2.3. Culture media
Liquid LBG was prepared as described previously (McDonald et al.,
2012) and as indicated above. Nutrient agar was prepared by adding
1.5% (w/v) bacto agar (BD; Sparks, MD) to liquid LBG prior to sterilization. Sabouraud dextrose agar (SDA) was prepared using Sabouraud
dextrose broth (Sigma Aldrich; St. Louis, MO) per manufacturer's
recommendations with 1.5% w/v bacto agar. Agar media containing
100 mM CRN-HCl was prepared by first cooling liquid agar medium in
a water bath to 56 °C, to which CRN-HCl (F.W. 149.6; Sigma-Aldrich
St. Louis, MO, USA) was then added. Adding CRN-HCl to agar media
prior to sterilization prevents cross-linking and solidification; after
mixing to solubilize CRN-HCl, plates were poured. LBG or SDA agar
media containing antibiotics were prepared by addition of a combined
penicillin and streptomycin solution (Invitrogen; Grand Island, NY) to
a final concentration of 100 I.U./mL and 100 μg/mL respectively, and
ampicillin solution (Fisher Bio Reagents; Fair Lawn, NJ) to a final
concentration of 100 μg/mL with media below 56 °C and immediately
prior to pouring.
2.3 วัฒนธรรมสื่อ
ของเหลว lbg เตรียมตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( McDonald et al . ,
2012 ) และตามที่ระบุไว้ข้างต้น NUMB3RS เตรียมเพิ่ม
1.5 % ( w / v ) Bacto ( BD ; ประกายไฟ , MD ) lbg เหลวก่อนการฆ่าเชื้อ sabouraud dextrose agar ( SDA ) เตรียมใช้ sabouraud
ซุปเดกซ์โทรส ( ซิกม่า Aldrich ; St . Louis , MO ) ต่อการให้
ผู้ผลิตที่มี 1.5 % W / V Bacto วุ้นอาหารวุ้นที่มี
HCl CRN 100 มม. เตรียมก่อนกลางวุ้นเหลวใน
อาบน้ำเย็น 56 ° C ซึ่ง CRN HCl ( f.w. 149.6 ; ซิกม่า Aldrich
St . Louis , MO , USA ) ได้เพิ่ม เพิ่ม CRN HCl กับอาหารวุ้น
ก่อนที่จะฆ่าเชื้อป้องกันการเชื่อมโยง และการทำให้ ; หลังจาก
ผสมเพื่อ solubilize CRN HCl , จานถูกเท lbg sda agar
หรือสื่อที่มียาปฏิชีวนะ เตรียมเพิ่มรวม
เพนนิซิลลิน และสเตร็ปโตมัยซิน โซลูชั่น ( Invitrogen ; เกาะแกรนด์ , นิวยอร์ก )
มีความเข้มข้นสุดท้าย 100 ไอยู / ml และ 100 μกรัม / มิลลิลิตร ตามลำดับ และ เมอรีล สตรีป โซลูชั่น ( Fisher ชีวภาพสารเคมี
; ยุติธรรมสนามหญ้า , NJ ) สุดท้าย
μความเข้มข้น 100 กรัม มิลลิลิตรกับสื่อด้านล่าง 56 ° C และทันที
ก่อนเท
การแปล กรุณารอสักครู่..
