ตัวอย่างวัฒนธรรม (เตรียมพร้อมหลังจากที่การกำจัดของพื้นผิวที่ไม่ละลายน้ำ
) ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 กรัม
เป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 ° C และสารละลายปราศจากเซลล์ถูก
นำมาใช้เป็นส่วนหนึ่ง extracellular เซลล์ที่ถูกแบ่งออกเป็นสอง
ส่วน; ส่วน 50 มล. ถูกระงับ
ในน้ำเกลือทางชีวภาพล้างสองครั้งใน
น้ำเกลือและนำมาเลี้ยงในน้ำเกลือสำหรับการกำหนดมวลเซลล์
gravimetrically ในขณะที่ส่วนที่สอง (150 มล. )
ถูกระงับใน McIlvaine แช่เย็น na-acetate buffer
(pH 7) และเรียกส่วนที่ไม่ละลายน้ำ เศษ
นี้ถูกรบกวนด้วย sonication การสอบสวนในสองระเบิด
1 นาทีกับ sonicator BRAUN 2000 บนน้ำแข็ง. สารละลาย
จากการหยุดชะงักที่เกิดขึ้นนี้ส่วนที่สามเรียกว่า
เศษ cytosolic อนุภาค
(หรือเซลล์ที่เกี่ยวข้อง) เศษที่ได้รับเป็นเม็ด
โดยการหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 g เป็นเวลา 15 ฝน (4 ° C)
เม็ดถูกแขวนไว้ในบัฟเฟอร์และเกิดขึ้น
ส่วนที่สี่
การแปล กรุณารอสักครู่..