2. Materials and methods
2.1. The environment
This breeding programme was performed at the National Genetic
Breeding Center for M. rosenbergii (latitude 30°55′17″ N longitude
120°07′05″ E, altitude 3 m), located in Huzhou city, Zhejiang province,
China. The daily average temperature is 16 °C, varying from −5 °C in
the winter to 39 °C in the summer. The annual rainfall is 1300mm,
occurring non-uniformly throughout the entire year. Rainfall from
April to September accounts for 90% of the yearly rainfall.
2.2. Data structure on shrimp harvest body weight
The base population (G0 generation), involving three introduced
strains, was formed using a diallel cross experiment in 2006. The
first strain (BM), originating in Burma, was introduced in 2002 to
the National Genetic Breeding Center for giant freshwater prawn at
a juvenile growth stage. The other two strains (ZJ and GX) comprised
the progeny of populations introduced in Zhejiang province and
Guangxi province in 1976 and were closely cultured for more than
10 years at the National Genetic Breeding Center for M. rosenbergii.
Their origins were not verified with detailed documents. The pedigrees
of individuals in the three strains were unknown. During subsequent
generations (G1 to G4) the selection population was closed, and
generations were discrete. The selection population was maintained
by randomly mating selected males and females at a ratio of 1:2,
imposing some restrictions with the aim of controlling inbreeding
(e.g., avoiding full-sib, half-sib and cousin mating), and maintaining
a high effective population size. Full- and half-sib families were produced
by a nested mating design, in which two dams were mated
to the same sire. The control population was composed of 10 to 15
full-sib families, which were produced from 20 to 30 breeding candidates
by single-pair mating. These control broodstock were from different
full-sib families of the previous generation and had the mean
estimated breeding value (EBV).
2.3. Mating and production of families
Each breeding candidate was reared separately in a small net cage
(0.25 m×0.25 m×0.25 m) labelled with a four digit identity code.
Breeding candidates could then be individually tagged using the
cage ID. Female and male parents were carefully chosen to maximise
mating success. Females with orange coloured ovaries that occupied a
large area of the cephalothorax were preferred. Males with a healthy
appearance and long, thick, dark blue claws were obtained for mating
with sexually receptive females. Several females (each from a different
family) and one male were isolated for mating in a separate
tank (3 m2) to create the selection population. Therefore, the ID of
each female could be identified based on the unique visible implant
elastomer (VIE) colour combination from their respective families. A
total of 95 families from the mating between 64 sires and 95 dams
were obtained in the G0 generation (Table 1). More families were
produced successfully in the subsequent three generations (G1 to
G3) (Table 1). However, fewer families were obtained in the G4
generation due to infection by unknown pathogens (Table 1). Each female
carrying fertilised eggs was transferred to a separate 170-l
brood tank and maintained for 15 to 18 days until the eggs began to
hatch. The hatching synchronisation for families implied that family
production periods decreased over generations with the promotion
of mating management (Table 2). A total of 2000 larvae from every
full-sib family were sampled randomly and transferred to a separated
larvae-culture tank.
2.4. Rearing and tagging of families
Larvae were fedwith a combination of food once every 2 h, comprising
egg yolks, Artemia salina, live Daphnia and feedstuff. The feedstuff
contains moisture 12%, crude protein 42% and crude ash 17%. The
amount and proportion of foodwere adapted daily, according to the different
stages. The temperature of the larvae culture was adjusted and
maintained at 30 °C±0.5 °C by a submersible heater placed in each
tank. Dailywater exchanges increased, according to the different stages,
with 100% daily water exchange at the post-larval stage.
When 90% of animals in each family were in the post-larval stage,
600 post larvae per full-sib family were randomly moved to a separate
concrete tank (3 m2) and reared for a period ranging from 71
to 92 days over five generations (Table 2). The post-larvae were fed
feedstuff twice daily, according to their nutritional needs. The larvae
were then individually tagged with a VIE tag when they reached a
minimum size of 2.5 cm. Prior to tagging, the families were tested
for the presence of M. rosenbergii nodavirus (MRNV) using reversetranscriptase
polymerase chain reaction, and only virus-free families
were used. The specified colour combination of the VIE was injected
into the last abdominal segment of animals in each full-sib family.
All families could be distinguished and identified by different VIE
colour combinations.
2. วัสดุและวิธีการ2.1.สภาพแวดล้อมดำเนินโครงการปรับปรุงพันธุ์นี้ที่ชาติพันธุศูนย์เพาะพันธุ์ม.ก้ามกราม (ละติจูด 30 ° 55′17″ N ลองจิจูด120 ° 07′05″ E ความสูง 3 เมตร), อยู่ในเมืองหูโจว เจ้อเจียงจังหวัดประเทศจีน อุณหภูมิเฉลี่ยประจำวันเป็น 16 ° C แตกต่างจาก −5 ° C ในหนาวถึง 39 ° C ในฤดูร้อน ปริมาณน้ำฝนรายปีเป็น 1300 มม.เกิดขึ้นไม่ใช่สม่ำเสมอเมื่อเทียบเคียงตลอดทั้งปี ปริมาณน้ำฝนจากเมษายนถึงกันยายนบัญชีสำหรับ 90% ของปริมาณน้ำฝนรายปี2.2 โครงสร้างข้อมูลกุ้งเก็บเกี่ยวน้ำหนักประชากรพื้นฐาน (รุ่น G0), เกี่ยวข้องกับสามแนะนำสายพันธุ์ ก่อตั้งโดยใช้การ diallel ระหว่างการทดลองในปี 2006 ที่แรกต้องใช้ (BM), เกิดในพม่า ถูกนำมาใช้ในปี 2545 เพื่อศูนย์แห่งชาติพันธุเพาะพันธุ์กุ้งก้ามกรามที่ขั้นเจริญเติบโตของเด็ก อื่นสองสายพันธุ์ (ZJ และ GX) ประกอบด้วยลูกหลานของประชากรในจังหวัด Zhejiang และจังหวัดกว่างในปี 1976 และอ่างอย่างใกล้ชิดสำหรับมากกว่า10 ปีที่ศูนย์เพาะพันธุ์พันธุแห่งชาติสำหรับก้ามกรามเมตรต้นกำเนิดของพวกเขาไม่ได้ถูกตรวจสอบเอกสารรายละเอียด พันธุ์ของบุคคลในสายพันธุ์ที่สามได้รู้จัก ในช่วงเวลาต่อมารุ่น (G1 กับ G4) ประชากรเลือกปิด และรุ่นแยกกันได้ เลือกประชากรถูกรักษาไว้โดยผสมพันธุ์แบบสุ่มเลือกชายและหญิงในอัตราส่วนเป็น 1:2ข้อจำกัดบางอย่าง มีจุดมุ่งหมายของการควบคุม inbreeding สง่างาม(เช่น หลีกเลี่ยงเต็มสิบ สิบครึ่ง และผสมพันธุ์ลูกพี่ลูกน้อง), และการรักษาขนาดประชากรที่มีประสิทธิภาพสูงขึ้น ผลิตเต็ม - และครึ่งสิบครอบครัวโดยซ้อนติดสัดแบบ มี mated สายสองไปเดินเหมือนกัน ควบคุมประชากรประกอบด้วย 10-15เต็มสิบครอบครัว ซึ่งถูกผลิตจาก 20 ถึง 30 พันธุ์ผู้สมัครโดยเดี่ยวคู่ผสมพันธุ์ สูตรควบคุมเหล่านี้ได้จากที่อื่นเต็มสิบครอบครัวรุ่นก่อนหน้า และมีค่าเฉลี่ยประเมินพันธุ์ค่า (EBV)2.3 การผสมพันธุ์ และการผลิตของครอบครัวผู้สมัครแต่ละพันธุ์เป็นผลิตภัณฑ์แยกต่างหากในกรงสุทธิมีขนาดเล็ก(0.25 m × 0.25 m × 0.25 เมตร) มัน มีรหัสตัวเลข 4พันธุ์ผู้สมัครสามารถแล้วให้แต่ละแท็กใช้การรหัสกรง ผู้ปกครองของหญิง และชายได้ระมัดระวังเพิ่มผสมพันธุ์สำเร็จ หญิงที่ มีสีส้มสีรังไข่ที่ครอบครองเป็นพื้นที่ขนาดใหญ่ของ cephalothorax ถูกต้อง ผู้ชายกับการมีสุขภาพดีลักษณะที่ปรากฏและยาว หนา สีดำก้ามสีน้ำเงินได้รับการผสมพันธุ์กับครอบครัวทางเพศหญิง หญิงหลาย (แต่ละจากที่อื่นครอบครัว) และเพศชายหนึ่งแยกต่างหากสำหรับการผสมพันธุ์ในแยกต่างหากถัง (3 m2) เพื่อสร้างประชากรเลือก ดังนั้น ID ของสามารถระบุแต่ละหญิงยึดรากฟันเทียมที่มองเห็นได้เฉพาะชุดสีจักรยานยนต์ (วี) จากครอบครัวของพวกเขาเกี่ยวข้อง Aรวมของครอบครัว 95 จากการผสมพันธุ์ระหว่างพ่อพันธุ์โค 64 95 สายได้รับในรุ่น G0 (ตาราง 1) มีครอบครัวเพิ่มเติมผลิตสำเร็จในรุ่นที่สามตามมา (G1 เพื่อG3) (ตารางที่ 1) อย่างไรก็ตาม ครอบครัวน้อยได้รับใน G4รุ่นเนื่องจากติดเชื้อโดยไม่รู้จักโรค (ตารางที่ 1) หญิงแต่ละโดยไข่ fertilised ถูกถ่ายโอนไปแยก 170 lbrood ถัง และรักษา 15-18 วันจนไข่เริ่มขณะนั้น Synchronisation ฟักไข่ในครอบครัวโดยนัยที่ครอบครัวรอบระยะเวลาการผลิตลดลงกว่ารุ่นที่มีโปรโมชั่นของการผสมพันธุ์การจัดการ (ตาราง 2) จำนวน 2000 ตัวอ่อนจากทุกตัวอย่างแบบสุ่ม และโอนย้ายไปที่แยกครอบครัวเต็มสิบถังตัวอ่อนวัฒนธรรม2.4. การเพาะเลี้ยง และติดป้ายของครอบครัวตัวอ่อนมีการรวมกันของอาหารหนึ่งครั้งทุก ๆ 2 h, fedwith ประกอบด้วยไข่แดง โรงแรมสลี Artemia, live Daphnia และเรา เราประกอบด้วยความชื้น 12% โปรตีนน้ำมัน 42% และเถ้าน้ำมัน 17% ที่จำนวนและสัดส่วนของ foodwere ปรับทุกวัน อื่น ๆขั้นตอนการ อุณหภูมิของตัวอ่อนถูกปรับปรุง และรักษาที่ 30 ° C±0. 5 ° C โดยฮีตเตอร์ submersible วางในแต่ละถัง Dailywater แลกเปลี่ยนที่เพิ่มขึ้น ตามระยะต่าง ๆ100% ประจำวันน้ำแลกเปลี่ยนที่ระยะ larval ภายหลังเมื่อ 90% ของสัตว์ในแต่ละครอบครัวอยู่ในระยะ larval หลังตัวอ่อนลง 600 ต่อครอบครัวเต็มสิบได้ถูกย้ายไปแยกต่างหากได้คอนกรีตถัง (3 m2) และผลิตภัณฑ์สำหรับระยะเวลาตั้งแต่ 7192 วันกว่า 5 รุ่น (ตารางที่ 2) มีเลี้ยงตัวอ่อนหลังเราสองครั้งทุกวัน ตามที่นักโภชนาการความต้องการ ตัวอ่อนก็แล้วแต่ละแท็ก ด้วยแท็กวีเข้าถึงการขนาดต่ำสุดของ 2.5 cm. ก่อนติดป้าย ครอบครัวทดสอบสำหรับสถานะของม.ก้ามกราม nodavirus (MRNV) ใช้ reversetranscriptaseปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส และครอบครัวปราศจากไวรัสเท่านั้นใช้ ระบุสีชุดวีถูกฉีดในส่วนท้องสุดท้ายของสัตว์ในแต่ละครอบครัวเต็มสิบทุกครอบครัวอาจแตกต่างไป และระบุแตกต่างกันวีสีชุด
การแปล กรุณารอสักครู่..
