One colony of S. cerevisiae was aseptically transferred into 10 mL YM broth (Difco, Sparks, MD, USA) acidified to pH 3.5 with phosphoric acid prior to incubation for 24 h at 25 °C.
หนึ่งในอาณานิคมของ S. cerevisiae ถูกย้ายปลอดเชื้อเป็น 10 มิลลิลิตรน้ำซุป YM (Difco ประกาย, MD, USA) กรดค่าพีเอช 3.5 กับกรดฟอสฟก่อนที่จะมีการบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 25 ° C