2.4.2. Multiplex primer extension r

2.4.2. Multiplex primer extension reaction
Multiplex (10-plex) PEXT reaction was performed in a total volume
of 20 μL containing 1 U of AmpliTaq DNA polymerase, Stoffel fragment
(Applied Biosystems, Foster City, CA), 1 × PCR buffer (10 mM Tris–
HCl, 10 mM KCl, pH 8.3), 4 mM MgCl2, 0.1 pmol of amplified DNA,
1 pmol each of 10 allele-specific primers, 10 μM each of dATP, dCTP,
dGTP and 5 μM dTTP and biotin-11-dUTP. The cycling conditions for
the extension reactions were as follows: initial denaturation 98 °C for
2 min, followed by 10 cycles of 98 °C for 15 s, 65 °C for 15 s, 72 °C for
15 s. All PEXT reaction products were subjected to a final denaturation
step at 98 °C for 10 min and placed immediately on ice before the
dipstick assay.

0/5000

จาก: -

เป็น: -

ผลลัพธ์ (ไทย) 1: [สำเนา]

คัดลอก!

2.4.2 การ multiplex ปฏิกิริยาต่อพื้นทำปฏิกิริยา PEXT ล็ก (10-เพลกซ์) ปริมาณรวมของ 20 μL ประกอบด้วย 1 U AmpliTaq เอ็นเอพอลิเมอเรส ส่วน Stoffel(ใช้ Biosystems ฟอสเตอร์ซิตี้ CA), 1 × PCR บัฟเฟอร์ (10 มม.ตรี –HCl, 10 mM KCl, pH 8.3), 4 mM MgCl2, pmol 0.1 เอ็นเอาต์1 pmol ละของไพรเมอร์ allele เฉพาะ 10, 10 μM ละของ dATP, dCTPdGTP และ 5 μM dTTP และ dUTP ไบโอติน-11 เงื่อนไขสำหรับการขี่จักรยานปฏิกิริยาส่วนขยายมีดังนี้: denaturation เริ่มต้น 98 ° C สำหรับ2 นาที ตาม ด้วยรอบ 10 98 องศาเซลเซียส 15 s, 65 ° C 15 s, 72 ° C สำหรับ15 s ถูกต้องทั้งหมดผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา PEXT denaturation ขั้นสุดท้ายขั้นตอนที่ 98 ° C 10 นาทีและน้ำแข็งวางไว้ในทันทีก่อนdipstick วิเคราะห์

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:[สำเนา]

คัดลอก!

2.4.2 ไพรเมอร์ขยาย Multiplex ปฏิกิริยา
Multiplex (10 เพล็กซ์) ปฏิกิริยา PEXT ได้ดำเนินการในปริมาณ
20 ไมโครลิตรมี 1 U ของโพลิเมอร์ AmpliTaq ดีเอ็นเอชิ้นส่วน Stoffel
(Applied Biosystems, ฟอสเตอร์ซิตี, แคลิฟอร์เนีย) 1 ×บัฟเฟอร์ PCR (10 มิลลิ Tris-
HCl 10 มิลลิ KCl ค่า pH 8.3) 4 มิลลิ MgCl2 0.1 pmol ดีเอ็นเอขยาย
1 pmol แต่ละ 10 ไพรเมอร์อัลลีลที่เฉพาะเจาะจง 10 ไมครอนแต่ละ dATP, dCTP,
dGTP และ 5 ไมครอน dTTP และไบโอติน-11-dUTP เงื่อนไขการขี่จักรยานสำหรับปฏิกิริยาการขยายมีดังนี้ denaturation เริ่มต้น 98 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 นาทีตามด้วย 10 รอบของ 98 ° C เป็นเวลา 15 วินาที, 65 ° C เป็นเวลา 15 วินาที, 72 ° C เป็นเวลา15 วินาที ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาทั้งหมด PEXT ถูกยัดเยียดให้ denaturation สุดท้ายขั้นตอนที่ 98 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีและวางไว้บนน้ำแข็งก่อนที่จะมีการทดสอบdipstick

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:[สำเนา]

คัดลอก!

2.4.2 . การมัลติเพล็กซ์แบบคู่ปฏิกิริยา
( 10 เครื่อง ) ปฏิกิริยา pext แสดงใน
ปริมาณ 20 μ L มี 1 U ของ amplitaq DNA polymerase stoffel ~
( Applied Biosystems ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย ) , บัฟเฟอร์ PCR 1 × ( 10 มม. นอกจากนี้ –
HCL 10 mm . , pH 8.3 ) ชุด 4 มม. , 0.1 pmol ดีเอ็นเอขยาย
1 pmol แต่ละอัลลีลไพรเมอร์จำเพาะ 10 , 10 μ M แต่ละ datp dctp
, ,dgtp และ 5 μ M dttp และ biotin-11-dutp . จักรยานเงื่อนไข
นามสกุลปฏิกิริยา ดังนี้ เริ่มต้น ( 98 ° C
2 นาที ตามด้วย 10 รอบ 98 ° C 15 , 65 ° C เป็นเวลา 15 วินาที , 72 ° C
15 วินาที ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดจะถูก pext ปฏิกิริยาขั้นตอนสุดท้ายที่ 98 ° C (
10 นาที และอยู่ได้ทันทีบนน้ำแข็งก่อน
บ้าอำนาจการทดสอบ

การแปล กรุณารอสักครู่..

ภาษาอื่น ๆ

การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.