LAB were isolated from kimchi. Kimc

LAB were isolated from kimchi. Kimchi samples (cabbage
kimchi) were purchased at local markets at Jinju, Gyeongnam, Republic
of Korea during the summer season in 2014. Kimchi samples
(20 g) were mixed with 80 ml of 0.1% peptone water and homogenized
with Stomacher 80 (Seward,Worthing, UK). Serially diluted
kimchi samples were spread on deMan Rogosa Sharpe (MRS, Difco,
Becton Dickinson Co., Sparks, MD, USA) agar plates and incubated
at 30
C statically. Isolated strains were examined for their acid
tolerance, bile salts tolerance, and activities of bile salt hydrolase
and other useful enzymes. For tolerance against acid and bile salts,
the overnight cultures of isolates were spotted on MRS agar plates
adjusted to pH 2.0 or MRS agar plates supplemented with 0.3% bile
salts (cholic acid sodium salt 50% and deoxycholic acid sodium salt
50%, SigmaeAldrich, 48305). For enzyme activities, the overnight
cultures were spotted on MRS agar plates supplemented with 0.5%
(w/v) taurodeoxycholic acid (Sigma) or 5-bromo-4-chloro-3-
indolyl-b-D-galactopyranoside (X-Gal) or 5-bromo-4-chloro-3-
indolyl-a-D-galactopyranoside (X-a-Gal). The plates were incubated
for 24 h at 30
C. The presence of each enzyme activity was
visualized as an altered colony morphology (clear zone around the
colony and color of the colony) as compared with the negative
control (Lactococcus lactis MG1363). Identification of selected
strains was done by using API 50CHL kit (BioMerieux, Marcy
L'Etoile, France) and 16S rRNA gene sequencing. The universal
primers, 27F and 1492R, were used to amplify 16S rRNA genes: 27F
(50-AGAGTTTGAT CMTGGCTCAG-30) and 1492R
(50eTACGGYTACCTTGTTAC GACTT-30) (Lee et al., 2012). Amplified
fragments were examined by agarose gel electrophoresis and purified
using a PCR purification kit (FavorPrep PCR purification mini
kit, Favorgen, Ping-Tung, Taiwan). The sequences were determined
at Cosmogenetech (Seoul, Korea) and BLAST program was used to
find homologous sequences in the database

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ห้องปฏิบัติได้แยกต่างหากจากกิมจิ ตัวอย่างกิมจิ (กะหล่ำปลีกิมจิ) ซื้อในตลาดท้องถิ่นที่จินจู Gyeongnam สาธารณรัฐของเกาหลีในช่วงฤดูร้อนในปี 2557 ตัวอย่างกิมจิ(20 กรัม) ผสมกับ 0.1% peptone น้ำ 80 มิลลิลิตร และ homogenizedมีแผงประดับหน้าอก 80 (เซวาร์ด บางซื่อ สหราชอาณาจักร) เจือจาง seriallyตัวอย่างกิมจิถูกแพร่กระจายใน deMan Rogosa Sharpe (MRS, Difcoบริษัทดิกคินสัน Becton ประกายไฟ MD สหรัฐอเมริกา) วุ้นแผ่น และได้รับการกกที่ 30 C คอน แยกสายพันธุ์ถูก examined กรดของพวกเขาความอดทน ความอดทนเกลือน้ำดี และกิจกรรมของเกลือน้ำดี hydrolaseและเอนไซม์ที่มีประโยชน์อื่น ๆ สำหรับค่าเผื่อต่อกรดและน้ำดีเกลือวัฒนธรรมข้ามแยกถูกด่างในจานอาหารเลี้ยงเชื้อ MRSปรับค่า pH 2.0 หรือจานอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS เสริม ด้วยน้ำดี 0.3%เกลือ (cholic กรดโซเดียมเกลือ 50% และเกลือโซเดียมกรด deoxycholic50%, SigmaeAldrich, 48305) สำหรับกิจกรรมของเอนไซม์ การค้างคืนวัฒนธรรมถูกด่างในจานอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS เสริม ด้วย 0.5%กรด taurodeoxycholic (w/v) (Sigma) หรือ 5-โบรโม-4-chloro-3 -indolyl-b-D-galactopyranoside (X-Gal) หรือ 5-โบรโม-4-chloro-3 -indolyl-a-D-galactopyranoside (X เป็น Gal) แผ่นได้รับการกก24 ชั่วโมงที่ 30 c การปรากฏตัวของแต่ละกิจกรรมของเอนไซม์ได้แสดงเป็นภาพเป็นการอาณานิคมมีการเปลี่ยนแปลงสัณฐาน (โซนชัดเจนใกล้เคียงกับอาณานิคมและสีของอาณานิคม) เมื่อเทียบกับขั้วลบการควบคุม (Lactococcus lactis MG1363) เลือกรหัสของสายพันธุ์ที่ทำ โดยใช้ API 50CHL kit (BioMerieux มาร์ซี่L'Etoile ฝรั่งเศส) และ 16S rRNA ยีนลำดับ สากลไพรเมอร์ 27F และ 1492R ใช้ในการขยายยีน 16S rRNA: 27F(50-AGAGTTTGAT CMTGGCTCAG-30) และ 1492R(50eTACGGYTACCTTGTTAC GACTT-30) (Lee et al. 2012) ขยายถูกตรวจสอบ โดยอิเจ agarose และบริสุทธิ์ใช้ชุดฟอก PCR (FavorPrep PCR ฟอกมินิชุด Favorgen ปิงตุง ไต้หวัน) ลำดับที่กำหนดCosmogenetech (โซล เกาหลี) และระเบิด โปรแกรมถูกใช้ในการเซทจะมีลำดับการค้นหาในฐานข้อมูล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

LAB ที่แยกได้จากกิมจิ ตัวอย่างกิมจิ (กะหล่ำปลี
กิมจิ) กำลังซื้อในตลาดท้องถิ่นที่ Jinju, Gyeongnam, สาธารณรัฐ
เกาหลีในช่วงฤดูร้อนในปี 2014 ตัวอย่างกิมจิ
(20 กรัม) ได้รับการผสมกับ 80 มิลลิลิตรของน้ำเปปโตน 0.1% และหดหาย
กับ Stomacher 80 (ซีเวิร์ด Worthing, สหราชอาณาจักร) ปรับลดลำดับ
ตัวอย่างกิมจิถูกแพร่กระจายบน Deman Rogosa ชาร์ป (MRS, Difco,
Becton ดิกคินสัน จำกัด , ประกายไฟ, MD, USA) วุ้นแผ่นและบ่ม
ที่ 30 องศาเซลเซียสแบบคงที่ สายพันธุ์ที่แยกได้มีการตรวจสอบของพวกเขาสำหรับกรด
อดทนความอดทนเกลือน้ำดีและกิจกรรมของ hydrolase เกลือน้ำดี
และเอนไซม์ที่มีประโยชน์อื่น ๆ สำหรับความอดทนกับกรดและน้ำดีเกลือ
วัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนของเชื้อเป็นด่างบนจาน MRS agar
ปรับค่าพีเอช 2.0 หรือแผ่น MRS agar เสริมด้วยน้ำดี 0.3%
เกลือ (กรดโคลิเกลือโซเดียม 50% และเกลือโซเดียมกรด deoxycholic
50%, SigmaeAldrich, 48305) สำหรับกิจกรรมของเอนไซม์ในชั่วข้ามคืน
วัฒนธรรมเป็นด่างบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS เสริมด้วย 0.5%
(w / v) กรด taurodeoxycholic (ซิกม่า) หรือ 5 Bromo-4-chloro-3-
indolyl-BD-galactopyranoside (X-แกลลอน) หรือ 5 -bromo-4-chloro-3-
indolyl-aD-galactopyranoside (XA-แกลลอน) แผ่นถูกบ่ม
เป็นเวลา 24 ชั่วโมงวันที่ 30 องศาเซลเซียส การปรากฏตัวของเอนไซม์แต่ละคนถูก
มองเห็นเป็นลักษณะทางสัณฐานวิทยาอาณานิคมเปลี่ยนแปลง (โซนที่ชัดเจนรอบ
อาณานิคมและสีของอาณานิคม) เมื่อเทียบกับเชิงลบ
Control (Lactococcus lactis MG1363) บัตรประจำตัวของการคัดเลือก
สายพันธุ์ที่ได้กระทำโดยใช้ชุด API 50CHL (BIOMERIEUX ร์ซี่
L'Etoile, ฝรั่งเศส) และ 16S rRNA ยีนลำดับ สากล
ไพรเมอร์, และ 27 1492R ถูกนำมาใช้ในการขยายยีน 16S rRNA: 27
(50 AGAGTTTGAT CMTGGCTCAG-30) และ 1492R
(50eTACGGYTACCTTGTTAC GACTT-30) (. Lee et al, 2012) ขยาย
ชิ้นส่วนได้รับการตรวจสอบโดยข่าวคราว agarose และบริสุทธิ์
โดยใช้ชุดฟอก PCR (PCR FavorPrep บริสุทธิ์มินิ
ชุด Favorgen ปิงตุงไต้หวัน) ลำดับการได้รับการพิจารณา
ที่ Cosmogenetech (กรุงโซลประเทศเกาหลี) และโปรแกรมการระเบิดถูกใช้ในการ
หาลำดับคล้ายคลึงกันในฐานข้อมูล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แล็บทดลองแยกจากกิมจิ ตัวอย่างกิมจิ ( กะหล่ำปลีกิมจิ ) ซื้อในตลาดท้องถิ่นที่จินจู กยองนัม สาธารณรัฐ ,เกาหลีในช่วงฤดูร้อนในปี 2014 ตัวอย่างของกิมจิ( 20 กรัม ) ผสมกับ 80 มิลลิลิตรของน้ำและ 0.1% ตามลำดับบดกับแผงประดับหน้าอก 80 ( ซีเวิร์ดเบอโร , สหราชอาณาจักร , ) เป็นเจือจางตัวอย่างกิมจิถูกแพร่กระจายในดีเมิน rogosa ชาร์ป ( นาง difco , ,เบคตอนดิกคินสัน Co . , ประกายไฟ , MD , USA ) วุ้นแผ่น และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสได้ด้วย . เพื่อตรวจแยกสายพันธุ์ของกรดความอดกลั้น , ความอดทนและกิจกรรมน้ำดีเกลือ , เกลือน้ำดีไฮโดรเลสและเอนไซม์ที่มีประโยชน์อื่น ๆ ทนกับกรดและเกลือน้ำดีค้างคืน วัฒนธรรมของสายพันธุ์เป็นด่างบนนางวุ้นแผ่นปรับ pH 2.0 หรือนางวุ้นแผ่นเสริม 0.3% น้ำดีเกลือ ( เกลือโซเดียมกรดโคลิก 50% และเกลือโซเดียมของกรด deoxycholic50% sigmaealdrich 48305 , ) สำหรับกิจกรรมเอนไซม์ ค้างคืนวัฒนธรรมที่ถูกพบบนนางวุ้นแผ่นเสริม 0.5 เปอร์เซ็นต์( w / v ) taurodeoxycholic acid ( Sigma ) หรือ 5-bromo-4-chloro-3 -indolyl-b-d-galactopyranoside ( x-gal ) หรือ 5-bromo-4-chloro-3 -indolyl-a-d-galactopyranoside ( x-a-gal ) จานถูกบ่ม24 H 30 C . การแสดงตนของแต่ละกิจกรรมเอนไซม์ปรากฏการณ์ที่เปลี่ยนแปลงลักษณะของโคโลนี ( ใสๆอาณานิคมและสีของอาณานิคม ) เมื่อเทียบกับเชิงลบการควบคุม ( แลคโตค คัส lactis mg1363 ) การเลือกสายพันธุ์ที่ถูกทำโดยใช้ API 50chl Kit ( biomerieux มาร์ซี่l"etoile , ฝรั่งเศส ) และลำดับเบส 16S rRNA ยีน . ถ้วนหน้าไพรเมอร์ 27f 1492r และถูกใช้ขยายเสียงเบส 16S rRNA ยีน : 27f( 50-agagtttgat cmtggctcag-30 ) และ 1492r( 50etacggytaccttgttac gactt-30 ) ( ลี et al . , 2012 ) อัตราชิ้นส่วนถูกตรวจสอบโดยเจลอิเลคโตรโฟรีซีสและบริสุทธิ์การใช้เทคนิค PCR ( favorprep บริสุทธิ์บริสุทธิ์ชุดมินิชุด favorgen ปิงตุง ไต้หวัน ) อนุกรมถูกกำหนดที่ cosmogenetech ( โซล เกาหลี ) และโปรแกรมที่ใช้ระเบิดค้นหาเปรียบเทียบลำดับในฐานข้อมูล