2.2. Isolation, purification and co

2.2. Isolation, purification and conservation of mycorrhizal fungi

Mycorrhizal fungi were isolated using an improved process as used by Nontachaiyapoom et al. (2010). Briefly, hand sections of roots (Fig. 1c) were observed for the presence of pelotons with a light microscope. Then colonized roots were surface-sterilized in 70% (v/v) ethanol for 40 s, 2.5% (v/v) NaClO 2 min and rinsed three times in sterile distilled water. Ten sections per root, obtained with a sterile blade, were placed on the potato dextrose agar (PDA) containing 50 μg/ml streptomycin, and 100 μg/ml tetracycline. Samples were incubated in the darkness at 25 °C, and observed daily for 30 days under stereomicroscope. Hyphal tips of fungi were transferred to fresh PDA for purification. All isolates growing on the PDA for one week were inoculated into distilled 10% glycerol and placed in ambient temperature for 4 days and then deposited in the ultra cold storage freezer (−80 °C) of Laboratory of Mycology, Biotechnology Center, Institute of Medicinal Plant Development (IMPLAD), and Chinese Academy of Medical Sciences (CAMS).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การแยกบริสุทธิ์และการอนุรักษ์ mycorrhizal เชื้อราเชื้อราที่แยกได้โดยใช้กระบวนการการปรับปรุงที่ใช้โดย Nontachaiyapoom et al, (2010) สั้น ๆ ส่วนมือของราก (รูปที่ 1C.) ถูกตั้งข้อสังเกตการปรากฏตัวของ pelotons ด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง แล้วรากอาณานิคมถูกพื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อใน 70% (v / v) เอทานอล 40 S, 2.5% (v / v) NaClO 2 นาทีและล้างสามครั้งในน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อ สิบส่วนต่อรากที่ได้รับกับใบมีดที่ผ่านการฆ่าเชื้อถูกวางลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose (PDA) ที่มี 50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร streptomycin, และ 100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร tetracycline ตัวอย่างถูกบ่มในความมืดที่ 25 ° C และสังเกตทุกวันเป็นเวลา 30 วันแล้วภายใต้กล้องจุลทรรศน์ เคล็ดลับเส้นใยของเชื้อราถูกโอนไปยัง PDA สดสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ ทั้งหมดแยกการเจริญเติบโตใน PDA เป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์ถูกเชื้อเข้ากลั่นกลีเซอรีน 10% และวางไว้ในอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 4 วันแล้วฝากไว้ในตู้แช่แข็งเก็บในตู้เย็นเป็นพิเศษ (-80 ° C) ห้องปฏิบัติการของเห็ด, ศูนย์เทคโนโลยีชีวภาพสถาบันวิจัยสมุนไพร การพัฒนาโรงงาน (IMPLAD) และจีน Academy of Sciences แพทย์ (ถ่ายทอด)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . การแยกบริสุทธิ์และรักษาเชื้อราไมโคไรซาเชื้อราไมโคไรซา คัดแยกโดยใช้การปรับปรุงกระบวนการที่ใช้โดย nontachaiyapoom et al . ( 2010 ) สั้น ๆ , มือในส่วนของราก ( ภาพที่ 1c ) เป็นสังเกตสำหรับการปรากฏตัวของ pelotons ด้วยกล้องจุลทรรศน์ แล้วประเภทรากถูกฆ่าเชื้อที่ผิว 70 % ( v / v ) เอทานอล 40 s 2.5 % ( v / v ) naclo 2 นาทีและล้าง 3 ครั้งฆ่าเชื้อน้ำกลั่น 10 ส่วน ต่อรากได้ด้วยใบมีดฆ่าเชื้อ , ถูกวางไว้บนอาหาร Potato Dextrose Agar ( PDA ) บรรจุ 50 μ g / ml และ streptomycin 100 , μ g / ml เตตราซัยคลิน . จำนวนเชื้อในที่มืดที่ 25 ° C และสังเกตทุกวัน เป็นเวลา 30 วัน ภายใต้ stereomicroscope . เคล็ดลับของเส้นใยเชื้อราที่ถูกโอนไปยัง PDA สดบริสุทธิ์ ทุกสายพันธุ์ที่เติบโตบน PDA สำหรับหนึ่งสัปดาห์เชื้อกลั่น 10% กลีเซอรอลและวางไว้ในอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 4 วันแล้วฝากใน Ultra ห้องเย็นตู้แช่ ( − 80 ° C ) ของห้องปฏิบัติการของเห็ด , ศูนย์เทคโนโลยีชีวภาพ สถาบันพัฒนาพืชสมุนไพร ( implad ) , และจีนสถาบันวิทยาศาสตร์การแพทย์ ( กล้อง )