตรวจสอบในแง่ของ
ไว , เส้นตรง , ความอคติและความถูกต้อง
การตรวจจับต่ำและปริมาณจำกัด ดีมากเป็นเส้นตรงในช่วงความเข้มข้นมาก
, ยอมรับความแม่นยํา และไม่มีอคติใด ๆมี
เกณฑ์ที่สำคัญของการตรวจสอบโปรโตคอล วิธีที่เสนอ
ถูกใช้เรียบร้อยแล้วเพื่อ 25 ซาร์ดิเนียน้ำผึ้งตัวอย่างที่แตกต่างกัน 10
พฤกษกำเนิด นอกจากสาม monofloral ที่รัก
( กระถินและ Linden ) จากภาคเหนือของอิตาลี จำนวน wsv พบ
น้ำผึ้งค่อนข้างต่ำ : ความเข้มข้นรวมของ 5 สาร
ไม่เกิน 40 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม− 1 และมักจะปรากฏเป็นอย่างมาก