1. Rapid boiling method for small p

1. Rapid boiling method for small plasmids in E. coli (Holmes & Quigley,1981; modified
by Riggs & McLachlan, 1986)
- Centrifuge 1.5 ml of culture in Eppendorf tube and resuspend pellet in 200 µl of STET
buffer (8.0% sucrose, 0.5% Triton X-100, 0.05 M EDTA, 0.05 M Tris-HCl, pH 8.0)
containing 10 µl of lysozyme (20 mg/ml, freshly dissolved in H2O) and 20 µl ZnCl2 (1% in
H2O)
- Incubate at about 100°C for 45-55 sec, then cool on ice
- Centrifuge for 5 min and add supernatant to Eppendorf tube containing 480 µl of IS mix
(400 µl isopropanol, 80 µl 5 M ammonium acetate). Incubate at RT for 20-30 min
- Centrifuge for 5 min, wash DNA pellet with 70% cold ethanol twice and dry in a vacuum
dessiccator
- Resuspend pellet in 20 µl of storage TE buffer or in RNase buffer (see RNase treatment)
before using for agrose gel electrophoresis

0/5000

จาก: -

เป็น: -

ผลลัพธ์ (ไทย) 1: [สำเนา]

คัดลอก!

1. ต้มวิธีสำหรับ plasmids เล็กใน E. coli (โฮล์มส์แอนด์ควิกเล่ย์ 1981 แก้ไขอย่างรวดเร็วโดยริกส์และราห์แมคลาชแลน 1986)-วัฒนธรรมใน Eppendorf หลอด 1.5 มิลลิลิตรเครื่องหมุนเหวี่ยง และ resuspend เม็ดใน 200 µl ของ STETบัฟเฟอร์ (ซูโครส 8.0%, 0.5% Triton X-100, 0.05 M EDTA, 0.05 M HCl ทริ ค่า pH 8.0)ประกอบด้วย 10 µl ของ lysozyme การถูก (20 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร สดละลายใน H2O) ถึง 20 µl ZnCl2 (1% ในH2O)-ฟักประมาณ 100° c เป็นเวลา 45-55 วินาที แล้วเย็นน้ำแข็ง-เครื่องหมุนเหวี่ยงสำหรับ 5 นาที และเพิ่ม supernatant Eppendorf หลอดประกอบด้วย 480 µl ของผสมอยู่(400 µl isopropanol, 80 µl 5 ม.แอมโมเนียอะซิเตท) ฟักที่ RT 20-30 นาที-เครื่องหมุนเหวี่ยง 5 นาที ล้างเม็ดดีเอ็นเอ ด้วย 70% เอทานอลเย็นสองครั้ง และแห้งในสุญญากาศdessiccator-เม็ด resuspend 20 µl ของเก็บบัฟเฟอร์ TE หรือ RNase บัฟเฟอร์ (ดู RNase รักษา)ก่อนที่จะใช้สำหรับ agrose เจอิ

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:[สำเนา]

คัดลอก!

1. วิธีการเดือดอย่างรวดเร็วสำหรับพลาสมิดเล็ก ๆ ใน E. coli (โฮล์มส์และควิกลีย์ 1981; การแก้ไข
โดยริกส์ & McLachlan, 1986)
- เครื่องปั่นเหวี่ยง 1.5 มล. ของวัฒนธรรมในหลอด Eppendorf และ resuspend เม็ดใน 200 ไมโครลิตรของ STET
บัฟเฟอร์ (8.0% ซูโครส 0.5% Triton X-100, 0.05 M EDTA, 0.05 M Tris-HCl ค่า pH 8.0)
มี 10 ไมโครลิตรของไลโซไซม์ (20 mg / ml ละลายสดใน H2O) และ 20 ไมโครลิตร ZnCl2 (1% ใน
H2O)
- บที่เกี่ยวกับ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 45-55 วินาทีแล้วเย็นบนน้ำแข็ง
- เครื่องปั่นเหวี่ยงเป็นเวลา 5 นาทีและเพิ่มใสหลอด Eppendorf มี 480 ไมโครลิตรของผสม
(400 ไมโครลิตร isopropanol 80 ไมโครลิตร 5 M แอมโมเนียมอะซิเตท) ฟักไข่ที่ RT 20-30 นาที
- เหวี่ยงเป็นเวลา 5 นาทีล้างเม็ดดีเอ็นเอกับเอทานอล 70% เย็นสองครั้งและแห้งในสูญญากาศ
dessiccator
- Resuspend เม็ดใน 20 ไมโครลิตรของการจัดเก็บ TE บัฟเฟอร์หรือ RNase บัฟเฟอร์ (ดูรักษา RNase)
ก่อนที่จะใช้ สำหรับ agrose ข่าวคราว

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:[สำเนา]

คัดลอก!

1 . วิธีการถ่ายโอนพลาสมิดอย่างรวดเร็วเดือดขนาดเล็กใน E . coli ( โฮล์มส์ & ควิกลีย์ , 1981 ; แก้ไขโดยริกส์ & แมคลาชแลน , 1986 )- เครื่อง 1.5 ml ของวัฒนธรรมในเพนดอร์ฟ หลอดและ resuspend เม็ดµ 200 ลิตรไม่ตัดออก .บัฟเฟอร์ ( 8.0 เปอร์เซนต์ซูโครส , 0.5% Triton X-100 , 0.05 M EDTA , 0.05 ม. หรือ HCl , pH 8.0 )บรรจุ 10 µ L ของไลโซไซม์ ( 20 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ละลายใน zncl2 สด H2O ) และฉัน 20 µ ( 1% ในH2O )- ฟักไข่ประมาณ 100 ° C 45-55 วินาที แล้วเย็นบนน้ำแข็ง- เครื่องเป็นเวลา 5 นาที และเพิ่มสูงถึง 480 ลิตรเพนดอร์ฟหลอดบรรจุµคือผสม( 400 µแอล ไอโซโพรพานอล 80 µ L 5 M แอมโมเนียมอะซิเตท ) ฟักไข่ที่ RT สำหรับ 20-30 นาที- เครื่องปั่นเหวี่ยงสำหรับ 5 นาทีล้างเม็ดดีเอ็นเอด้วย 70% เอทานอลเย็นสองครั้ง และแห้งในสูญญากาศdessiccator- resuspend เม็ด 20 µ l กระเป๋า TE บัฟเฟอร์หรือบัฟเฟอร์ ( ดูเลสเลสรักษา )ก่อนที่จะใช้สำหรับ agrose เจลอิเลคโตรโฟเรซีส

การแปล กรุณารอสักครู่..

ภาษาอื่น ๆ

การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.