Enzyme assayMnP was assayed by meas

Enzyme assay
MnP was assayed by measuring optical density at
270nm (ε=11.59 mM-1cm-1) and at 20℃ on the basis of
the oxidation of MnSO4 (Wariishi, 1992). One unit of
enzyme activity was defined to be amount of enzyme
that oxidize 1μmol of substrate per minute. The standard
reaction mixture contained 50 mM malonate buffer, pH
3.5, 5 mM MnSO4, 20μM H2O2 and proper concentration
(around 0.07μg/ml) of MnP from P. crassa WD1694. For
determination of the substrate specificity of MnP, either
2,2’-azino-bis-(3-ethylthiazoline-6-sulfonate) (ABTS)
or 2,6-dimethoxyphenol (DMP) or veratrylalcohol was
added to the reaction mixture and the oxidation was
followed by monitoring optical density at 414 nm (ε=36
mM-1cm-1) for ABTS or at 470 nm (ε= 49.6mM-1cm-1) for
DMP or at 310 nm (ε=9.3mM-1cm-1) for veratryl alcohol,
respectively (Mester et al., 1998, Moreira et al., 1997).
Enzyme reaction was initiated by addition of H2O2.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบเอนไซม์
MnP เป็น assayed โดยวัดความหนาแน่นออปติคัลที่
270nm (ε = 11.59 มม.-1 ซม.-1) และ ที่ 20℃ บนพื้นฐานของ
ออกซิเดชันของ MnSO4 (Wariishi, 1992) หนึ่งหน่วย
เอนไซม์ถูกกำหนด จำนวนเอนไซม์
ที่ออก 1μmol ของพื้นผิวต่อนาที มาตรฐาน
ปฏิกิริยาผสมอยู่ 50 มม. malonate บัฟเฟอร์ pH
3.5, 5 มม. MnSO4, 20μM H2O2 และความเข้มข้นเหมาะสม
(ประมาณ 0.07μg / ml) ของ MnP จาก P. crassa WD1694 สำหรับ
กำหนด specificity พื้นผิวของ MnP,
2,2'-azino-bis-(3-ethylthiazoline-6-sulfonate) อย่างใดอย่างหนึ่ง (รเรียน)
หรือ 2,6-dimethoxyphenol (DMP) หรือ veratrylalcohol
เพิ่มผสมปฏิกิริยาการเกิดออกซิเดชันได้
ตามตรวจสอบความหนาแน่นออปติคัลที่ 414 nm (ε = 36
มม.-1 ซม.-1) รเรียน หรือ ที่ 470 nm (ε = 49.6 มม.-1 ซม.-1) สำหรับ
DMP หรือ 310 nm (ε = 9.3 มม.-1 ซม.-1) สำหรับแอลกอฮอล์ veratryl,
ตามลำดับ (Mester et al., 1998, al. Moreira ร้อยเอ็ด 1997)
เอนไซม์ปฏิกิริยาเป็นจุดเริ่มต้น โดยเพิ่ม H2O2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เอนไซม์ในซีรั่มโดยการวัดความหนาแน่นของ MNP

270nm ( แสงที่ε = 11.59 mm-1cm-1 ) และ 20 ℃บนพื้นฐานของการเกิดออกซิเดชันของ mnso4
( wariishi , 1992 ) หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ถูกกำหนดให้เป็น

ว่าปริมาณของเอนไซม์ออกซิไดซ์ ( 1 μโมลต่อนาที ผสมปฏิกิริยามาตรฐาน
มีบัฟเฟอร์มาโลเนท 50 มม. M
3 mnso4 5 มิลลิเมตร แบตเตอรี่และความเข้มข้นที่เหมาะสมμ
M 20( ประมาณ 0.07 μ g / ml ) ของ MNP จากหน้า crassa wd1694 . สำหรับ
การหาพื้นผิวความจำเพาะของ MNP เหมือนกัน
2 , 2 ' - azino bis - ( 3-ethylthiazoline-6-sulfonate ) ( Abbr )
หรือ 2,6-dimethoxyphenol ( DMP ) หรือ veratrylalcohol คือ
เพิ่มปฏิกิริยาผสม และตามด้วยการเกิด
ซิกแซ็กที่ 414 nm ( ε = 36
mm-1cm-1 ) Abbr หรือที่ 470 nm ( ε =
49.6mm-1cm-1 )DMP หรือ 310 nm ( ε = 9.3mm-1cm-1 ) สำหรับ veratryl แอลกอฮอล์
ตามลำดับ ( Mester et al . , 1998 , โมไรร่า et al . , 1997 ) เริ่มโดยเอนไซม์ปฏิกิริยา
เพิ่มแบต .