4. CAV-induced apoptosis Electron m

4. CAV-induced apoptosis Electron microscopic observations of thymuses from chickens experimentally infected with CAV at 1 day of age showed the presence of apoptotic bodies in the thymocytes, and similar changes were also observed in CAV-infected lymphoblastoid cell lines [18]. Agarose gel electrophoresis of
DNA extracted from thymuses of CAV-infected birds and from infected cell lines showed the characteristic pattern of apoptosis-specific nucleo-somal laddering. It was concluded that CAV causes apoptosis of thymocytes in vivo, and of lymphoblastoid cells following in vitro infection [18]. The induction of apoptosis by CAV has been studied in some detail [19]. The CAV genome has been shown to incorporate three overlapping open reading frames (ORFs) which code for three viral proteins designated VP1, VP2 and VP3, all of which are expressed in CAV infected cells. Only VP1 is present in puri®ed virus particles and is considered to be the capsid protein of CAV [20]. Studies with monoclonal antibodies demonstrated a close relationship between the non-structural protein VP3 and apoptotic structures [21]. It was shown that soon after virus infection of transformed lymphoblastoid cells in vitro, VP3 can be detected in close association with nuclear chromatin. As the virus infection proceeds, and apoptosis of the infected cells progresses, the VP3 protein was demonstrated in
aggregated form within the apoptotic structures [21]. It was also shown that VP3 alone was capable of inducing apoptosis in T lymphoblastoid cells. Transfection of the cells with an expression vector containing only the VP3 gene resulted in transient expression of VP3 proteinand apoptosis of the cells [21]. However, in similar transfection studies with non-transformed avian cells (chicken embryo fibroblasts) or with non-transformed human cell lines, VP3 failed to induce apoptosis, suggesting that its activity was limited to transformed cells [21,22]. The mechanism by which the virus induces apoptosis in chicken thymocytes in vivo therefore remains to be explained. Because of its close association with the development of apoptosis in transformed cells, the
name apoptin was suggested for the VP3 protein[23]. The affinity which VP3 shows for nuclear chromatin has been attributed to its highly proline rich composition which resembles nuclear location signals in some areas [19]. It has been suggested that binding of VP3 (apoptin) to chromatin may disturb the supercoiled structure,
resulting in fragmentation and aggregation, or that the proline-rich character of apoptin may act as an activation signal for apoptosis endonucleases or may indirectly induce gene sequences which mediate apoptosis [19].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

4. CAV-เกิด apoptosis ข้อสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนจากไก่ experimentally ติดเชื้อ CAV ที่อายุ 1 วัน thymuses พบของ apoptotic เนื้อ thymocytes และการเปลี่ยนแปลงคล้ายยังสุภัคบรรทัดเซลล์ติดเชื้อ CAV lymphoblastoid [18] Electrophoresis เจ Agarose ของดีเอ็นเอแยก จาก thymuses ของนกที่ติดเชื้อ CAV และเซลล์ที่ติดเชื้อเส้นแสดงรูปลักษณะของ apoptosis เฉพาะ nucleo somal laddering มีสรุปว่า CAV ทำให้เกิด apoptosis ของ thymocytes ในสัตว์ทดลอง และ lymphoblastoid เซลล์ต่อการติดเชื้อในหลอด [18] มีการศึกษาที่มีการเหนี่ยวนำ apoptosis โดย CAV ในรายละเอียดบางอย่าง [19] จีโนม CAV ได้รับการแสดงการรวมสามซ้อนเปิดอ่านเฟรม (ORFs) ซึ่งรหัสสำหรับโปรตีนไวรัสสามกำหนด VP1, VP2 และ VP3 ซึ่งทั้งหมดถูกแสดงในเซลล์ติดเชื้อ CAV เพียง VP1 อยู่ในปู ® ed อนุภาคไวรัส และได้ โปรตีน capsid ของ CAV [20] ศึกษากับแอนตี้ monoclonal แสดงเป็นความสัมพันธ์ระหว่างโครงสร้างที่ไม่ใช่โปรตีน VP3 และโครงสร้างของ apoptotic [21] เป็นแสดงว่า หลังจากการติดเชื้อไวรัสในเซลล์ lymphoblastoid แปรรูป VP3 สามารถพบในความสัมพันธ์ใกล้ชิดกับนิวเคลียร์โครมาติน ดำเนินการติดเชื้อไวรัส และ apoptosis ของยะเซลล์ติดเชื้อ โปรตีน VP3 ถูกแสดงในแบบฟอร์มที่รวมอยู่ภายในโครงสร้างของ apoptotic [21] มันถูกแสดงว่า VP3 เพียงอย่างเดียวไม่สามารถ inducing apoptosis ในเซลล์ lymphoblastoid T ผล transfection ของเซลล์กับเวกเตอร์นิพจน์ประกอบด้วยเฉพาะยีน VP3 ในนิพจน์แบบฉับพลันของ VP3 proteinand apoptosis ของเซลล์ [21] อย่างไรก็ตาม ในการศึกษาการ transfection ได้คล้าย กับไม่เปลี่ยนนกเซลล์ (ไก่อ่อน fibroblasts) หรือเซลล์มนุษย์แปลงไม่ บรรทัด VP3 ล้มเหลวในการก่อให้เกิด apoptosis แนะนำที่ มีจำกัดกิจกรรมของแปลงเซลล์ [21,22] กลไกซึ่งไวรัสก่อให้เกิด apoptosis ในไก่ thymocytes ในสัตว์ทดลองจึงยังคงสามารถอธิบาย เนื่องจาก มีความสัมพันธ์ใกล้ชิดกับการพัฒนาของ apoptosis ในเซลล์แปรรูป การชื่อ apoptin แนะนำสำหรับโปรตีน VP3 [23] มีการบันทึกความสัมพันธ์ซึ่ง VP3 แสดงโครมาตินนิวเคลียร์สูง proline อุดมไปด้วยองค์ประกอบภาพซึ่งมีลักษณะที่ตั้งนิวเคลียร์สัญญาณในบางพื้นที่ [19] มีการแนะนำการผูก VP3 (apoptin) กับโครมาตินอาจรบกวนโครงสร้าง supercoiledในการกระจายตัวและการรวม หรือว่า อักขระ proline ริชของ apoptin อาจทำหน้าที่เป็นการเปิดใช้งานสัญญาณสำหรับ apoptosis endonucleases หรืออาจโดยทางอ้อมทำให้เกิดลำดับยีนซึ่งบรรเทา apoptosis [19]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

4. การตายของเซลล์ CAV ที่เกิดอิเล็กตรอนสังเกตกล้องจุลทรรศน์ thymuses ไก่ที่ติดเชื้อจากการทดลองกับ CAV ที่ 1 วันที่อายุแสดงให้เห็นว่าการปรากฏตัวของร่างกายที่เกิด apoptosis ใน thymocytes และเปลี่ยนแปลงที่คล้ายกันยังพบได้ใน CAV เชื้อเซลล์ lymphoblastoid [18] ข่าวคราว Agarose
ของดีเอ็นเอที่สกัดจากthymuses ของนกที่ติดเชื้อ CAV และจากเซลล์ที่ติดเชื้อพบว่ามีรูปแบบลักษณะของการตายเฉพาะ Nucleo-Somal laddering ก็สรุปได้ว่าการตายของเซลล์ทำให้เกิด CAV ของ thymocytes ในร่างกายและเซลล์ lymphoblastoid ต่อไปนี้ในการติดเชื้อในหลอดทดลอง [18] การเหนี่ยวนำของการตายโดย CAV ได้รับการศึกษาในรายละเอียดบาง [19] จีโนม CAV ได้รับการแสดงที่จะรวมสามทับซ้อนเฟรมอ่านเปิด (ORFs) ซึ่งสำหรับสามโปรตีนไวรัสกำหนด VP1, VP2 และ VP3 ซึ่งทั้งหมดนี้จะแสดงใน CAV เซลล์ที่ติดเชื้อ เฉพาะ VP1 อยู่ในอนุภาคไวรัสpuri®edและจะถือเป็นโปรตีน capsid ของ CAV [20] การศึกษาที่มีโคลนอลแอนติบอดีแสดงให้เห็นถึงความสัมพันธ์ที่ใกล้ชิดระหว่าง VP3 โปรตีนที่ไม่ใช่โครงสร้างและโครงสร้าง apoptotic [21] มันแสดงให้เห็นว่าเร็ว ๆ นี้หลังจากการติดเชื้อไวรัสเปลี่ยนเซลล์ lymphoblastoid ในหลอดทดลอง, VP3 สามารถตรวจพบได้ในการเชื่อมโยงอย่างใกล้ชิดกับโครมาตินิวเคลียร์ ในฐานะที่เป็นไวรัสเงินการติดเชื้อและการตายของเซลล์ที่ติดเชื้อดำเนินโปรตีน VP3
ถูกแสดงให้เห็นในรูปแบบที่รวมอยู่ภายในโครงสร้างapoptotic เมื่อ [21] มันก็แสดงให้เห็นว่าเป็นคนเดียวที่ VP3 ความสามารถในการกระตุ้นให้เกิดการตายของเซลล์ในเซลล์ T lymphoblastoid transfection ของเซลล์ที่มีเวกเตอร์ที่มีเพียงการแสดงออกของยีน VP3 ผลในการแสดงออกชั่วคราวของ VP3 proteinand การตายของเซลล์ [21] อย่างไรก็ตามในการศึกษา transfection คล้ายกันด้วยความที่ไม่ได้เปลี่ยนเซลล์นก (ไก่เซลล์ตัวอ่อน) หรือที่ไม่ได้เปลี่ยนเซลล์ของมนุษย์ VP3 ล้มเหลวที่จะทำให้เกิดการตายของเซลล์บอกว่ากิจกรรมของถูก จำกัด ให้เซลล์เปลี่ยน [21,22] กลไกที่ก่อให้เกิดไวรัส apoptosis ใน thymocytes ไก่ในร่างกายจึงยังคงที่จะอธิบาย เพราะความสัมพันธ์ที่ใกล้ชิดกับการพัฒนาของการตายของเซลล์ในเซลล์เปลี่ยนที่ชื่อ apoptin ได้รับการแนะนำสำหรับโปรตีน VP3 [23]
ความสัมพันธ์ที่ VP3 แสดงให้เห็นว่าโครมาตินิวเคลียร์ที่ได้รับมาประกอบกับองค์ประกอบของโพรลีนสูงที่อุดมไปด้วยซึ่งคล้ายกับสัญญาณที่ตั้งนิวเคลียร์ในบางพื้นที่ [19] มันได้รับการชี้ให้เห็นว่ามีผลผูกพันของ VP3 (apoptin) เพื่อโครมาอาจรบกวนโครงสร้าง supercoiled,
ส่งผลให้การกระจายตัวและการรวมหรือว่าตัวละครโพรลีนที่อุดมไปด้วยของ apoptin อาจทำหน้าที่เป็นสัญญาณการเปิดใช้งานสำหรับ endonucleases apoptosis หรือทางอ้อมอาจทำให้เกิดลำดับยีนที่ เป็นสื่อกลางในการตาย [19]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

4 . จากการสังเกตของกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ( CAV thymuses จากไก่โดยการติดเชื้อ CAV ใน 1 วัน ของอายุ พบการปรากฏตัวของร่างกายในกลุ่มที่มีใน thymocytes และการเปลี่ยนแปลงที่คล้ายกันพบการติดเชื้อ CAV ในเซลล์ lymphoblastoid [ 18 ] เจลอิเลคโตรโฟรีซีสของ
ดีเอ็นเอที่สกัดได้จาก thymuses นก CAV ที่ติดเชื้อและจากเซลล์ติดเชื้อพบแบบแผนลักษณะการตายแบบ apoptosis เฉพาะนิวคลีโอ somal laddering . สรุปได้ว่า สาเหตุการตาย ของ thymocytes CAV ในสัตว์ทดลอง และเซลล์ในหลอดทดลอง lymphoblastoid ดังต่อไปนี้การติดเชื้อ [ 18 ] เหนี่ยวนำให้เกิดการตายแบบ apoptosis โดย Cav ได้ศึกษาในรายละเอียดบางอย่าง [ 19 ]The Cav จีโนมได้ถูกแสดงรวมสามเฟรมเปิดอ่านซ้อน ( orfs ) ซึ่งรหัสสามไวรัสโปรตีนเขต vp1 vp2 vp3 , และทั้งหมดที่แสดงในเซลล์ที่ติดเชื้อ Cav . เพียง vp1 เป็นปัจจุบันใน Puri ®เอ็ดอนุภาคไวรัส และถือเป็นโปรตีนแคปซิดของทหารราบ [ 20 ]การศึกษากับโมโนโคลนอลแอนติบอดีย์แสดงให้เห็นถึงความสัมพันธ์ที่ใกล้ชิดระหว่างที่ไม่ใช่โครงสร้างโปรตีนและกลุ่มที่มีโครงสร้าง vp3 [ 21 ] พบว่าหลังจากการติดเชื้อไวรัสของแปลง lymphoblastoid เซลล์ในหลอดทดลอง , vp3 สามารถตรวจพบในความสัมพันธ์ใกล้ชิดกับนิวเคลียร์ขด . เป็นไวรัสอะไร , และ apoptosis ในเซลล์ที่ติดเชื้อดำเนินการ vp3 โปรตีน พบว่าในกลุ่มที่มีโครงสร้างแบบ
รวมภายใน [ 21 ] พบว่า vp3 คนเดียว สามารถกระตุ้นเซลล์ใน lymphoblastoid เซลล์ สำหรับเซลล์ที่มีการแสดงออกของเวกเตอร์ที่มีเฉพาะ vp3 ส่งผลให้มีการแสดงออกของยีน vp3 proteinand apoptosis ของเซลล์ [ 21 ] อย่างไรก็ตามในการศึกษาสำหรับคล้ายคลึงกับนก ( ไม่แปลงเซลล์ตัวอ่อนไก่ไฟโบรบลาสต์ ) หรือไม่เปลี่ยนเซลล์ของมนุษย์ vp3 ล้มเหลวที่จะกระตุ้นเซลล์บอกว่า กิจกรรม เป็น จำกัด เพื่อเปลี่ยนเซลล์ [ 21,22 ] กลไกที่ทำให้เซลล์ไวรัสในไก่ thymocytes ในร่างกายจึงยังคงที่จะอธิบายเนื่องจากสมาคมใกล้ชิดกับการพัฒนาของ apoptosis ในเซลล์ที่แปรรูป
ชื่อ apoptin เป็นข้อเสนอแนะสำหรับ vp3 โปรตีน [ 23 ] affinity ซึ่งแสดงการ vp3 นิวเคลียร์ได้ถูกว่าสูงอุดมไปด้วยองค์ประกอบที่คล้ายกับการนิวเคลียร์ที่ตั้งสัญญาณในบางพื้นที่ [ 19 ]จะได้รับการชี้ให้เห็นว่า การจับ vp3 ( apoptin ) ขดอาจรบกวนโครงสร้าง supercoiled
เป็นผลในการรวม , หรือที่อุดมไปด้วยตัวละครของโพรลีน apoptin อาจจะทำท่าเป็นสัญญาณการเกิดหรืออาจเกิดลำดับยีนสงบเงียบทางอ้อมซึ่งเป็นเซลล์




[ 19 ]