The plasmid DNA–Lipofectamine2000 ratio was used according to
the manufacturer protocol. The liposome–plasmid injected rats
received each one ml of a Lipofectamine2000-OptiMEM (Invitrogen,
France) containing 100 μg plasmid (100 μl containing 10 μg plasmid
for mice) with or without the application of the USE. A group received
the vehicle alone (Lipofectamine2000-OptiMEM), while the sham
group had the heart exposed but was not subjected to any injections.
The LacZ adenovirus group received one ml (5×200 μl) of a saline
solution (NaCl) containing 9×109 viral particles (vp). Eight groups
of rats were defined according to the myocardial injected vector and
the time-course till sacrifice: Sham (n=4), LacZ adenovirus (n=4),
liposomes alone (vehicle, n=4), liposomes-LacZ plasmid without
USE (n=4), liposomes-GFP plasmid+USE (n=8) these animals
were sacrificed after 4 days. Among the liposomes-LacZ plasmid+USE
groups (n=12), some were sacrificed 4, 8 or 15 days after injection
(n=4/group). Six mice were injected either with LacZ plasmid+USE
and 4 with vehicle+USE. The siRNA–Lipofectamine2000 mix was also
prepared according to the manufacturer protocol, and 30 μg of siRNA
was used per injection. The negative control siRNA-Cy3 rats were
sacrificed 6 h following the siRNA injections (n=12), while the
siTRPC1-Cy3 after four days (n=8).
อัตราส่วนดีเอ็นเอ lipofectamine2000 พลาสมิดถูกนำมาใช้ตามที่ผู้ผลิตโปรโตคอล
ลิโปโซม-พลาสมิดหนู
ฉีดที่ได้รับแต่ละคนมิลลิลิตร lipofectamine2000-optimem (Invitrogen, ฝรั่งเศส
) ที่มี 100 ไมโครกรัมพลาสมิด (100 ไมโครลิตรที่มี 10 g
พลาสมิดสำหรับหนู) โดยมีหรือไม่มีการประยุกต์ใช้ในการใช้งาน กลุ่มที่ได้รับ
รถคนเดียว (lipofectamine2000-optimem) ในขณะที่การซ้อม
กลุ่มมีหัวใจสัมผัส แต่ไม่ได้อยู่ภายใต้การฉีดยาใด ๆ .
กลุ่ม adenovirus lacZ ได้รับหนึ่ง มล. (5 × 200 ไมโครลิตร) ของการแก้ปัญหา
น้ำเกลือ (NaCl) ที่มี 9 × 109 อนุภาคไวรัส (VP) แปดกลุ่ม
ของหนูถูกกำหนดตามเวกเตอร์ฉีดเนื้อหัวใจตายและ
เวลาแน่นอนจนเสียสละ: เสแสร้ง (n = 4), adenovirus lacZ (n = 4), ไลโปโซม
คนเดียว (ยานพาหนะ, n = 4),ไลโปโซม-lacZ โดยไม่ต้องใช้พลาสมิด
(n = 4), ไลโปโซม-GFP พลาสมิดการใช้งาน (n = 8)
เหล่านี้ถูกสัตว์เสียสละหลังจาก 4 วัน ระหว่างการใช้พลาสมิดไลโปโซม-lacZ กลุ่ม
(n = 12), บางคนเสียสละ 4, 8 หรือ 15 วันหลังจากการฉีด
(n = 4/group) หกหนูที่ถูกฉีดทั้งที่มีการใช้งาน
lacZ พลาสมิดและ 4 ด้วยการใช้ยานพาหนะ ผสม siRNA lipofectamine2000-ยังเป็น
จัดเตรียมตามโปรโตคอลผู้ผลิต, และ 30 ไมโครกรัมของ
siRNA ถูกนำมาใช้ต่อการฉีด siRNA-cy3 การควบคุมเชิงลบหนูเป็น
เสียสละ 6 ชั่วโมงหลังฉีด siRNA (n = 12) ในขณะที่
sitrpc1-cy3 หลังจากสี่วัน (n = 8)
การแปล กรุณารอสักครู่..
ใช้ตามอัตราส่วนของ plasmid DNA–Lipofectamine2000
โพรโทคอลผู้ผลิต Liposome–plasmid ที่ฉีดหนู
รับ ml แต่ละหนึ่งของ Lipofectamine2000-OptiMEM (Invitrogen,
ฝรั่งเศส) ประกอบด้วย 100 μg plasmid (μl 100 ประกอบด้วย 10 μg plasmid
สำหรับหนู) มี หรือไม่ มีการประยุกต์ใช้ กลุ่มรับ
รถเพียงอย่างเดียว (Lipofectamine2000-OptiMEM), ในขณะซัมซุยโป
กลุ่มมีหัวใจสัมผัส แต่ไม่ได้ถูกยัดเยียดให้ฉีดใด ๆ .
กลุ่ม adenovirus LacZ ที่รับหนึ่ง ml (5 × 200 μl) ของน้ำเกลือเป็น
โซลูชัน (NaCl) ประกอบด้วย 9 × 109 ที่ไวรัสอนุภาค (vp) กลุ่ม 8
ของหนูถูกกำหนดตามเวกเตอร์ฉีด myocardial และ
เวลาหลักสูตรจนถึงการเสียสละ: ซัมซุยโป (n = 4), LacZ adenovirus (n = 4),
liposomes เพียงอย่างเดียว (รถ n = 4), plasmid liposomes LacZ โดย
ใช้ (n = 4), liposomes GFP plasmid ใช้ (n = 8) สัตว์เหล่านี้
ได้เสียสละหลังจาก 4 วัน ระหว่าง plasmid liposomes LacZ ใช้
กลุ่ม (n = 12), บางคนได้เสียสละ 4, 8 หรือ 15 วันหลังจาก injection
(n=4/group) หนูหกถูกฉีดทั้งที่ มี plasmid LacZ ใช้
4 กับรถใช้ ผสม siRNA–Lipofectamine2000 ยังถูก
เตรียมตามโพรโทคอลผู้ผลิต และ μg 30 ของ siRNA
ใช้สำหรับฉีด หนู siRNA Cy3 ควบคุมค่าลบถูก
6 h ต่อฉีด siRNA ที่เสียสละ (n = 12), ในขณะ
Cy3 siTRPC1 หลังจากสี่วัน (n = 8)
การแปล กรุณารอสักครู่..