MATERIALS AND METHODS
1. Laboratory screening of soil microorganisms tolerant to herbicide
1.1 Fungi
Poisoned food method was used for tolerant screening of soil fungi to three herbicides, atrazine, ametryn and paraquat, at 2.1, 1.0, 0.5, 0.25 and 0.125 NRR (Normal Recommended Rate). Ten-folds of each concentration was prepared as stock solution, then 1 ml of stock solution was prepared as stock solution was mixed together with 9 ml of warm PDA (55-60) in test tube and mixed homogenously with vortex mixture then plated in petridish. One dey later a mycelium disc of 7 days old culture was inoculated onto the centre of petridish and incubated at room tempcratures. Colony diameter of tested fungi on poisoned media was measured daily and compared to control to obtain the relative inhibition percentage. The tolerant isolate of fungi will be sclected at inhibition percenrage lower than 50%.
1.2 Bacteria
Bacteial isolates, 24 hrs old culture was prepared as bactcrial suspensions to 0.5 OD at wavelength 650 nm., then 1 ml of these suspensions was mixed into warm NA in petridishes. The filter paper disc. 0.5 mm diameter was dipped in herbicide suspension at 2.0, 1.0, 0.5, 0.25 and 0.125 NRR. One paper disc from each concentration was placed onto the medium which contained bacterial suspension, then incubated at room temperatures for 24-48 hours. Clear zone around paper disc was measured; the tolerant isolate would not produce the clear zone as compared to the sensitive bacteria.
วัสดุและวิธีการ
1 การคัดกรองทางห้องปฏิบัติการของจุลินทรีย์ดินทนต่อสารกำจัดวัชพืช
1.1 เชื้อราวิธีการอาหารเป็นพิษที่ใช้สำหรับการคัดกรองใจกว้างของเชื้อราในดินถึงสามสารเคมีกำจัดวัชพืช, อาทราซีน, ametryn และ paraquat, 2.1, 1.0, 0.5, 0.25 และ 0.125 NRR (อัตราการแนะนำปกติ) สิบเท่าของความเข้มข้นของแต่ละคนได้เตรียมการแก้ปัญหาสต็อกแล้ว 1 มล. ของการแก้ปัญหาหุ้นถูกจัดทำขึ้นเป็นโซลูชั่นหุ้นถูกผสมเข้าด้วยกันกับ 9 มิลลิลิตร PDA อุ่น (55-60) ในหลอดทดลองและผสม homogenously ที่มีส่วนผสมน้ำวนชุบแล้วใน petridish หนึ่งที่พวกเขาจะต่อแผ่นเส้นใยจาก 7 วัฒนธรรมเก่าวันที่ได้รับเชื้อไปยังศูนย์กลางของ petridish และบ่มที่อุณหภูมิห้อง tempcraturesเส้นผ่าศูนย์กลางโคโลนีของเชื้อราทดสอบในสื่อวางยาพิษถูกวัดทุกวันและเมื่อเทียบกับการควบคุมที่จะได้รับร้อยละยับยั้งญาติ ใจกว้างแยกของเชื้อราจะ sclected ที่ percenrage ยับยั้งต่ำกว่า 50%.
1.2 แบคทีเรียเชื้อ bacteial, 24 ชั่วโมงวัฒนธรรมเก่า ๆ ได้ถูกเตรียมเป็นสารแขวนลอย bactcrial ถึง 0.5 od ที่ความยาวคลื่น 650 นาโนเมตร.แล้ว 1 มิลลิลิตรของสารแขวนลอยเหล่านี้ถูกผสมลงใน na อบอุ่นใน petridishes แผ่นกระดาษกรอง เส้นผ่าศูนย์กลาง 0.5 mm ถูกจุ่มลงในสารแขวนลอยสารกำจัดวัชพืชที่ 2.0, 1.0, 0.5, 0.25 และ 0.125 nrr กระดาษแผ่นหนึ่งจากความเข้มข้นของแต่ละคนถูกวางลงบนกลางซึ่งประกอบด้วยเชื้อแบคทีเรีย, แล้วบ่มที่อุณหภูมิห้องสำหรับ 24-48 ชั่วโมง วงใสรอบแผ่นกระดาษวัด;ใจกว้างแยกนั้นจะไม่สร้างโซนที่ชัดเจนเมื่อเทียบกับเชื้อแบคทีเรียที่ไวต่อความรู้สึก.
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
วัสดุและวิธีการ
1 ห้องปฏิบัติการตรวจจุลินทรีย์ดินความอดทนสารกำจัดวัชพืช
1.1 เชื้อรา
วิธี Poisoned อาหารใช้สำหรับคัดกรองป้องกันความผิดพลาดของเชื้อราดินสามสารเคมีกำจัดวัชพืช atrazine, ametryn และพารา คว็อท 2.1, 1.0, 0.5, 0.25 และ 0.125 NRR (ปกติแนะนำอัตรา) สิบพับของแต่ละความเข้มข้นเตรียมไว้เป็นโซลูชันหุ้น แล้ว 1 ml ของหุ้นได้เตรียมแก้ปัญหาหุ้นถูกผสมกับ 9 ml ของ PDA อุ่นได้ (55-60) ในหลอดทดสอบ และ homogenously ผสมกับส่วนผสม vortex แล้ว ชุบใน petridish หนึ่ง dey ต่อ inoculated ไปยังศูนย์กลางของ petridish และ incubated ที่ห้อง tempcratures ดิสก์ mycelium ของวันเก่า เส้นผ่าศูนย์กลางโคโลนีของเชื้อราที่ทดสอบบนสื่อ poisoned วัดทุกวัน และเมื่อเปรียบเทียบกับตัวควบคุมเพื่อให้ได้เปอร์เซ็นต์ยับยั้งสัมพัทธ์ Isolate ป้องกันความผิดพลาดของเชื้อราจะ sclected ที่ยับยั้ง percenrage ต่ำกว่า 50%
1.2 แบคทีเรีย
Bacteial แยก 24 น.วัฒนธรรมเก่าเตรียมไว้เป็น bactcrial บริการไป 0.5 OD ที่ความยาวคลื่น 650 nm., แล้ว 1 ml ของบริการเหล่านี้ถูกผสมลงในนาอบอุ่นใน petridishes แผ่นดิสก์กระดาษกรอง เส้นผ่าศูนย์กลาง 0.5 mm ถูกจุ่มลงในสารกำจัดวัชพืชระงับที่ 2.0, 1.0, 0.5, 0.25 และ 0.125 NRR กระดาษเพียงแผ่นเดียวจากแต่ละความเข้มข้นถูกวางลงบนกลางที่อยู่ระงับเชื้อแบคทีเรีย แล้ว incubated 24-48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง โซนล้างรอบแผ่นดิสก์กระดาษได้วัด isolate ป้องกันความผิดพลาดจะทำในโซนที่ชัดเจนเมื่อเทียบกับแบคทีเรียสำคัญ
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)