[0101] Summary of Methos -20-307900

สรุป [0101] Methos -20-307900 เซลล์การเพิ่มจำนวน VEGF เกิดเป้าหมาย: Spectrofluorimetric วิธีการวิเคราะห์หาปริมาณมนุษย์การวิเคราะห์หาปริมาณเซลล์การเพิ่มจำนวนกระสายยา: 0.4% DMSO Signif เกณฑ์ Ag: > เพิ่มขึ้น 50% การเพิ่มจำนวนสัมพันธ์กับการตอบสนอง VEGF165คณะทันตแพทยศาสตร์เวลา/อุณหภูมิ: แอท 37 ° C Signif เงื่อนไข Ant. 2 วัน: > 50% ยับยั้ง VEGFissการเพิ่มจำนวนอาจคณะทันตแพทยศาสตร์บัฟเฟอร์ M199 กลาง 10% FBS101.1 g/mL เฮพาริน pH7.4ผลลัพธ์ [0102]ผลลัพธ์ได้แสดงใน Table5 ต่อไปนี้ NGY-1 (รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อย) แสดงกิจกรรมต่อต้าน 1001.tg/mL (สุดท้าย conc.) นำเสนอความโดดเด่น5 ต่อต้านกิจกรรม (140%)[0103] ตาราง 5: กิจกรรมสรุป AK, DS SMO, NYG-1 และ SMOแมว # วิเคราะห์ชื่อชุดข้อมูลจำเพาะพนักงาน Conc เกณฑ์ Ag Ant. Rเนื้อเยื่อ Respสารประกอบ: AK, PT #: 1154011 Meta307900 เซลล์การเพิ่มจำนวน VEGF เกิด 305353 ครวญ 2 100 > ND 50% 12%ครวญ 2 10 > 50% ND 2%สารประกอบ: DS-SMO, PT#:1154009 ng, / mL307900 เซลล์การเพิ่มจำนวน VEGF เกิด 305353 ครวญ 2 100 > ND 50% 14%ครวญ 2 10 > ND 50% 0%สารประกอบ: NYG-1, PT#:1151625 tg/mL307900 เซลล์การเพิ่มจำนวน VEGF เกิด 305353 ครวญ 2 100 > 50% ND 140%ครวญ 2 10 > ND 50% 30%สารประกอบ: SMO, PT1154010 nWmL307900 เซลล์การเพิ่มจำนวน VEGF เกิด 305353 ครวญ 2 100 > ND 50% 14%ครวญ 2 10 > 50% ND 1%[0104] ผลของ IC50/EC50 แสดงใน 6 ตารางต่อไปนี้ การที่ IC50 EC50มีคำนวณค่ารงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยที่ 0.12 น. SU5416 เป็นการเอเจนต์ต้านรู้จักการสร้างหลอดเลือดใหม่ (ปฏิปักษ์)10 [0105] ตาราง 6: IC501ECsoHist พร้อมกันแมว # วิเคราะห์ชื่ออ้างอิงประกอบ 1C 50/ECso ชุด IC50/EC50307900 เซลล์การเพิ่มจำนวน VEGF-เกิดมด SU5416 0.48RM 305353 0.12uM[0106] จากข้างต้น มันจะแสดงว่า รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยสามารถระงับการเพิ่มจำนวน เปิดใช้งานและการสร้างหลอดเลือดใหม่ของ VEGF เกิดจากเซลล์ในเซลล์บุผนังหลอดเลือดของหลอดเลือดตัวอย่าง 15 5[0107] เนื้องอกต่อต้านกิจกรรมของรงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อย(A รงควัตถุสีแดง)จากปาล์มใบเลื่อยถูกระงับ hepatocarcinoma มนุษย์ใน heterograft รุ่นเมาส์เปลือยวัสดุ [0108]20 ที่ NYG-1 รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อย (รงควัตถุสีแดงเตรียมในตกผลึกตัวอย่างที่ 1)Carcinoma เซลล์รายการ: รายการเซลล์มนุษย์ hepatocarcinoma MHCC - 97L (ตับมะเร็งสถาบันของโทรทัศน์ (Shang Hai จีน)) -21-รุ่น heterograft: Nude เมาส์วิธี [0109]มี inoculated lx105 ของเอ็มเอชซี - 97L เซลล์ (hepatocarcinoma มนุษย์เซลล์รายการ) ในด้านขวาของเมาส์เปลือย subcutaneously หนึ่งสัปดาห์ต่อมา 0.1 mg/kg และ 1 mg 5 กก. NYG-1 ถูกดูแล โดยฉีด intraperitoneal เป็นหนู NYG-1 ถูกฉีดเดียวครั้งเดียวแต่ละสัปดาห์ในสัปดาห์ที่ 3 หลังจากนั้น หนูได้เสียสละในวันที่ 25 และแข็งเนื้องอกถูก extirpated ขนาดของแต่ละ มีปรับ โดยปั้ม Vernier เนื้องอกหลังการรักษาครั้งล่าสุดของ NYF-1 และเนื้องอก มีวาดเส้นโค้งการเจริญเติบโต ขนาดเนื้องอกถูกคำนวณดังนี้ ขนาด 10 รองและแกนหลัก โดย Vernier ปั้ม คำนวณเป็น (แกนเล็ก) 2 * วิชา แกน/2[0110] MHCC - 97L เซลล์ถูก incubated ในอากาศ 5% CO2 ที่ 37 องศาเซลเซียส สื่อวัฒนธรรมใช้เป็น DMEM (GIBCO สหรัฐอเมริกา) เสริม ด้วย 10%v/v ยกเลิกความร้อนครรภ์วัวซีรั่มและ 100IU/mL ยาเพนนิซิลลิน G และ 10011g/mL streptomycin15 ผล [0111]แสดงใน Fig.3 (A), ในกลุ่มรักษา NYG-1 เนื้องอกเจริญเติบโตของการรูปแบบเมาส์ heterograft ถูกระงับไว้ในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับปริมาณรังสี โดยเฉพาะ กลุ่มกับ lmg/mL 1 NYG ระงับการเจริญเติบโตของเนื้องอก (ประมาณ 50% ของตัวควบคุม P < 0.01)20 [0112] (B) รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยถูกระงับ VEGF นิพจน์hepatocarcinoma มนุษย์ในรูปแบบเมาส์เปลือย heterograft[0113] ตัวอย่างเนื้องอกของข้างต้นกล่าวถึง (A) หลังจากปรับ homogenized เป็นกลุ่ม และ centrifuged แล้ว จำนวนหลอดเลือดบุผนังหลอดเลือดขยายตัวปัจจัย (VEGF) ใน hepatocarcinoma มนุษย์ถูกวัด โดยการทดสอบ ELISA25 ผลลัพธ์ [0114]แสดงในฟิก 3(B) ในกลุ่มรักษา NYG-1 นิพจน์ของหลอดเลือดบุผนังหลอดเลือดเจริญเติบโตปัจจัย (VEGF) ใน hepatocarcinoma มนุษย์ในรูปแบบเมาส์เปลือย heterograft ถูกระงับไว้ในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับปริมาณ โดยเฉพาะ กลุ่มกับ lmg/มล NYG-1 ห้ามกิจกรรม VEGF มากกว่า 40% ของตัวควบคุมกลุ่มที่ 30 (P < 0.01)ตัวอย่างที่ 6องค์ประกอบ [0115] A ประกอบด้วยรงควัตถุสีแดงจากผลปาล์มใบเลื่อยเป็นการตามกำหนดเตรียมไว้กำหนดส่วนผสม (มิลลิกรัมต่อเม็ด)รงควัตถุสีแดงหรือ ethanolic สารสกัด 50แล็กโทส 110 -22-จุลเซลลูโลส 30ซิลิก้า (SiO2) 5แป้ง 5สุดท้ายน้ำหนัก 200ตัวอย่าง 7[0116] การทดสอบวิธีการระบุส่วนประกอบของรงควัตถุของรงควัตถุสีแดงบริสุทธิ์จากปาล์มใบเลื่อยในตัวอย่าง 15 [0117] ตามคู่มือของ Constituents สารพฤกษเคมีของสมุนไพรดิกราส์และ พืชเศรษฐกิจอื่น ๆ (1992 เจมส์ A ดุ๊ค), (3-แคโรทีนและ tannins จะแสดงเป็นส่วนประกอบของรงควัตถุของปาล์มใบเลื่อยวัน ดังนั้น มีความเป็นไปได้ว่าสาร polyphenol เช่น flavonoid เช่นเป็นกลสารประกอบสองชนิดจะมีส่วนประกอบของรงควัตถุของปาล์มใบเลื่อย การทดสอบสอบ 10 สำหรับสารประกอบ 3 ชนิดดังกล่าวข้างต้นได้รับการดำเนินการ ระบุสารทดสอบตรวจสอบสาร carotenoid [0118] A)ไม่พบมีสาร carotenoid โดย chromatography บางชั้น (TLC) และประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) 15 [0119] B) tannins ทดสอบตรวจสอบ(1) ตรวจสอบทดสอบ โดยคคลอไรด์ III สารละลายสารละลาย III คคลอไรด์ (ส่วนยุบของ FeC13 - 6H 20 ใน 100 mL ของน้ำ 9 กรัม) ผลิตสีสีเขียวสีน้ำตาล ดังนั้น มันจะแนะนำที่รงควัตถุอาจ ประกอบด้วยบีบแทนนิน (proแอนโธไซยานิดิน) ในการทดสอบนี้ สีเขียวน้ำตาล 20 บ่งชี้บีบแทนนิน (proแอนโธไซยานิดิน) และสีน้ำเงินสีดำสีน้ำเงิน ระบุว่า แทนนิน hydrolysised(2) ตรวจสอบทดสอบ โดยสารละลายวานิลลินไฮโดรคลอไรด์สารละลายวานิลลินไฮโดรคลอไรด์ (0.5 มิลลิกรัมละลายวานิลลินใน 0.5 mL ของเอทานอล (95%) และเพิ่ม 0.5 mL ของน้ำ และ 3 mL ของ HC1) ผลิตเป็นสีส้ม ดังนั้น 25 รงควัตถุอาจจะประกอบด้วยแทนนิน สีแดงสีส้มในการทดสอบนี้ ระบุว่า แทนนิน(3) ทดสอบตรวจสอบ (proแอนโธไซยานิดิน) แทนนินจากบีบโดย TLC (I)Under the detection condition for คาทีชิน oroligo-โปรแอนโธไซยานิดิน(di- to tetramer) of TLC, the spot indicated only the starting point. Therefore, the รงควัตถุ 30 possibly contains the higher polymerized condensed tannin (proแอนโธไซยานิดิน).(4) Validation test of condensed tannin (proแอนโธไซยานิดิน) by TLC (II)The รงควัตถุ pretreated by acid hydrolysis (added HC1 and maintained 80°C in a water bath for 30 minutes). The hydrolysate indicated a clear red color, - 23 -suggesting that แอนโธไซยานิดิน may have been generated. The hydrolysate analyzed by TLC, gave the spot for แอนโธไซยานิดิน, therefore the original (i.e. before hydrolysis) รงควัตถุ includes pro แอนโธไซยานิดิน (Fig4).[0120] Results5 The above-mentioned data suggests that the purified รงควัตถุสีแดง from sawpalmetto contained no carotenoids, but contained higher, polymerized condensed tannin (proแอนโธไซยานิดิน).Example 810 [0121] Assay for poly phenol contentTotal poly phenol content was measured by using Folin Ciocalteu reagent. Measuring method25mg of purified รงควัตถุสีแดง from ปาล์มใบเลื่อย in application 1, wasละลายใน 100mL ของ 50%V/V เอทานอล และแตกออก 4 ครั้ง ด้วยน้ำกลั่น และตัวอย่าง 15 2 mL ใส่ในหลอดทดสอบ เพิ่ม 2mL ของ Folin Ciocalteu สารละลายผสม สองกับกลั่นน้ำ และกวน หลังจาก 3 นาที เพิ่ม 2mL 10%w/v โซเดียม ไบคาร์บอเนต (NaHCO3) สารละลาย และนั้นกระตุ้นทำที่ 25° C สำหรับ 60 นาที หลังจากนั้น การ absorbance ที่ 655nm ที่ถูกกำหนด โดยเครื่องทดสอบกรดด่าง มีเส้นโค้งมาตรฐาน เตรียมของ dilutions คาทีชินสารละลาย หลังจากนั้นเทียบเท่ากับเนื้อหา 20 คาทีชิน (มิลลิกรัม/100 กรัม) เป็นโพลีรวมวางเนื้อหาถูกคำนวณ ผลลัพธ์ [0122]30-40 %w/w โดยวิเคราะห์เนื้อหาวางโพลีรวมของรงควัตถุสีแดงบริสุทธิ์จากปาล์มใบเลื่อยได้อื่น ๆ ส่วนประกอบของรงควัตถุสีแดงไม่ใช่วางโพลี 25 ถือเป็นการดำรงอยู่ของไขมันที่เหลือตัวอย่าง 9[0123] ว่า NYG-1 ระบุ cytotoxicity hepatocyte ปกติจะได้รับการทดสอบ ที่ ผลของ NYG-1 การเจริญเติบโตของเซลล์ L-02 ได้รับการทดสอบ โดยใช้บรรทัดเซลล์ hepatocyte 30 L-02 NYG-1 ทำให้เกิดการเจริญเติบโตเซลล์ hepatocyte ปกติในพื้นที่ซึ่งมีทั้งแบบ และ เวลาขึ้นอยู่กับลักษณะ (Fig. 6)ตัวอย่าง 10[0124] ว่า NYG-1 บ่งชี้ว่า มีทดสอบผลเจริญเติบโตป้องกันมะเร็ง hepatocellular (คาร์โล) 35 มีสองหลัก hepatocellular มะเร็งเซลล์บรรทัด HepG2 และ MHCC97L used. In a high dose, NYG-1 stimulated the growth of HCC cells (Fig. 7). When - 24 -HCC cells were treated with NYG-1 at doses more than 100gg/mL, a significant increase of HCC growth was observed.Example 115 [0125] The stimulating effect of NYG-1 on HCC cells was observed, and then,whether NYG-1 can suppress growth, migration and invasion of vascular endothelial cells was validated. The growth activity of cells under exposure to NYG-1 was

[0101] สรุปเมธอส-20- 307,900 เซลล์การเพิ่มจำนวน, VEGF-Induced เป้าหมาย: ปริมาณมนุษย์ปริมาณวิธี Spectrofluorimetric ของเซลล์การเพิ่มจำนวนกระสายยา: 0.4% DMSO signif เกณฑ์ Ag .:> 50% การเพิ่มขึ้นของการเพิ่มจำนวนเมื่อเทียบกับการตอบสนองVEGF165 บ่มเพาะเวลา / อุณหภูมิ: 2 วัน @ 37 ° C signif เกณฑ์มด .:> 50% การยับยั้งการ VEGFiss เหนี่ยวนำให้เกิดการเพิ่มจำนวนบัฟเฟอร์บ่มเพาะ M199 ขนาดกลาง 10% FBS, 101.1g / mL เฮ, pH7.4 [0102] ผลการผลการวิจัยแสดงให้เห็นในต่อไปนี้Table5 NGY-1 (รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อย) แสดงให้เห็นกิจกรรมที่เป็นปฏิปักษ์ 1001.tg/mL (. เข้มข้นสุดท้าย) นำเสนอที่โดดเด่น5 กิจกรรมปฏิปักษ์ (140%). [0103] ตารางที่ 5: สรุป AK, DS-SMO, NYG-1 และกิจกรรม SMO แมว # Assay ชื่อ Spec ชุด Rep. Conc เกณฑ์ Ag มด. R เนื้อเยื่อ Resp Compound: AK, PT: 1154011 Meta 307,900 เซลล์การเพิ่มจำนวน, VEGF ที่เกิด 305353 ครวญเพลง 2 100> 50% ND 12% ครวญเพลง 2 10> 50% ND 2% Compound: DS-SMO, PT: 1154009 นาโนกรัม / มิลลิลิตร307,900 เซลล์การเพิ่มจำนวน, VEGF ที่เกิด 305353 ครวญเพลง 2 100> 50% ND 14% ครวญเพลง 2 10> 50% ND 0% Compound: NYG-1 PT: 1151625 TG / mL 307,900 เซลล์การเพิ่มจำนวน , VEGF ที่เกิด 305353 ครวญเพลง 2 100> 50% ND 140% ครวญเพลง 2 10> 50% ND 30% Compound: SMO, PT1154010 nWmL 307,900 เซลล์การเพิ่มจำนวน, VEGF ที่เกิด 305353 ครวญเพลง 2 100> 50% ND 14% ครวญเพลง 2 10> 50% ND 1% [0104] ผลมาจากการ IC50 / EC50 ถูกแสดงไว้ในตารางต่อไปนี้ 6. IC50 / EC50 ค่าของรงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยที่คำนวณได้ที่ 12:12 SU5416 เป็นที่รู้จักกันเอเจนต์ต้านการสร้างหลอดเลือดใหม่(ศัตรู). 10 [0105] ตารางที่ 6: IC501ECso ชี่พร้อมกันแมว # Assay ชื่อ Ref คอมพ์ 1C50 / ECso IC50 Batch / EC50 307,900 เซลล์การเพิ่มจำนวน, VEGF ที่เกิด-มด SU5416 0.48RM 305,353 0.12uM [0106] จากข้างต้นก็จะแสดงให้เห็นว่ารงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยสามารถระงับการเพิ่มจำนวนการเปิดใช้งาน และการสร้างหลอดเลือดใหม่ของ VEGF เซลล์เหนี่ยวนำให้เกิดในเซลล์บุผนังหลอดเลือดหลอดเลือด. 15 ตัวอย่างที่ 5 [0107] กิจกรรมต่อต้านเนื้องอกของรงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อย(ก) รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยปราบปราม hepatocarcinoma มนุษยชนใน heterograft ของรูปแบบเมาส์เปลือย. [0108] วัสดุ20 NYG-1 รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อย (เกล็ดรงควัตถุสีแดงที่เตรียมไว้ในตัวอย่างที่1) สายพันธุ์ของเซลล์มะเร็ง: เซลล์ hepatocarcinoma มนุษย์สาย MHCC-97L (ตับสถาบันมะเร็งมหาวิทยาลัย Fudan (ชางไห่จีน)) - 21 - รูปแบบ Heterograft: เมาส์เปลือย [0109] วิธีlx105 ของเซลล์ MHC-97L (สาย hepatocarcinoma เซลล์มนุษย์) ได้รับเชื้อใต้ผิวหนังลงไปทางด้านขวาของเมาส์เปลือย หนึ่งสัปดาห์ต่อมา 0.1mg / กิโลกรัมและ 5 1mg / กิโลกรัม NYG-1 เป็นยาฉีดเข้าช่องท้องโดยเข้าไปในหนู. NYG-1 ถูกฉีดในลักษณะเดียวกันเพียงครั้งเดียวในแต่ละสัปดาห์เป็นเวลา 3 สัปดาห์ หลังจากนั้นหนูถูกเสียสละในวันที่ 25 และเนื้องอกที่เป็นของแข็งถูก extirpated ขนาดของแต่ละเนื้องอกเป็นสัดส่วนโดย Vernier caliper หลังจากการรักษาครั้งสุดท้ายของ NYF-1 และเนื้องอกอัตราการเจริญเติบโตถูกดึง ขนาดของเนื้องอกได้รับการคำนวณดังนี้ ปรับเล็กน้อย 10 และแกนหลักโดย Vernier caliper คำนวณแล้วเป็น (แกนน้อย) 2 * แกนหลัก / 2. [0110] เซลล์ MHCC-97L ถูกบ่มในบรรยากาศของ CO2 5% ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส สื่อที่ใช้วัฒนธรรมเป็น DMEM (GIBCO สหรัฐอเมริกา) เสริมด้วย 10% ปริมาตร / ปริมาตรความร้อนการใช้งานในซีรั่มวัวทารกในครรภ์และ100IU / mL penicillin G และ 10011g / mL streptomycin. 15 [0111] ผลดังแสดงในรูปที่3 (A) ในกลุ่มการรักษา NYG-1 เจริญเติบโตของเนื้องอกของรูปแบบเมาส์heterograft ถูกระงับในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับปริมาณ ในกลุ่มโดยเฉพาะอย่างยิ่งกับ LMG / มิลลิลิตร NYG-1 ระงับการเจริญเติบโตของเนื้องอก (ประมาณ 50% ของการควบคุม, p <0.01). 20 [0112] (ข) รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยปราบปรามการแสดงออกของ VEGF ในhepatocarcinoma มนุษย์ รูปแบบเมาส์เปลือย heterograft. [0113] ตัวอย่างเนื้องอกดังกล่าวข้างต้น (A) หลังจากปรับเป็นปั่นและปั่น แล้วปริมาณของปัจจัยการเจริญเติบโตของหลอดเลือดหลอดเลือด (VEGF) ในมนุษย์ hepatocarcinoma โดยวัดจากการทดสอบ ELISA. 25 [0114] ผลดังแสดงในรูปที่3 (ข) ในกลุ่มการรักษา NYG-1 การแสดงออกของปัจจัยการเจริญเติบโตของหลอดเลือดหลอดเลือด (VEGF) ใน hepatocarcinoma มนุษย์ในรูปแบบเมาส์เปลือย heterograft ถูกระงับในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับปริมาณ โดยเฉพาะอย่างยิ่งกลุ่มที่มี LMG / มิลลิลิตร NYG-1 ยับยั้งกิจกรรม VEGF มากกว่า 40% ของการควบคุม30 กลุ่ม (P <0.01). ตัวอย่างที่ 6 [0115] เป็นองค์ประกอบที่มีรงควัตถุสีแดงจากผลปาล์มใบเลื่อย เป็นสูตรต่อไปนี้ถูกจัดทำขึ้น. ส่วนผสมสูตร (mg / แท็บเล็ต) รงควัตถุสีแดงหรือเอทานอลสารสกัดจาก 50 แลคโตส 110 - 22 - ดีเซลลูโลสไมโคร30 ซิลิกา (SiO2) 5 แป้ง 5 น้ำหนักชิงชนะเลิศ 200 ตัวอย่าง 7 [0116] การทดสอบที่ได้รับการดำเนินการเพื่อระบุ รงควัตถุส่วนประกอบของบริสุทธิ์รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยในตัวอย่างที่ 1 5 [0117] อ้างอิงจากคู่มือขององค์ประกอบพฤกษเคมีของสมุนไพร GRAS และพืชเศรษฐกิจอื่น ๆ (1992 JAMES A, DUKE) (3 แคโรทีนและแทนนินจะมีการแสดง เป็นส่วนประกอบของรงควัตถุปาล์มใบเลื่อยถึงวันที่. ดังนั้นจึงมีความเป็นไปได้ว่าสารโพลีฟีนเช่น flavonoid เช่นเดียวกับการดังกล่าวข้างต้นสองชนิดของสารที่จะเป็นรงควัตถุส่วนประกอบของปาล์มใบเลื่อย. การทดสอบการตรวจสอบ 10 สำหรับข้างต้น กล่าวถึงสามชนิดของสารที่ได้รับการดำเนินการที่จะระบุสาร. [0118] A) การทดสอบการตรวจสอบสำหรับ carotenoid สารสารcarotenoid ใด ๆ ที่ไม่ได้ถูกตรวจพบโดยโคชั้นบาง ๆ(TLC) และประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC). 15 [0119] B ) การทดสอบการตรวจสอบสำหรับแทนนิน. (1) การทดสอบการตรวจสอบโดยคลอ III สารละลายเฟอร์ริกคลอไรด์III สารละลาย (ละลาย 9g ของ FeC13-6H20 ใน 100mL น้ำ) ผลิตสีเขียวสีน้ำตาล ดังนั้นจึงแนะนำว่ารงควัตถุอาจมีสารแทนนินข้น (โปรแอนโธไซยานิดิน) ในการทดสอบนี้สีเขียวสีน้ำตาล 20 บ่งชี้ว่าสารแทนนินข้น (โปรแอนโธไซยานิดิน) และสีฟ้าเป็นสีฟ้าเข้มบ่งชี้ว่าสารแทนนินhydrolysised. (2) การทดสอบการตรวจสอบโดยวานิล-ไฮโดรคลอไรสารละลายวานิล-ไฮโดรคลอไรสารละลาย(ละลาย 0.5mg vanillin 0.5 มิลลิลิตรของเอทานอล(95%) และเพิ่ม 0.5mL ของน้ำและ 3ml ของ HC1) ผลิตสีส้ม. 25 ดังนั้นอาจจะเป็นรงควัตถุที่มีแทนนิน สีแดงเป็นสีส้มในการทดสอบนี้แสดงให้เห็นแทนนิน. (3) การทดสอบการตรวจสอบของแทนนินข้น (โปรแอนโธไซยานิดิน) โดย TLC (I) ภายใต้สภาพการตรวจสอบสำหรับคาทีชิน oroligo- โปรแอนโธไซยา นิดิน (ดิเพื่อtetramer) ของ TLC จุดที่ระบุไว้เพียงจุดเริ่มต้น ดังนั้นรงควัตถุ 30 อาจจะมีสารแทนนินข้น polymerized สูงกว่า (โปรแอนโธไซยานิดิน). (4) การทดสอบการตรวจสอบของแทนนินข้น (โปรแอนโธไซยานิดิน) โดย TLC (II) รงควัตถุปรับสภาพโดย การย่อยสลายกรด (เพิ่ม HC1 และการบำรุงรักษา 80 ° C ในอ่างน้ำเป็นเวลา 30 นาที) ไฮโดรไลแสดงให้เห็นเป็นสีแดงชัดเจน- 23 - บอกว่าแอนโธไซยานิดินอาจได้รับการสร้าง ไฮโดรไลวิเคราะห์โดย TLC ให้จุดสำหรับแอนโธไซยานิดินจึงเดิม (คือก่อนที่จะย่อยสลาย) รงควัตถุรวมถึงโปรแอนโธไซยานิดิน (Fig4) ได้. [0120] ผลการค้นหา5 ข้อมูลดังกล่าวข้างต้น แสดงให้เห็นว่าบริสุทธิ์รงควัตถุสีแดงจากเห็นต้นปาล์มชนิดเล็กที่มีนอยด์แต่มีสูงกว่า polymerized แทนนินข้น (โปรแอนโธไซยานิดิน). ตัวอย่าง 8 10 [0121] Assay สำหรับเนื้อหาฟีนอลโพลีรวมเนื้อหาฟีนอลโพลีโดยวัดจากโดยใช้น้ำยา Folin Ciocalteu วิธีการวัด25mg ของบริสุทธิ์รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยในการประยุกต์ใช้ 1 ถูกละลายในเอทานอล100mL 50% V / V และเจือจาง 4 ครั้งด้วยน้ำกลั่นและตัวอย่าง 2mL 15 วางไว้ในหลอดทดลอง เพิ่มแล้ว 2mL ของ Folin Ciocalteu สารละลายเจือจางสองครั้งด้วยน้ำกลั่นและกวน หลังจาก 3 นาทีเพิ่ม 2mL 10% w / v โซเดียมไบคาร์บอเนต(NaHCO3) สารละลายและตื่นเต้นที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาที หลังจากนั้นการดูดกลืนแสงที่ 655nm ถูกกำหนดโดย spectrophotometer โค้งมาตรฐานถูกเตรียมไว้สำหรับชุดของเจือจางของคาทีชินสารละลาย หลังจากนั้นเทียบเท่า 20 คาทีชินเนื้อหา (มก. / 100 กรัม) ในขณะที่เนื้อหาของฟีนอลโพลีรวมที่คำนวณได้. [0122] ผลเนื้อหาฟีนอลโพลีทั้งหมดของบริสุทธิ์รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยเป็น30-40% w / w การ โดยการวิเคราะห์. องค์ประกอบอื่น ๆ ของรงควัตถุสีแดงอื่น ๆ นอกเหนือจากฟีนอลโพลี 25 ถือว่าเป็นการดำรงอยู่ของไขมันที่เหลือ. ตัวอย่าง 9 [0123] ไม่ว่า NYG-1 ที่จะแสดงให้เห็นความเป็นพิษตับปกติได้รับการทดสอบ ผลของ NYG-1 การเจริญเติบโตของ L-02 เซลล์ได้รับการทดสอบโดยใช้สายพันธุ์ของเซลล์ตับ 30 L-02 NYG-1 เหนี่ยวนำให้เกิดการเจริญเติบโตของเซลล์ตับปกติใน dose- และลักษณะที่ขึ้นกับเวลา(รูปที่. 6). ตัวอย่าง 10 [0124] ไม่ว่า NYG-1 แสดงให้เห็นฤทธิ์ต้านการเจริญเติบโตของมะเร็งตับ (HCC) 35 ได้รับการทดสอบ สองเซลล์มะเร็งตับที่สำคัญ HepG2 MHCC97L และถูกนำมาใช้ ในปริมาณที่สูง NYG-1 กระตุ้นการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งตับ (รูปที่. 7) เมื่อ- 24 - เซลล์มะเร็งตับได้รับการรักษาด้วย NYG-1 ในปริมาณที่มากกว่า 100gg / mL เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของการเติบโตของมะเร็งตับพบว่า. ตัวอย่าง 11 5 [0125] ผลการกระตุ้นของ NYG-1 ต่อเซลล์มะเร็งตับเป็นที่สังเกตแล้ว , ไม่ว่าจะ NYG-1 สามารถยับยั้งการเจริญเติบโตการอพยพและการรุกรานของเส้นเลือด endothelial เซลล์ถูกตรวจสอบ กิจกรรมเจริญเติบโตของเซลล์ภายใต้การสัมผัสกับ NYG-1

[ 0101 ] สรุป methos





- 20 -




การเพิ่มจำนวน 307900 เซลล์ , และเป้าหมายการศึกษาเซลล์เซลล์ของมนุษย์ วิธีการ spectrofluorimetric เซลล์การเพิ่มจำนวน

กระสายยา : 0.4 % signif DMSO . เกณฑ์ AG : > เพิ่มขึ้น 50% เมื่อเทียบกับการตอบสนองในการเพิ่มจำนวน

เวลา / อุณหภูมิการบ่มเนื้อเยื่อผู้ป่วยมะเร็งลํา 2 วัน @ 37 ° C signif เกณฑ์ Related . :> 50% inhibition vegfiss

) การเพิ่มจำนวนบ่มบัฟเฟอร์เปรียบเทียบปานกลาง 10% FBS
101.1g/ml ใส่ยา ph7.4
[ ]
โดยพบผลลัพธ์ ผลลัพธ์ที่ได้แสดงใน table5 ดังต่อไปนี้ ngy-1 ( รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อย ) แสดงกิจกรรมปฏิปักษ์ 1001.tg/ml ( เข้มข้นสุดท้าย ) นำเสนอกิจกรรมน่าทึ่ง
5 ปฏิปักษ์ ( 140 บาท ) .
[ 0103 ] ตารางที่ 5 : สรุปและ ,ds-smo nyg-1 SMO , และกิจกรรม
แมว#ชื่อชุดว่า spec . Rep . วท. หลักเกณฑ์เอจี . มด R

ผสมเยื่อ resp : อลาสกา , PT # : 1154011 meta
307900 เซลล์การเพิ่มจำนวนการศึกษาต่อ , 305353 ฮัม 2 100 > 50 % และ 12 %
ฮัม 2 10 > 50% ครั้งที่ 2 %
) : ds-smo , PT # : 1154009 ng / ml
307900 เซลล์การเพิ่มจำนวนการศึกษาต่อ , 305353 ฮัม 2 100 > 50% ครั้งที่ 14 %
ฮัม 2 10 > 50% และ 0 %
: nyg-1 ผสม ,PT # : 1151625 TG / ml
307900 เซลล์การเพิ่มจำนวนการศึกษาต่อ , 305353 ฮัม 2 100 > 50% ครั้งที่ 140 %
ฮัม 2 10 > 50% และ 30%
ผสม : SMO pt1154010 nwml
307900 การเพิ่มจำนวน , เซลล์ , และการศึกษา 305353 ฮัม 2 100 > 50% ครั้งที่ 14 %
2 10 50 ฮัม ครั้งที่ 1 %
% [ 0104 ] ผล ic50 / ec50 แสดงตามตารางที่ 6 การ ic50 / ec50
คุณค่าของรงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยคำนวณที่ 0.12pm . su5416 เป็น
รู้จักเอเจนต์ต้านการสร้างหลอดเลือดใหม่ ( antagonist ) .
10 [ 0105 ] ตารางที่ 6 : ic501ecso

แมว# HIST พร้อมกัน ( ชื่ออังกฤษ คอมพ์ 1c50 / ecso ชุด ic50 / ec50
307900 เซลล์การเพิ่มจำนวนการศึกษาต่อ , มด su5416 0.48rm 305353 0.12um
[ 0106 ] จากข้างต้นมันแสดงให้เห็นว่ารงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยสามารถระงับการเพิ่มจำนวนการสร้างหลอดเลือดใหม่ของการศึกษาและการกระตุ้นเซลล์ในเซลล์บุผนังหลอดเลือดเซลล์

15 ตัวอย่าง 5
[ 0107 ] ต้านเนื้องอกปาล์มใบเลื่อย
รงควัตถุสีแดงจากกิจกรรมของ( ก ) รงควัตถุสีแดงจากปาล์มใบเลื่อยปราบมนุษย์ hepatocarcinoma ใน heterograft รูปแบบเมาส์เปลือย 0108
[ ]
20 nyg-1 รงควัตถุสีแดงจากวัสดุ , ปาล์มใบเลื่อย ( ตกผลึกรงควัตถุสีแดงเตรียม

ตัวอย่าง 1 ) เซลล์มะเร็ง :mhcc-97l Cell hepatocarcinoma มนุษย์ ( ตับมะเร็งสถาบันมหาวิทยาลัย Fudan ( Shang Hai , จีน ) )






- 21 -


heterograft แบบเปลือยเมาส์ [ 0109 ] วิธี
lx105 ของ mhc-97l เซลล์ ( Cell hepatocarcinoma มนุษย์ปลูกเชื้อ
subcutaneously ในด้านขวาของเมาส์ที่เปลือย หนึ่งสัปดาห์ต่อมา , 0